根據(jù)《關(guān)于加快推進(jìn)新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)施意見》聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜發(fā)﹝2020﹞181號(hào)的文件要求，各地及縣域內(nèi)的核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)陸續(xù)建成,，并逐步投入使用,，那么具有新冠病毒核酸檢測(cè)能力的實(shí)驗(yàn)室的安全要求是否真正符合生物安全要求，中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)衛(wèi)生工程分會(huì)副主任委員中國(guó)微生物學(xué)會(huì) 生物安全專委會(huì)副主任委員江蘇省疾病預(yù)防控制中心所長(zhǎng)謝景欣教授在新冠肺炎相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)宣貫會(huì)上,，依據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范及其他一系列的衛(wèi)生行標(biāo),，重點(diǎn)依據(jù)GB19489-2008，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)以問(wèn)答的形式進(jìn)行深入的解讀和分享,，筆者對(duì)其內(nèi)容整理回憶,，以便大家參考。 

問(wèn)1：PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心控制目標(biāo)

1. 控制病原污染：保證生物安全,，防止病原污染操作人員和環(huán)境

2. 控制核酸污染：保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,，防止核酸污染試劑、樣本,、操作過(guò)程

問(wèn)2：實(shí)驗(yàn)室需要幾個(gè)功能區(qū),？

傳統(tǒng)PCR分為四區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū),、核酸擴(kuò)增區(qū),、產(chǎn)物分析區(qū)

本次新冠：

使用RT-PCR需三個(gè)區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)

使用一體機(jī),，需要二個(gè)區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū),、提取擴(kuò)增分析區(qū)

問(wèn)3：實(shí)驗(yàn)室各個(gè)區(qū)必須相鄰布置嗎？

不 是  實(shí)驗(yàn)室可分為兩種形式：

分散布置形式——各個(gè)區(qū)不相鄰

集中布置形式——各個(gè)區(qū)相鄰

分散形式：各個(gè)實(shí)驗(yàn)室用房彼此相距較遠(yuǎn),，呈分散布置形式,；各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間不易產(chǎn)生交叉污染；簡(jiǎn)化復(fù)雜的“特殊”的條件要求,。

問(wèn)4：必須設(shè)置樣本接收室嗎,？

不是  可直接進(jìn)入樣本制備間

若在樣本接收室進(jìn)行滅活等操作，診室應(yīng)為BSL-2(在生物安全柜中打開樣本包裝盒,，對(duì)采樣管等進(jìn)行表面消毒,，而后拿出進(jìn)行滅活)

問(wèn)5：一定要設(shè)緩沖間嗎？

是  緩沖間是阻隔空氣交換的首要措施,。

集中式,，一定需要PCR專用走廊？

不,，首先設(shè)置緩沖間,，所謂PCR走廊并無(wú)多少積極作用。面積不足時(shí),，不設(shè)走廊,。

關(guān)于PCR專用走廊作用：主要是將實(shí)驗(yàn)室與其他區(qū)域分開，而這種分開并無(wú)實(shí)質(zhì)性意義,，在控制交叉污染方面,，并無(wú)多少積極作用。相反,，更易導(dǎo)致交叉污染,，應(yīng)優(yōu)先設(shè)置緩沖間。若設(shè)走廊,，可作共用前室,，存放備用物品，放置更衣柜,，以更換清潔工作衣帽,，不可在工作區(qū)儲(chǔ)存?zhèn)溆梦锲贰?/p>

問(wèn)6：PCR走廊必須前后兩個(gè)出口嗎？

不是,，臨檢導(dǎo)則：進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單方向進(jìn)行,，即：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→核酸擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū) ，上述核心指單向工作流程而非人員“一去不復(fù)返”

注意：上述單項(xiàng)工作流程?指同一批人“串聯(lián)工作”

實(shí)際工作中?時(shí)常,，不同人員同時(shí)在不同區(qū)域,，“并聯(lián)工作”,，因此，說(shuō)不上“按單一方向進(jìn)行”

走廊乃清潔區(qū)-因此,，所謂的“PCR走廊”并非需設(shè)前后兩個(gè)出口-更何況完全可以不要這條走廊,。

問(wèn)7：實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)污物走廊？潔污分流,？

不是   實(shí)驗(yàn)室生物安全的本質(zhì)：不允許污染外泄,，廢棄物可安全打包，必要時(shí)表面消毒,，安全運(yùn)送出來(lái)滅活,。也可原地消毒----即無(wú)“污物”，則不需污物走廊

難道設(shè)了污物走廊就可以讓走廊被污染嗎,？可以肆無(wú)忌憚,？皆不可以！

設(shè)置污物走廊（帶來(lái)問(wèn)題）1.擠占面積2.實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)復(fù)雜化（多開口,，多通道）3.實(shí)驗(yàn)室操作復(fù)雜化（管理體系更復(fù)雜）……諸多問(wèn)題

問(wèn)8：必須設(shè)置傳遞窗嗎,？

不是  根據(jù)需要設(shè)置，適于難于隨身攜帶時(shí)

不需要“潔污分流”

分散式：各區(qū)之間無(wú)傳遞窗可言

集中式：需要特別注意：樣本制備間與核酸擴(kuò)增之間,，易有交叉污染,，--是否設(shè)置，需根據(jù)具體情況進(jìn)行評(píng)估

其他毗鄰工作區(qū)：相互之間,，空氣交換并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果---為了方便,，宜設(shè)置

問(wèn)9：是否一定要用B2型生物安全柜？

不是   無(wú)論是A2還是B2均符合生物安全要求,。

A2與   B2有好壞之分嗎,？

沒有   生物安全防護(hù)性能是“相同”的，均符合要求,，無(wú)“高低貴賤”之分。

適用性不同

BSC-II-B1/B2型-適用于散發(fā)有毒有害氣體的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)

BSC-II-A1/A2型-適用于不散發(fā)有毒有害氣體的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)

選擇BSC-II- B2,，需注意：

負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),，選用B2生物安全柜，需要特別當(dāng)心,，易出現(xiàn)問(wèn)題,。B2排風(fēng)量很大，啟動(dòng),，停止,，實(shí)驗(yàn)室壓力急劇變化。謹(jǐn)慎選用：排風(fēng)翻N倍多,，啟停過(guò)程壓力波動(dòng)很大,，控制難度很大,，甚至運(yùn)行失控，失敗,，需格外謹(jǐn)慎,。

問(wèn)10：實(shí)驗(yàn)室（含緩沖間）必須設(shè)置洗手池嗎？

不是  樣本制備間：是BSL-2/3實(shí)驗(yàn)室  GB19489-2008如果實(shí)驗(yàn)室不具備供水條件,，則應(yīng)設(shè)非手動(dòng)手消毒滅菌裝置

可以設(shè)洗手池的前提是-應(yīng)有下水消毒滅菌措施,，（活毒廢水滅活設(shè)施），不得將污染物排入社會(huì),。否則不可以,！

問(wèn)11：實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)沖淋裝置嗎？

不是  沒用傷害便沒有防護(hù)   GB19489-2008：若操作腐蝕性物質(zhì),，必要時(shí)應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置,。

問(wèn)12：實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)洗眼裝置嗎？

是   GB19489:應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)配備洗眼裝置

大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室為了避免上水供應(yīng)和下水處理所帶來(lái)的的麻煩,，通常選用洗眼瓶,，這也是國(guó)外實(shí)驗(yàn)室常見的做法。

問(wèn)13：是否一定要在實(shí)驗(yàn)室設(shè)置高壓鍋,？

不是  GB19489-2008：應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室或其所在建筑內(nèi)配備壓力蒸汽滅菌器或其他適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備,。

不得在核心工作區(qū)間設(shè)置高壓鍋？

不是  理由同上

問(wèn)14：在實(shí)驗(yàn)室核心工作間設(shè)置,？在實(shí)驗(yàn)室所在建筑內(nèi)設(shè)置,？

在樓層間（同層）設(shè)置（大部分）

問(wèn)15：PCR實(shí)驗(yàn)室是BSL-2實(shí)驗(yàn)室嗎？

不是  只有樣本制備區(qū)有生物安全問(wèn)題,，從事病原微生物實(shí)驗(yàn)（包括醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室人體樣本檢測(cè)）的是BSL-2/3實(shí)驗(yàn)室,，其他區(qū)均非BSL-X實(shí)驗(yàn)室

問(wèn)16：各工作區(qū)需要設(shè)置更衣室嗎？

宜設(shè)  除試劑準(zhǔn)備間外,，進(jìn)入其他工作間均需更衣（穿進(jìn)不穿出），有條件的,，可為樣本制備間，核酸擴(kuò)增間,，產(chǎn)物分析間分別設(shè)置更衣室,。若無(wú)更衣室，可在走廊或其他干凈的地方更衣,。在緩沖間更衣-不可取,。

問(wèn)17：新冠檢測(cè)是否一定要負(fù)壓BSL-2,？

不是  無(wú)論是常壓（普通P2）還是負(fù)壓（P2+）,均符合新冠病毒核酸檢測(cè)要求,，以及其他所有適用于BSL-2實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)要求,，合規(guī)合理。

問(wèn)18：BSL-2負(fù)壓是否更加安全,？

負(fù)壓的主要作用是保護(hù)環(huán)境而非實(shí)驗(yàn)人員,，室內(nèi)負(fù)壓，可阻止室內(nèi)空氣無(wú)組織外泄

負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室：--設(shè)計(jì)正確,，才能起到保護(hù)人員的作用

--設(shè)計(jì)不正確,，則更加危險(xiǎn)，不如不做,。

正確設(shè)計(jì)須設(shè)計(jì)定向氣流,，GB19489:防護(hù)區(qū)房間內(nèi)送風(fēng)口和排風(fēng)口的布置應(yīng)符合定向氣流的原則。送風(fēng)口,、排風(fēng)口的布置應(yīng)利于減少房間內(nèi)的渦流和氣流死角,。送排風(fēng)口，盡量均勻,，對(duì)稱布置,。

實(shí)驗(yàn)室壓力如不確定，臨檢導(dǎo)則:為防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域,，可按照空氣壓力遞減的方式進(jìn)行,。

試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)方向

有一個(gè)矛盾，  上述壓力遞減存在一個(gè)矛盾,。

樣本制備區(qū)是BSL-2,，相對(duì)第三區(qū)為正壓，空氣流向核酸擴(kuò)增區(qū),，不符合生物安全原則,。

應(yīng)對(duì)措施（1）若墻體多密閉-問(wèn)題不大

若房間不相鄰-問(wèn)題不在

應(yīng)對(duì)措施（2）樣本制備間與核酸擴(kuò)增間持平

四區(qū)壓力分布：高、平,、平、低

問(wèn)19：PCR實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)需要高度過(guò)濾嗎,？

應(yīng)區(qū)別對(duì)待,，無(wú)論P(yáng)CR需要多少工作區(qū) ，只有樣本制備區(qū)是生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）,，排風(fēng)應(yīng)高效過(guò)濾,。其他工作區(qū),，排風(fēng)不需要高效過(guò)濾。

問(wèn)20：為什么負(fù)壓P2排風(fēng)可以不過(guò)濾,？

P2+：設(shè)計(jì)為負(fù)壓,，是業(yè)主自住選擇的高配措施，而非標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

P2:出于與初衷保持一致（保護(hù)環(huán)境）

專家建議：應(yīng)高效過(guò)濾后排出-合理性,，但這不是標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,，不可強(qiáng)制。

問(wèn)21：緩沖間設(shè)計(jì)為最高壓或最低壓是否合理,？

不  1.設(shè)計(jì)為最高壓,，有名曰“防護(hù)墻”，設(shè)計(jì)為最低壓,，有名曰“負(fù)壓陷阱”,，無(wú)論是正壓還是負(fù)壓，在人員開啟緩沖劍門進(jìn)出過(guò)程,，都會(huì)增加工作區(qū)的空氣外溢的程度（有國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn),，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為依據(jù)）。壓力遞減的作用,，保持定向氣流  阻止空氣外溢,、倒流 是鐵律，最可靠,、有效的措施,。

問(wèn)22：實(shí)驗(yàn)室空氣是否一定要凈化？

不  房間空氣是否凈化與實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒有什么關(guān)系,。換句話說(shuō),，不需要凈化。

問(wèn)23：氣流是否一定要上送下排,？

不是  上送上排  上送下排均可

問(wèn)24：如何設(shè)置通風(fēng)空調(diào),？

可采用簡(jiǎn)單做法：普通排風(fēng)裝置（如排風(fēng)扇）+溫度控制裝置（如分體空調(diào)、暖氣等）,，作恒定負(fù)壓設(shè)計(jì),，向室外排風(fēng)即可達(dá)到減少空氣外溢的目的。

可采用復(fù)雜做法：集中空調(diào)系統(tǒng)-作恒定負(fù)壓設(shè)計(jì),，順便達(dá)成潔凈,、恒溫、恒濕 ,。

集中空調(diào)系統(tǒng)原則：集中送風(fēng),、分別排風(fēng)

排風(fēng)：試劑準(zhǔn)備間，可只送不排，若排風(fēng),，應(yīng)設(shè)置獨(dú)立排風(fēng)口

樣本準(zhǔn)備間:屬于BSL-X,，若排風(fēng)，應(yīng)設(shè)置獨(dú)立排風(fēng)

核酸擴(kuò)增間,、產(chǎn)物分析間：可分別獨(dú)立排風(fēng),，也可倆間合并排風(fēng)

四區(qū)合并排風(fēng)是不可以的，容易在停機(jī)后產(chǎn)生生交叉污染,，停機(jī)后,，空氣倒流回房間，存在被空氣污染的可能性,。

備注：本文中的臨檢導(dǎo)則指《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則》