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基礎(chǔ)掃盲貼:如雷貫耳的BLAST到底是啥?

 解螺旋 2020-08-27

作者:麥子

轉(zhuǎn)載請注明:解螺旋·臨床醫(yī)生科研成長平臺

Blast(Basic Local Alignment Search Tool),,可謂生信領(lǐng)域最常用的工具,,拿到一段序列(測序結(jié)果,或設(shè)計(jì)好的引物等等),,一般都會去blast一下,,查找相似序列。在查找相似序列的基礎(chǔ)上衍生出了各種作用,,比如鑒別基因組,,蛋白質(zhì),查找特定靶區(qū),,檢驗(yàn)引物特異性等等,。自打1990年由Altschul SF等人開發(fā)出來,NCBI引進(jìn),,至今還在改善,,更新算法,。

量身選用數(shù)據(jù)庫

網(wǎng)址:https://blast.ncbi.nlm./Blast.cgi

做BLAST不僅要考慮選擇哪種算法,還要考慮選哪個數(shù)據(jù)庫來比對,。我們最常用的可能就人類或小鼠基因組+轉(zhuǎn)錄組,,但仍可根據(jù)自身情況選擇合適的數(shù)據(jù)庫,能大大節(jié)省檢索時間,,并提高返回的結(jié)果的質(zhì)量和特異性,。

不過這么多庫怎么選呢,可以點(diǎn)一下旁邊的問號(Help),,查看選所的數(shù)據(jù)庫的說明:

再者,,如果你已經(jīng)知道你要查的序列來自哪個物種,或你要跟哪個物種比對,,也可以在Organism選項(xiàng)框中輸入,,也可以減少BLAST的操作程序,節(jié)省時間,。

不同的序列要用不同的算法

BLAST工具跟一套手術(shù)器械似的,,不同的算法干不同的活,得根據(jù)自己需要的信息,,選擇需要的工具,。可以看到檢索頁面上方有5個選項(xiàng)卡,,分別代表5種查詢類型,。

各大類之下可能還有幾個小分類可選:

它們的功能要點(diǎn)總結(jié)如下:

結(jié)果解讀

找一小段蛋白序列來試一下那個新算法Quickblastp??赡苁俏业男蛄刑塘?,并沒有感覺到Quick (0.0) 如果你的序列夠長可以體會一下。

首先會看到一個表頭,,展示這次比對的基本信息,,如比對類型、序列長度,、所選的數(shù)據(jù)庫等等,,就不貼圖了。

接下來就是圖形描述(Graphic Summary),。

第一部分是保守域,,當(dāng)檢測到時才會顯示。

第二部分是比對上的序列(hit)在查詢序列上的分布,。有刻度的條帶是序列的坐標(biāo),其下的每一個細(xì)條帶代表一段hit,,其顏色是按上方的顏色標(biāo)尺顯示比例得分(alignment score),,得分越高,,相似度越高。另外還可注意E value,,E值越低,,相似度越高,點(diǎn)擊可顯示詳細(xì)信息,。

保守域也可點(diǎn)開查看詳情,,在每個hit上懸浮鼠標(biāo)可看到它編碼的蛋白的3D結(jié)構(gòu)圖以及功能等詳細(xì)說明,在下方的列表中點(diǎn)開+號還可看到具體的序列,。

這樣便可對你的序列特征和功能有個大致的了解,。

參考資料:

1.http:///21223/how-does-blast-work/

2.http:///26522/blast-off-the-basic-local-alignment-search-tool-explained/

3.ftp://ftp.ncbi.nlm./pub/factsheets/HowTo_BLASTGuide.pdf

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