感染導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)主要由TLRs下游的NF-κB和MAPK所介導(dǎo)，而且能夠上調(diào)細(xì)胞因子,、趨化因子和促存活因子等各種效應(yīng)分子,，對機(jī)體的存活至關(guān)重要。很多病原體已經(jīng)進(jìn)化出阻斷機(jī)體相關(guān)信號通路的策略,，促進(jìn)病原體的存活,，如Yersinia菌依靠效應(yīng)蛋白YopJ阻斷TAK1的激活【1】。作為回應(yīng),，宿主細(xì)胞通過啟動細(xì)胞死亡途徑如焦亡來限制感染,。焦亡主要由炎癥小體驅(qū)動CASP1和CASP11活化，進(jìn)而導(dǎo)致孔道形成蛋白GSDMS的切割而介導(dǎo),，同時伴隨著IL-1β 的釋放（『珍藏版』特別推薦丨全景式展現(xiàn)細(xì)胞焦亡研究歷程——在細(xì)胞死亡的研究中,，從來不缺少有趣的故事）。巨噬細(xì)胞中,，IL-1β 的成熟需要2個信號：上調(diào)pro-IL-1β 和誘導(dǎo)NLRP3介導(dǎo)IL-1β 的成熟【2】,。NLRP3和ASC的相互作用招募pro-CASP1，CASP1對pro-IL-1β 進(jìn)行切割,，并通過GSDMD形成的孔道釋放成熟的IL-1β ,。近期研究顯示Yersinia通過效應(yīng)蛋白YopJ抑制TAK1或IKK導(dǎo)致RIPK1和CASP8對GSDMD的切割，釋放N端形成孔道,，導(dǎo)致細(xì)胞死亡,，并且促進(jìn)NLRP3炎癥小體依賴的IL-1β 釋放過程（重點(diǎn)推薦！Science+PNAS更新認(rèn)識,，賦予Caspase-8參與細(xì)胞焦亡過程的新功能——邵峰點(diǎn)評）【3】,，但具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

近日，來自美國塔夫茨大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Alexander Poltorak在Science雜志發(fā)表文章,，cFLIP_L protects macrophages from LPS-induced pyroptosis via inhibition of complex II formation,，報道了cFLIP_L在炎癥反應(yīng)和細(xì)胞死亡中的重要作用，即LPS單獨(dú)刺激條件下,，如果缺失長片段亞型cFLIP_L則促進(jìn)復(fù)合物II的形成,、驅(qū)動細(xì)胞焦亡和IL-1β 的釋放。

LPS和TAK1抑制劑5z7聯(lián)用可以模擬Yersinia感染導(dǎo)致的CASP8介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡,。研究人員首先發(fā)現(xiàn)LPS和5z7聯(lián)用導(dǎo)致的細(xì)胞死亡依賴于RIP1和GSDMD的酶活性,，但是IL-1β 的釋放量較低。如果提前使用LPS預(yù)處理,，然后加5z7刺激則顯著提高IL-1β 的釋放,，且IL-1β 釋放的增加依賴于TRIF、RIP1,、CASP8和NLRP3,，但不依賴于GSDMD。LPS預(yù)處理能延遲細(xì)胞死亡,，這表明LPS能誘導(dǎo)某些促生存因子的表達(dá),，而5z7則抑制其表達(dá)，經(jīng)篩選發(fā)現(xiàn)了編碼CASP8的酶失活同源物cFLIP的基因,，Cflar,。25KDa的短亞型cFLIPR能完全阻斷CASP8的活化，而55KDa的長亞型cFLIPL則部分阻斷,。LPS預(yù)處理能夠在5z7存在條件下維持Cflar的mRNA水平,，且LPS預(yù)處理能提高cFLIPR和cFLIPL的蛋白水平。LPS/5z7同時孵育導(dǎo)致cFLIPL在2 h內(nèi)被切割,，而LPS預(yù)處理組中這種切割被延遲,，且CASP8的活化增加。此外,，LPS預(yù)處理導(dǎo)致CASP1,、CASP3、CASP7,、CASP9和CASP11的活化和GSDMD的切割被延遲,，表明TAK1調(diào)控的細(xì)胞內(nèi)cFLIP決定了LPS/5z7誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡的速率和程度。

有趣的是,，LPS單獨(dú)刺激不能導(dǎo)致細(xì)胞死亡,，如果敲低cFLIP_L導(dǎo)致細(xì)胞對死亡更加敏感，而敲低cFLIPR則不行,；如果進(jìn)一步缺失TRIF或RIP1的酶活性則能逆轉(zhuǎn)細(xì)胞對死亡的敏感性,。此外,，LPS誘導(dǎo)的cFLIP_L缺失巨噬細(xì)胞的死亡機(jī)制與LPS/5z7驅(qū)動的細(xì)胞死亡不同，其缺乏CASP3,、CASP7和CASP9的活化,，而CASP8、CASP1和CASP11則被完全激活,，且CASP1和CASP11的活化依賴于CASP8的激活,。LPS誘導(dǎo)的cFLIPL缺失細(xì)胞死亡需要CASP8和GSDMD的存在，但不需要NLRP3,、CASP1和CASP11,，即LPS刺激條件下，cFLIP_L缺失僅僅促進(jìn)焦亡,，而LPS/5z7共處理導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和焦亡,。

那么cFLIP_L缺失如何調(diào)控細(xì)胞焦亡？cFLIP_L缺失巨噬細(xì)胞中,，LPS刺激2 h即可將RIP1和CASP8招募到FADD上,，即cFLIP_L缺失足以驅(qū)動LPS誘導(dǎo)的復(fù)合物II形成，且依賴于TRIF和RIP1酶活性,。而LPS/5z7同樣能驅(qū)動復(fù)合物II的形成,，且復(fù)合物形成早期檢測到cFLIPL的參與,。LPS/5z7導(dǎo)致RIP1的S166位磷酸化,，促進(jìn)復(fù)合物II中CASP3的結(jié)合；但cFLIP_L缺失細(xì)胞中復(fù)合物II形成和LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡不需要此類修飾,。表明cFLIP_L和RIP1的酶活性能調(diào)控復(fù)合物II的形成,，并決定細(xì)胞死亡的程度和模式。

最后,，LPS單獨(dú)刺激能夠?qū)е耤FLIP_L-KD巨噬細(xì)胞釋放大量的IL-1β ,，而且此過程依賴于TRIF、CASP8,、GSDMD和RIP1酶活性,。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)cFLIP_L-KD巨噬細(xì)胞中，CASP8對炎癥小體的活化和IL-1β 的成熟過程都非常重要,，而GSDMD對IL-1β 的釋放是必需的,。

總的來說，研究揭示了cFLIP_L是細(xì)胞死亡和炎癥反應(yīng)的重要調(diào)控因子,，構(gòu)建了cFLIP_L的作用模型：當(dāng)cFLIP_L水平足夠高時,，CASP8激活和細(xì)胞焦亡都將被抑制。當(dāng)cFLIP_L水平較低時,，CASP8易于形成同源二聚體進(jìn)行激活,，活化的CASP8切割并活化GSDMD驅(qū)動細(xì)胞焦亡,，激活NLRP3炎癥小體驅(qū)動IL-1β 的成熟和釋放。

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https://science./content/367/6484/1379