2017年2月27日,，英國《自然》旗下《科學報告》在線發(fā)表倫敦金士頓大學、金士頓醫(yī)院,、新維多利亞醫(yī)院,、阿拉伯聯(lián)合酋長國法蒂瑪醫(yī)學院的研究報告，發(fā)現(xiàn)浸潤性乳腺癌與高風險人類乳頭瘤病毒（HPV）有相關性,。

　　雖然HPV已經(jīng)涉及多種癌癥病因,，但是評估HPV存在于乳腺癌的研究產(chǎn)生了很大爭議。到目前為止,，大多數(shù)研究集中于乳腺癌中存在病毒脫氧核糖核酸（DNA）,，仍然無法直接證明HPV持續(xù)存在可引起乳腺癌的浸潤性。盡管若干國家已經(jīng)開展這些研究,，但是英國此前尚無關于乳腺癌存在高風險HPV及其生物活性的研究。

　　本研究使用聚合酶鏈反應和桑格測序從110份英國患者新鮮乳腺組織樣本篩選出12種高風險HPV類型DNA,，再使用蛋白質印跡法和斑點印跡法從HPV-DNA陽性樣本篩選出HPV癌蛋白（癌基因表達后得到的蛋白質）表達,。

　　結果發(fā)現(xiàn)42%的乳腺組織存在高風險HPV，其中病毒活性僅見于一些浸潤性癌（5/26）,。

　　因此,，該研究在英國首次發(fā)現(xiàn)HPV癌蛋白在浸潤性病例中的選擇性表達，可使高風險HPV在某些類型乳腺癌發(fā)生中發(fā)揮作用,。

• 人類乳頭瘤病毒（HPV）：一組形態(tài)和基因結構相似但致瘤表現(xiàn)不同的DNA病毒,，可引起人類上皮的良性和惡性腫瘤。該類病毒感染人體的表皮與黏膜組織,，目前約有170種類型的HPV被判別出來,，有些時候HPV入侵人體后會引起疣甚至癌癥,，但大多數(shù)時候則沒有任何臨床癥狀。大概有30～40種HPV可通過性行為傳染到生殖器及周邊皮膚,，而其中又有些可引起生殖器疣,。若反復感染某些高風險且又無疣等癥狀的HPV類型，可能發(fā)展成為癌前病變,，甚至是浸潤性癌,。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，99.7%的子宮頸癌都是由于感染HPV造成,。

• 聚合酶鏈反應（PCR）：美國生物化學家穆利斯（Mullis）發(fā)明的體外酶促合成特異DNA片段技術,，在體外模擬發(fā)生于細胞內DNA快速擴增特定基因或DNA序列復制過程，用引物和DNA聚合酶進行體外擴增特定DNA區(qū)域片段,，當存在模板DNA,、底物、上下游引物和耐熱的DNA聚合酶時,，經(jīng)過多次“變性-復性-延伸反應”的循環(huán)過程,，痕量模板DNA可擴增至幾百萬倍。

• 桑格測序：英國生物化學家桑格（Sanger）等人發(fā)明的DNA測序法,，又稱雙脫氧法或鏈終止法,，是以2,3-雙脫氧核苷三磷酸為底物快速測定DNA核苷酸序列的方法，即使用能在DNA模板鏈上互補參入?yún)s不能延伸的4種雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與正常的4種脫氧核苷三磷酸（dNTP）競爭,，合成的互補鏈可以在任何位置終止,，獲得長短不一的反應產(chǎn)物，通過電泳分離,，從4條泳道上的條帶順序就能讀出DNA的序列,，是目前DNA測序的首選方法。

• 蛋白質印跡法：又稱免疫印跡法,，一種分析和鑒定特定蛋白質的技術,。是將蛋白質分子從電泳凝膠轉移到固相介質，然后用抗體進行免疫檢測的方法,。即將混雜的蛋白質經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后,，轉移至固相膜上，再用標記的抗體或二抗與之反應,，以顯示膜上特定的蛋白條帶,。先將經(jīng)過聚丙烯酰胺凝膠電泳分離的蛋白質用電泳法等轉移到膜（如硝酸纖維素膜、尼龍膜等）上,，再用與特定蛋白質結合的標記抗體或配體對轉移膜上的蛋白質進行檢測,，由此可判斷特定蛋白質的存在與否和分子量大小等。由于該方法與英國生物化學家薩瑟恩（Southern）發(fā)明的DNA印跡法（Southern blot）以及此后美國斯坦福大學發(fā)明的RNA印跡法（Northern blot）相似,，故被稱為西方印跡法,、西方墨點法,、西式吸印雜交（Western blot）。

• 斑點印跡法：又稱斑點雜交,、點漬法,，一種定性檢測核酸或蛋白質的技術，即將待測核酸或蛋白點樣于固相載體上,，以同位素或非同位素標記探針與之雜交,，通過顯影或顯色而進行檢測。將點狀樣品吸印到特定的膜上進行檢測的方法,。如用硝酸纖維素膜吸印固體培養(yǎng)基上的菌落或噬斑,，在膜上原位裂菌或裂解噬菌體后，與特定的標記探針雜交,，從而直接從轉化的DNA文庫或噬菌體文庫中篩選所需要的克?。粚⒉煌♂尪鹊牡鞍踪|吸附在膜上進行顯色反應,，可以進行微量蛋白質的半定量,。

Sci Rep. 2017 Feb 27;7:43591.

Association of High Risk Human Papillomavirus and Breast cancer: A UK based Study.

Salman NA, Davies G, Majidy F, Shakir F, Akinrinade H, Perumal D, Ashrafi GH.

Kingston University London, London, UK; Kingston Hospital, London, UK; The new Victoria hospital, London, UK; Fatima College of Health Sciences, UAE.

Infection by human papillomaviruses (HPVs) has been implicated in the aetiology of a variety of cancers. Studies evaluating the presence of HPVs in breast cancer (BC) have generated considerable controversy. To date, most studies have focused on the presence of viral DNA in BC; however there are important gaps in evidencing the role of HPV persistence in the invasiveness of BC. While these studies have been conducted in several countries, none, on the presence and biological activity of high risk (HR) HPV in BC has been done in the UK. Hence, we aimed to investigate these gaps by screening a total of 110 fresh breast tissue specimens from UK patients for the presence of twelve HR-HPV types DNA using PCR and Sanger sequencing. Samples positive for HPV-DNA were screened for viral oncoprotein expression using western blot and dot blot. Data obtained showed the presence of HR-HPVs in 42% of breast tissues of which the viral activity was only confirmed in a number of invasive carcinomas (5/26). This finding, the first to report in the UK, suggests that the selective expression of viral oncoprotein in invasive cases may propose a role for HR-HPVs in the development of some types of BC.

PMID: 28240743

DOI: 10.1038/srep43591

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