瘧疾屬于蟲媒性傳染性疾病,,在全球范圍內(nèi)仍然有較高的發(fā)病率和死亡率[1],隨著中國與國際的交流和合作越來越頻繁,,國內(nèi)的瘧疾感染并非罕見,。鏡檢是瘧疾檢測的確診方法[2,3],但并不是每個血常規(guī)標本均會進行血涂片制備和查找瘧原蟲,。邁瑞的BC-6800全自動血細胞分析儀,,在DIFF通道中對感染紅細胞(InR)進行分析,提供專用的“感染紅細胞”報警信息及“感染紅細胞數(shù)量(InR#)”,、“感染紅細胞千分比(InR‰)”定量參數(shù),,無需消耗其他試劑,可對每個血液標本進行瘧疾普遍篩查,。 研究目的 評價BC-6800的“感染紅細胞”報警信息,,以及InR#和InR‰這兩個參數(shù)在瘧疾流行區(qū)作為瘧疾樣本常規(guī)篩查工具的可行性。 材料方法 在云南騰沖(瘧疾流行區(qū))收集96例間日瘧感染的EDTA·K2抗凝血樣本,,另收集瘧疾非流行區(qū)的64例健康志愿者的血液樣本作為對照組,。雙盲法用光學顯微鏡和BC-6800分別檢測瘧疾樣本和正常樣本。瘧原蟲陽性的納入標準為鏡檢觀察厚血膜發(fā)現(xiàn)樣本中有處于環(huán)狀體,、滋養(yǎng)體,、裂殖體或配子體4個階段中任意一個或多個階段的瘧原蟲。 采用SPSS 分析軟件和ROC曲線等評估InR對瘧疾感染的診斷能力,,評價BC-6800與鏡檢的一致性,。 研究結果 1、BC-6800散點圖中特殊的散點群落提示瘧原蟲感染瘧疾感染樣本在BC-6800的散點圖中顯示為一個特殊的散點群落。如果樣本中有瘧原蟲感染的紅細胞,,且該類細胞數(shù)量達到一定數(shù)量時,,可以出現(xiàn)一群明顯不同于其他白細胞的粒子群(圖1a和1b),并觸發(fā)感染紅細胞報警,。在SF-Cube三維散點圖中,,通過旋轉(zhuǎn),可以更清晰地看到由感染紅細胞組成的粒子群(圖1c和1d),,圖1e為鏡下感染了間日瘧大滋養(yǎng)體的紅細胞,。圖1 BC-6800 DIFF通道檢測到瘧疾陽性樣本時的散點圖和鏡下瘧原蟲感染的紅細胞2、BC-6800 InR#及InR‰?yún)?shù)對間日瘧原蟲感染的檢測靈敏度和特異性以鏡檢為金標準,,對比BC-6800 InR‰ 檢測間日瘧原蟲感染的敏感性和特異性,。BC-6800 的InR‰?yún)?shù)對間日瘧原蟲感染的檢測敏感性為88.3%,特異性為84.3%,,見表1,。 表1 BC-6800 InR‰?yún)?shù)應用于 檢測間日瘧原蟲感染的敏感性和特異性 采用ROC曲線分析評價InR#的診斷能力結果見圖2,AUC為0.95,,最佳cut-off值為0.01×109/L,。 圖2. InR#用于間日瘧原蟲感染診斷的ROC曲線 將瘧原蟲感染樣本按InR數(shù)值大小分成三組,發(fā)現(xiàn)InR定量結果與原蟲密度相關,,InR高值組的原蟲密度大于InR低值組,,如表2。 表2 間日瘧組不同InR#樣本分組 及與原蟲密度的關系 組1,,InR#為 [0, 0.1] × 109/L,;組2,InR#為 [0.1, 2] × 109/L,;組3,,InR#為 ≥ 2 × 109/L;*第2組和第3組的原蟲密度高于第1組,,p < 0.05,。 研究結果 BC-6800提供了專用的“感染紅細胞InR”參數(shù)和報警,為進一步進行瘧疾相關檢測提供了客觀數(shù)據(jù),。這有助于建立瘧疾篩查和確診的新工作流程:在BC-6800血常規(guī)檢測時普遍地進行“感染紅細胞”篩查,,有瘧疾報警時,及時進行血涂片的制備和瘧原蟲的查找,,以確認或排除瘧疾感染,有效地縮短診療時間,、改善患者就醫(yī)體驗,。 目前國內(nèi)的輸入性瘧疾感染以惡性瘧為主,BC-6800對惡性瘧的篩查特異性與間日瘧相當,,但靈敏度低于間日瘧,。這可能與惡性瘧在人體內(nèi)感染時的發(fā)育周期有關,,惡性瘧小滋養(yǎng)體在外周血中發(fā)育10小時后,還沒有變成大滋養(yǎng)體和裂殖體,,就會進入毛細血管叢,,隱匿于微血竇或其他血流速度較緩的微循環(huán)中[4, 5]. 邁瑞醫(yī)療正在積極地對儀器和試劑進行優(yōu)化,以期進一步提升對所有瘧疾感染的篩查靈敏度和特異性,。 圖片來源:世界衛(wèi)生組織公益宣傳 【參考文獻】 ↑↓滑動查看 [1]. Mier-Y-Teran-Romero L, Tatem AJ, JohanssonMA. Mosquitoes on a plane: Disinsection will not stop the spread ofvector-borne pathogens, a simulation study. PLoS Negl Trop Dis.2017;11:e0005683. [2]. Mouatcho JC, Goldring JP. Malaria rapiddiagnostic tests: challenges and prospects. J Med Microbiol. 2013;62:1491-505. [3]. Feleke DG, Tarko S, Hadush H. Performancecomparison of CareStart? HRP2/pLDH combo rapid malaria test with lightmicroscopy in north-western Tigray, Ethiopia: a cross-sectional study. BMCInfect Dis. 2017;17:399. [4]. Barber BE, William T, Grigg MJ, et al. Parasitebiomass-related inflammation, endothelial activation, microvascular dysfunctionand disease severity in vivax malaria. PLoS Pathog.2015;11(1):e1004558. [5]. Silamut K, Phu NH, Whitty C, et al. Aquantitative analysis of the microvascular sequestration of malaria parasitesin the human brain. Am J Pathol. 1999;155(2):395-410.
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