電影《滾蛋吧！腫瘤君》里,，熊頓的主治醫(yī)生梁醫(yī)生霸道卻不失風(fēng)度與溫柔地對熊頓說：“我負(fù)責(zé)治病,，你負(fù)責(zé)相信我！”,。

然而，事實證明，僅僅依靠傳統(tǒng)治療腫瘤的三駕馬車——“手術(shù)”,、“化療”和“放療”以及梁醫(yī)生這碗霸氣外漏的心靈雞湯，并沒有什么用,。

近年來,，隨著對腫瘤免疫微環(huán)境研究的興起和深入研究，通過激發(fā)和增強機體的免疫功能,，增強腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力,，從而實現(xiàn)控制和殺傷腫瘤細胞的抗腫瘤療法——腫瘤免疫治療，成為腫瘤治療研究領(lǐng)域的后起之秀,，已逐步發(fā)展為繼手術(shù),、放療和化療之后的第四大治療方法，在臨床治療腫瘤過程中顯示出了巨大的潛力,。

要是梁醫(yī)生能手握“腫瘤免疫療法”（不是魏則西事件里的“假腫瘤免疫療法”哦）這把利劍,，那么熊頓身體里面目猙獰的腫瘤君是不是分分鐘無所遁形呢？

為了幫助梁醫(yī)生拯救萬千少女,，讓小編先來分析分析腫瘤免疫療法里的一個關(guān)鍵角色——樹突狀細胞（Dendritic cell,，DC）。

DC是目前已知體內(nèi)最重要的抗原遞呈細胞,。在腫瘤環(huán)境中,，DC通過攝取、加工處理和呈遞腫瘤抗原來激活T細胞免疫響應(yīng),，達到清除腫瘤細胞的目的,。

通俗來說，DC就像是北京赫赫有名的“朝陽群眾”,，一旦發(fā)現(xiàn)有不法分子（腫瘤君）,，立即懷揣著情報向警察（T細胞）舉報,，然后警察（T細胞）開著警車拘捕不法分子（腫瘤君）。

但是只有成熟的DC（訓(xùn)練有素的“朝陽群眾”）才具有激活T細胞免疫響應(yīng)的能力,。接下來,，小編帶你走向訓(xùn)練DC的第一步——如何從小鼠骨髓內(nèi)提取分離并培養(yǎng)DC。

1.脫頸椎處死C57BL/6小鼠（5~6周齡）,，75%酒精中浸泡10 min,；

2.無菌狀態(tài)下取股骨和脛骨，75%酒精浸泡2 min后用RPMI-1640培養(yǎng)基沖洗3次,；

3.分別于骨兩端剪去約2 mm,，暴露骨髓腔，用1 mL注射器（26G針頭）吸取RPMI-1640培養(yǎng)液,，從骨干的一端刺入骨髓腔,，將骨髓沖洗到50 mL無菌離心管中，每根骨頭反復(fù)4~6遍,。離心,，1500 rpm×10 min。

4.棄去上清,，加入5 mL紅細胞裂解液,，輕輕吹打均勻后于室溫下靜置2 min溶解紅細胞，加入25 mLPBS,，4℃離心，1500 rpm×5 min,，棄上清,。用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌2次。

5.用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌后將細胞用RPMI-1640完全培養(yǎng)基懸浮,，用10 mL移液管吸取離心管內(nèi)的細胞懸液,，過200目細胞篩于50 mL離心管中，細胞計數(shù)后離心,。

用含rmGM-CSF（20 ng/mL）和IL-4（10 ng/mL）的RPMI-1640完全培養(yǎng)基混懸后分至6孔培養(yǎng)板中（5×105個細胞）,，并在每孔中加入至2 mL。

6.將細胞培養(yǎng)板放入37℃,，含5% CO₂的孵箱中培養(yǎng),。此時為day 0。

7.培養(yǎng)48 h后,，每孔補充3 mL含rmGM-CSF（20 ng/mL）和IL-4（10 ng/mL）的RPMI-1640完全培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng)。此時為day 2,。

8.培養(yǎng)48 h后,，吸取孔內(nèi)2 mL培養(yǎng)基于50 mL離心管內(nèi),，離心500 g×7 min，去上清后用含rmGM-CSF（20 ng/mL）和IL-4（10 ng/mL）的RPMI-1640完全培養(yǎng)基2 mL混懸后加入到孔內(nèi),，繼續(xù)培養(yǎng),。此時為day 4。

9.培養(yǎng)72 h后,，用吸管輕輕吹打后收集所有懸浮細胞,，即為富集的小鼠骨髓來源的樹突狀細胞。此時為day 7,。

至于后面的技能,，還需要各位科研工作者的萬般努力。

萬千少女靠梁醫(yī)生,，梁醫(yī)生靠各位科研小白了,。