新抗原：開啟腫瘤治療性疫苗的新時(shí)代褚雁鴻,，劉芹,，劉寶瑞（南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 腫瘤中心 南京大學(xué)臨床腫瘤研究所，南京 210008） 【摘要】 新抗原是源于腫瘤突變蛋白的一類腫瘤特異性抗原。因其未經(jīng)胸腺陰性篩選,，所以具有強(qiáng)免疫原性,，是腫瘤治療性 疫苗的理想靶標(biāo)。隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,，個(gè)體化新抗原的篩選方法不再是限制其臨床應(yīng)用的技術(shù)壁壘,。新抗原已成為目 前腫瘤疫苗治療領(lǐng)域的新方向。最近發(fā)表于《自然》雜志的2 篇關(guān)于黑色素瘤的Ⅰ期臨床研究證實(shí)了新抗原疫苗可有效激 活免疫系統(tǒng),，療效顯著,。本文主要闡述新抗原的篩選模式和新抗原疫苗的發(fā)展歷程，討論新抗原疫苗臨床應(yīng)用的局限性和 未來的發(fā)展方向,。 【關(guān)鍵詞】 新抗原,；疫苗；免疫治療,；二代測(cè)序 近10 余年來,，腫瘤疫苗作為腫瘤免疫治療的 三大領(lǐng)域之一，與過繼性細(xì)胞免疫治療（adoptive cell transfer,，ACT）,、免疫卡控點(diǎn)阻斷劑一并受到 研究者們的高度關(guān)注，研究成果頗多[1],。然而多數(shù) 治療性疫苗臨床試驗(yàn)療效不顯著,，諸多問題有待解 決：如何選擇理想的抗原、佐劑及運(yùn)載體系,，如何 有效克服免疫逃逸,。最近發(fā)表于《自然》雜志的2 篇腫瘤疫苗Ⅰ期臨床試驗(yàn)的成功，引發(fā)了人們對(duì)個(gè) 體化新抗原疫苗的高度關(guān)注[2,3],。2 項(xiàng)研究的試驗(yàn) 對(duì)象均為切除病灶的晚期黑色素瘤患者,，經(jīng)腫瘤疫 苗治療后，整個(gè)隨訪期間（分別為20 ～ 32 個(gè)月,、 12 ～ 23 個(gè)月）保持無復(fù)發(fā)狀態(tài)的概率高達(dá)66.7%（4/6）和61.5%（8/13）,。顯然，以新抗原為靶點(diǎn)是 腫瘤疫苗臨床獲益的關(guān)鍵,。 新抗原,，顧名思義是在正常組織中不表達(dá)，而 僅在腫瘤組織表達(dá)的抗原,，包括致瘤病毒整合進(jìn)基 因組產(chǎn)生的抗原和突變蛋白產(chǎn)生的抗原[4-7],。新抗 原不僅具有高特異性，而且因其未經(jīng)胸腺陰性篩選 還具有強(qiáng)免疫原性,。由于病毒介導(dǎo)的腫瘤僅占所有 瘤種的一小部分,，所以突變來源的新抗原成為免疫 治療最理想的靶標(biāo)。每位患者都有其獨(dú)特的新抗原 譜，限制了新抗原的應(yīng)用與發(fā)展,。早期通過cDNA 文庫篩選新抗原的方法,，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，難以推廣[8],。 目前,，隨著測(cè)序技術(shù)和生物信息學(xué)的發(fā)展，使得快速有效地對(duì)每位患者進(jìn)行單獨(dú)測(cè)序和新抗原篩選成 為可能,，為新抗原疫苗臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ),。 目前，已在多種腫瘤[9] 中發(fā)現(xiàn),，有效的ACT[10-15] 和免疫卡控點(diǎn)阻斷劑治療[16-20] 大多均誘導(dǎo)出了新 抗原特異性的CD4+ 和CD8+T 細(xì)胞反應(yīng),。Rosenberg 團(tuán)隊(duì)的多篇ACT 研究均證實(shí)新抗原特異性T 細(xì)胞是快速殺傷腫瘤細(xì)胞，使患者獲得長(zhǎng)期生存的 主力軍[10-15],。Gubin 等[21] 也發(fā)現(xiàn)免疫卡控點(diǎn)阻斷 劑的靶點(diǎn)是腫瘤突變抗原表位,。臨床前研究也顯示 個(gè)體化突變肽疫苗與免疫卡控點(diǎn)阻斷劑的療效相 同[22]。隨著早期臨床試驗(yàn)的成功,，新抗原疫苗正 在掀開腫瘤免疫治療的新篇章,。 1 新抗原篩選隨著二代測(cè)序（next-generation sequencing，NGS） 技術(shù)的成熟,，新抗原的篩選越來越方便快捷,。目前 常用的篩選方法可歸納為下述3 類：方法A、方法 B 及方法C（圖1）,。  方法A和方法B的第一步均為測(cè)序——篩選 出腫瘤特異性突變,。能夠被免疫系統(tǒng)識(shí)別的突變 主要包括外顯子的非同義單核苷酸多態(tài)性（nonsynonymous single nucleotide variants，nsSNVs）,、 插入/ 缺失位點(diǎn)及融合基因[23],。測(cè)序方法主要為全 外顯子組測(cè)序（whole-exome sequencing，WES）[24] 對(duì)比檢測(cè)腫瘤組織和相應(yīng)正常組織的DNA 序列,， 發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)后通過RNA 測(cè)序[25] 進(jìn)一步證實(shí),。 方法A同時(shí)還需檢測(cè)患者的人類白細(xì)胞抗原 （human leukocyte antigen,，HLA）分型,。然后根據(jù) 各突變抗原與HLA 各型的親和力高低對(duì)抗原進(jìn)行 排序,，選擇親和力高的合成短肽或長(zhǎng)肽,?？乖呐c HLA 的親和力可以通過軟件預(yù)測(cè),。預(yù)測(cè)的軟件可 于IEDB（immune epitope database and anal y sis resource） 數(shù)據(jù)庫獲得,。該數(shù)據(jù)庫收納的預(yù)測(cè)軟件包 括ANN（artificial neural networks）/NetMHC[26,27],、 NetMHCpan[28],、SMM[29]、SMMPMBEC[30]、ARB,、 Comblib_Sidney2008,、Pickpocket 及Consensus。最 后,，合成的突變肽是否具有免疫原性還需通過體 外的T 細(xì)胞反應(yīng)試驗(yàn)確認(rèn),。具體方法為：用負(fù)載 有抗原的抗原提呈細(xì)胞（antigen-presenting cells， APCs）與患者的T 細(xì)胞體外共孵育,，檢測(cè)CD4+ 和CD8+T 細(xì)胞的活化標(biāo)志物,，如OX-40、4-1BB,、 CD170a 及γ- 干擾素（interferon-gamma,，IFN-γ）。 早在2014 年就有小鼠實(shí)驗(yàn)證實(shí)了上述新抗原篩選 方法的可行性[31],。2017 年,，Ott 等[2] 采用方法A 合成了腫瘤新抗原長(zhǎng)肽疫苗，該疫苗療法在多例復(fù) 發(fā)轉(zhuǎn)移高風(fēng)險(xiǎn)的黑色素瘤患者體內(nèi)誘導(dǎo)出了強(qiáng)大的 多功能CD4+ 和CD8+T 細(xì)胞反應(yīng),。 方法B相對(duì)于方法A更為簡(jiǎn)化,， 在發(fā)現(xiàn)nsSNVs 后，直接合成多個(gè)含有突變位點(diǎn)的短基因串聯(lián)序列（tandem minigene,，TMG）,。TMG 由多 個(gè)短基因融合而成，每個(gè)短基因通?？赊D(zhuǎn)錄為含有 12 個(gè)氨基酸的突變肽,，然后以負(fù)載TMG 的質(zhì)粒為模板直接體外轉(zhuǎn)錄合成RNA。2014 年,，Tran 等[11] 通過方法B 在1 例轉(zhuǎn)移性膽管癌患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了 ERBB2IP（erbb2 interacting protein） 突變,。通過回輸包含大約25% 突變特異性T 細(xì)胞的腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumour-infiltrating lymphocytes，TILs）,，患者的腫瘤病灶消退,。后續(xù)研究中，他們采用該方 法篩選了10 例胃腸道腫瘤患者的新抗原,，其中9 例患者的新抗原表位能夠被自體TILs 識(shí)別[10],。 與前2 種方法不同，方法C無需獲取標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序,，而是通過數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)檢索挖掘新抗原 表位,。該方法的獨(dú)到之處在于可以發(fā)現(xiàn)實(shí)體瘤的 高頻突變位點(diǎn)?；谠摲椒?，Schumacher 等[32] 發(fā) 現(xiàn)了Ⅱ,、Ⅲ期彌漫型腦膠質(zhì)瘤中的高頻突變IDH1 （R132H），并合成了靶向該位點(diǎn)的疫苗,。該疫苗已 在小鼠實(shí)驗(yàn)中成功引起抗腫瘤效應(yīng)并進(jìn)入臨床試驗(yàn) 階段,。Ochs 等[33] 也發(fā)現(xiàn)了腦膠質(zhì)瘤的另一個(gè)高頻 突變——K27M-mutant histone-3，靶向該位點(diǎn)的疫 苗也已在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證實(shí)療效,。理論上而言,，其他 高頻突變，如BRAF,、RGFR 及KRAS,，也可能成 為腫瘤疫苗的理想靶點(diǎn)。 2 新抗原疫苗的研究進(jìn)展隨著新抗原篩選技術(shù)的成熟,，多種新抗原疫苗 進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段,。表1收錄了其中大部分已完成 和進(jìn)行中的臨床試驗(yàn)。這些疫苗試驗(yàn)的開始時(shí)間充 分顯示了新抗原疫苗是腫瘤免疫治療領(lǐng)域嶄新而極 具潛力的一部分,。  首個(gè)以新抗原為基礎(chǔ)的疫苗臨床研究始于 2008 年,，Carreno 等[34] 合成了負(fù)載新抗原肽的樹 突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）疫苗,，治療了3 例 既往接受伊匹單抗治療的晚期黑色素瘤患者,。該試 驗(yàn)證實(shí)這一新類型的腫瘤疫苗可提高腫瘤特異性T細(xì)胞反應(yīng)的廣度和多樣性。 因?yàn)殡囊呙绾秃怂嵋呙鐭o需體外刺激DC,，所 以制作過程相對(duì)簡(jiǎn)單,，易大規(guī)模生產(chǎn)。方法C 中 提及的IDH1 疫苗即屬于肽疫苗,，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí) 接種該疫苗后同時(shí)出現(xiàn)了CD4+TH1 細(xì)胞和抗體,， 能夠引起有效的主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）Ⅱ類分子限制 的突變特異性的抗腫瘤免疫反應(yīng)[32],。由于IDH1 （R132H）突變?cè)谀X膠質(zhì)瘤患者中外顯率較高,，因 此該疫苗研究獲得了業(yè)內(nèi)高度評(píng)價(jià)[35,36]，相關(guān)臨床 試驗(yàn)（NCT02454634）也自2015 年開始開展,。靶向新抗原的肽疫苗的首個(gè)臨床突破亦出現(xiàn)于黑色 素瘤研究中,。2017 年，Ott 等[2] 設(shè)計(jì)了一種新抗原 疫苗,，由方法A 篩選出的20 條個(gè)體化突變肽與佐 劑poly-ICLC（polyinosinic-polycytidylic acid with polylysine and carboxymethylcellulose）組成,，其中 每個(gè)肽由15 ～ 30 個(gè)氨基酸組成。該團(tuán)隊(duì)招募了6 例晚期黑色素瘤患者,，治療期間均無明顯不良反 應(yīng),，隨訪期間僅疫苗治療前即有肺轉(zhuǎn)移的2 例患者 復(fù)發(fā)，且之后使用抗程序性死亡蛋白1（programmed cell death protein 1,，PD-1）抗體治療后復(fù)發(fā)病灶完全消退,。 核酸疫苗可分為DNA 疫苗和RNA 疫苗。雖 然近年來DNA 疫苗的抗腫瘤效應(yīng)不明顯,，幾乎沒 有超過Ⅰ期臨床的進(jìn)展[37],，但令人鼓舞的是RNA 疫苗多次被證實(shí)具有安全性、可塑性及良好的佐劑作用[38],。Kreiter 等多年來致力于研究個(gè)體化RNA 疫苗：2015 年,，他們報(bào)道了RNA 疫苗可有效控制 小鼠的腫瘤進(jìn)展[39] ；2016 年,，他們合成了一種脂 質(zhì)載體,，能將新抗原轉(zhuǎn)運(yùn)至淋巴器官——可提供高 效啟動(dòng)和擴(kuò)增T 細(xì)胞反應(yīng)的微環(huán)境[40] ；2017 年,， 他們合成了首個(gè)用于治療黑色素瘤的新抗原RNA 疫苗,，并取得預(yù)期臨床療效[3]。該RNA 疫苗的接 種方法不同于傳統(tǒng)皮下注射,，而是通過超聲引導(dǎo)直 接注射至腹股溝淋巴結(jié)內(nèi),，以期更有效地激活淋巴 結(jié)區(qū)域內(nèi)大量的DC[41]。 不同類型的疫苗均有其固有的優(yōu)勢(shì)和缺陷,。由 于缺乏大規(guī)模的隨機(jī)對(duì)照臨床研究,，關(guān)于哪種疫苗 免疫原性最高的問題目前尚未達(dá)成共識(shí)。此外,，在 研究者們探索新抗原疫苗療效的過程中,，無意間發(fā) 現(xiàn)能夠識(shí)別大多數(shù)新抗原并激活強(qiáng)有力抗腫瘤免疫 反應(yīng)的是CD4+T 細(xì)胞，而非CD8+T 細(xì)胞,。其中的 免疫機(jī)制已有相關(guān)綜述討論[42],。 3 新抗原疫苗應(yīng)用的局限性3.1 突變負(fù)荷低 不同瘤種的基因突變率差異巨大[43]。較高的突變負(fù)荷提示該腫瘤具有較高的免 疫原性[16,44],?；蛲蛔兟首罡叩暮谏亓鯷45] 是最 早從新抗原疫苗獲益的腫瘤類型[2,3]。因此,，突變 負(fù)荷低的腫瘤類型可能不是新抗原疫苗治療的適應(yīng) 證,。盡管最近Snyder 等[46] 報(bào)道新抗原負(fù)荷與長(zhǎng)期 臨床獲益無顯著相關(guān)性，但該結(jié)論的可靠性可能受 限于其較小的樣本量,。 3.2 表位丟失 在腫瘤疫苗施加的巨大免疫壓力 下,，腫瘤細(xì)胞通過各種機(jī)制丟失表位來實(shí)現(xiàn)免疫 逃逸?？乖岢蕶C(jī)制的缺陷是十分重要的逃逸機(jī) 制[47],。首先是腫瘤細(xì)胞表面MHC Ⅰ類分子下調(diào)， 其在腫瘤細(xì)胞表面具有高異質(zhì)性,，丟失現(xiàn)象十分常 見[48],，某些腫瘤早期就有該分子的缺失[49],。多種 因素促成了這一現(xiàn)象，如MHC 基因缺陷,、表觀遺 傳調(diào)控及糖酵解的沃伯格效應(yīng)（Warburg effect of glycolysis）,；其次，這些丟失的表位可能來自次要 突變（passenger mutations）,。根據(jù)細(xì)胞惡變過程中 基因突變發(fā)揮的作用,，可以將其分為兩類：主要突 變（driver mutations）和次要突變[50]。次要突變雖 然對(duì)腫瘤生存或生長(zhǎng)無影響,，但是在腫瘤突變中占據(jù)絕大多數(shù)[51],，因此腫瘤表面快速丟失的表位大 多是由次要突變產(chǎn)生的。 T 細(xì)胞不僅能夠識(shí)別新抗原,，而且能夠介導(dǎo)新 抗原的免疫編輯過程,。為了規(guī)避腫瘤的免疫逃逸， 誘導(dǎo)出廣譜的新抗原特異性T 細(xì)胞反應(yīng)至關(guān)重要,。 3.3 腫瘤免疫抑制微環(huán)境 復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境包 含許多免疫抑制機(jī)制,。某些研究者認(rèn)為腫瘤微環(huán) 境的抑制性與腫瘤基質(zhì)細(xì)胞的類型有關(guān)[52]。腫瘤 內(nèi)如果浸潤(rùn)的抑制性細(xì)胞較多,，如調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞 （regulatory T cells,，Treg）、巨噬細(xì)胞及骨髓來源 的抑制性細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cells,， MDSCs）,，通常認(rèn)為對(duì)免疫治療不敏感[53]。如前瞻 性臨床隊(duì)列研究證實(shí),，CD4+FOXP3+Treg 細(xì)胞浸潤(rùn) 腫瘤后能夠抑制西妥昔單抗介導(dǎo)的抗體依賴的細(xì)胞 介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（antibody-dependent cellular cytotoxicity,，ADCC），進(jìn)而顯著降低臨床獲益[54],。 而另有研究者發(fā)現(xiàn)免疫逃逸機(jī)制與腫瘤微環(huán)境中 的一些負(fù)性調(diào)節(jié)分子相關(guān),，如Ppp2r2d[55]。敲除 CD4+ 和CD8+T 細(xì)胞的Ppp2r2d 能夠顯著提高ACT 對(duì)荷瘤小鼠的療效,，增加腫瘤內(nèi)浸潤(rùn)的效應(yīng)T 細(xì) 胞的數(shù)目,，延長(zhǎng)小鼠的生存期[56]。此外,，分泌抑 制性的細(xì)胞因子也是腫瘤微環(huán)境內(nèi)免疫逃逸的一項(xiàng) 重要機(jī)制,。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）,、白介素-10（interleukin-10,，IL-10） 及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）能夠抑制DC 成熟,，破壞其抗原提 呈功能[57],。 3.4 難以激活腫瘤特異性T 細(xì)胞 T 細(xì)胞的激活 需要2 種信號(hào)：一種是T 細(xì)胞受體介導(dǎo)的抗原信號(hào),， 另一種是共刺激受體介導(dǎo)的其他信號(hào)。此外,，能夠 傳遞這些信號(hào)的APCs 至關(guān)重要,。共刺激分子低表 達(dá)、共抑制分子高表達(dá)及PD-1 配體均能引起T 細(xì) 胞失活[58,59],。研究者們通過多種方式來阻斷T 細(xì) 胞的失活途徑，包括激動(dòng)劑[60] 和阻斷劑[17,18],。舉 例來說,，OX-40 是活化的T 細(xì)胞表面的共刺激受體， 因此OX-40 激動(dòng)劑可通過延長(zhǎng)T 細(xì)胞的生存時(shí)間,， 提高其增殖能力,，進(jìn)而提高抗腫瘤免疫效應(yīng)[61]。 原位接種是由Toll 樣受體9（toll-like receptor 9,， TLR9）和OX-40 激動(dòng)劑組成的腫瘤疫苗,，可使荷瘤小鼠的原病灶及轉(zhuǎn)移灶完全消退[62]。 4 新抗原疫苗的發(fā)展方向4.1 多表位疫苗 為了解決表位丟失引起的治療 失效,，合成包含MHC Ⅰ類和Ⅱ類限制性抗原的 多表位疫苗不失為一種簡(jiǎn)單有效的方法[34],。大多 數(shù)進(jìn)入臨床研究的新抗原疫苗均包含多個(gè)抗原表 位， 如多肽疫苗（NCT00683670,、NCT01970358 及NCT02427581）,、多表位RNA 或DNA 疫苗 （NCT02316457、NCT02348320 及NCT03122106）,。 Li 等[63] 報(bào)道了一項(xiàng)個(gè)案分析,，他們合成了一個(gè)多 表位新抗原疫苗，成功使得該患者多處肺癌病灶快 速消退,。但是疫苗治療開始后的第8 周,，該患者死 于肝轉(zhuǎn)移灶進(jìn)展引起的并發(fā)癥。原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶的 療效差異很可能是由腫瘤病灶異質(zhì)性造成,，因此疫 苗治療測(cè)序取樣時(shí)不可僅取原發(fā)灶的組織,。此外， 更改抗原肽結(jié)構(gòu)也是一種思路,。Simanovich 等[64] 合成了一種八分支多表位肽,，接種后有效抑制了荷 瘤小鼠病灶的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。 4.2 佐劑和載體系統(tǒng) 在缺乏炎癥或微生物刺激 物時(shí),，穩(wěn)定狀態(tài)的DC 捕獲和呈遞抗原后通常是誘導(dǎo) 免疫耐受而非激活免疫反應(yīng)[65],。因此，高效的佐劑 和合適的載體系統(tǒng)是疫苗治療必不可少的一環(huán),。 常用的佐劑包括TLR 激動(dòng)劑和靶向DC 的單克隆抗體,。poly-ICLC 是一種TLR3 激動(dòng)劑,，在臨 床研究中應(yīng)用最為廣泛，其能夠通過模擬微生物刺 激引發(fā)炎性反應(yīng),，在卵巢癌患者體內(nèi)顯著提高肽疫 苗的免疫原性[66],。其他的TLR 激動(dòng)劑，如TLR4 激動(dòng)劑MPL A（monophos-phoryl lipid A）,、TLR7 激動(dòng)劑imiquimod,、TLR7/8 激動(dòng)劑resiquimod 及 TLR9 激動(dòng)劑CpG ODN（CpG oligode ox ynuc leotide） 均十分常用。而靶向DC 的單克隆抗體,，如抗 DEC205 抗體[67] 和CD40 激動(dòng)劑[68],，能將抗原投 遞至DC，以提高抗腫瘤反應(yīng)的強(qiáng)度,。 截至目前,，最令人滿意的載藥系統(tǒng)是納米粒子。 納米粒子本身可模擬病原相關(guān)分子模式（pathogenassociated molecular patterns,，PAMPs）——能被天 然免疫細(xì)胞表面的模式識(shí)別受體（pattern recog nit - ion receptor,，PRR）識(shí)別的危險(xiǎn)信號(hào)分子，從而增 加負(fù)載的疫苗被攝取提呈的概率[69],。Min 等[70] 設(shè)計(jì)出了一些抗原捕獲- 納米粒子（antigen-capturing nanoparticles,，AC-NPs）。該納米疫苗由聚乳酸- 羥基乙酸共聚物（poly(lactic-co-glycolic acid),， PLGA）表面修飾不同的化學(xué)物質(zhì),，然后捕獲腫瘤 來源的蛋白抗原（tumour-derived protein antigens， TDPAs）形成,，能夠顯著提高抗PD-1 抗體的療效,。 在各種不同的納米材料中，納米核酸因其結(jié)構(gòu)的 可塑性和固有的免疫調(diào)節(jié)功能,，被認(rèn)為是理想的 腫瘤疫苗載體,。最近，Zhu 等[71] 設(shè)計(jì)出一種可以 自組裝的纏繞式DNA-RNA 納米膠囊（intertwining DNA-RNA nanocapsules,，iDR-NCs）,。該載體由 CpG 和抑制Stat3 通路的shRNA 組成，這2 種成 分對(duì)APCs 的激活具有協(xié)同作用,?；谠撦d體的新 抗原疫苗在荷瘤小鼠體內(nèi)激活了大量的新抗原特 異性CD8+T 細(xì)胞，并且顯著抑制了腫瘤病灶的進(jìn) 展,。此外,，脂質(zhì)體也是備受關(guān)注的一類載體。其能 夠與內(nèi)源性白蛋白結(jié)合，可將抗原靶向轉(zhuǎn)運(yùn)至引流 淋巴結(jié)（draining lymph nodes,，DLNs）[72],。由膽 固醇、新抗原肽及CpG 佐劑簡(jiǎn)易連接組裝形成的 納米疫苗在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已被證實(shí)具有一定的安全性 和療效[73],。將該納米疫苗與一個(gè)靶向腫瘤抗原的 抗體,、IL-2 及抗PD-1 抗體聯(lián)合使用療效顯著，能 使荷瘤小鼠很大的腫瘤病灶消退[74],。還有研究者 設(shè)計(jì)出“納米盤”結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)載體,，由合成的高 密度脂蛋白組成[75]。該納米粒子能將負(fù)載的新抗 原肽和CpG 有效傳送至淋巴器官,，誘導(dǎo)DC 成熟,， 激活較裸藥多47 倍的特異性細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞 （cytotoxic lymphocytes，CTLs）,。總的來說,，納米 疫苗未來的設(shè)計(jì)方向是更小的粒徑,、更精準(zhǔn)的淋巴 結(jié)靶向及更多樣的佐劑負(fù)載。 4.3 與其他免疫治療聯(lián)合 基于PD-1 信號(hào)通路對(duì) 抗腫瘤T 細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)大的抑制作用,，免疫卡控點(diǎn) 阻斷劑將在疫苗對(duì)T 細(xì)胞的激活方面發(fā)揮不可替 代的輔助作用,。Ott 等[2] 在接受疫苗聯(lián)合抗PD-1 抗體的患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)疫苗誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)的時(shí)間延 長(zhǎng)和新抗原特異性T 細(xì)胞的表位擴(kuò)展。Sahin 等[3] 也報(bào)道了接受新抗原疫苗聯(lián)合抗PD-1 抗體治療的 患者腫瘤病灶完全消退,，疫苗治療后的腫瘤病灶 PD-L1 上調(diào),，且疫苗激活的記憶型新抗原特異性T細(xì)胞為PD-1 陽性。目前,，已有多項(xiàng)進(jìn)行中的臨床 試驗(yàn)嘗試進(jìn)一步探究新抗原疫苗和免疫卡控點(diǎn)阻 斷劑的協(xié)同效應(yīng)（NCT02950766,、NCT02897765、 NCT02897765）,。 ACT治療中體外生產(chǎn)的工程化T 細(xì)胞,，無論 是否與腫瘤疫苗靶向相同的抗原，理論上都將協(xié)同 發(fā)揮殺傷腫瘤細(xì)胞的作用,。在該聯(lián)合治療中,，早期 主要是回輸?shù)墓こ袒疶 細(xì)胞發(fā)揮免疫效應(yīng)；晚期 主要是疫苗誘導(dǎo)的T 細(xì)胞反應(yīng),，極大地延長(zhǎng)了體 內(nèi)免疫反應(yīng)的持久性和多樣性,。 4.4 與傳統(tǒng)療法聯(lián)合 早在2005 年，研究者就發(fā) 現(xiàn)化療可通過提高抗原產(chǎn)生與表達(dá),、增強(qiáng)T 細(xì)胞 反應(yīng)來助力免疫治療[76],。而放療與免疫治療的關(guān) 系更為密切。一個(gè)對(duì)放療敏感的腫瘤細(xì)胞經(jīng)照射后 可產(chǎn)生大量新抗原和促炎因子，因此照射后的腫瘤 病灶也被稱為“原位疫苗”[77],。原位照射聯(lián)合免疫 治療能夠誘發(fā)強(qiáng)大的遠(yuǎn)位效應(yīng),。最近一項(xiàng)Ⅱ期臨床 試驗(yàn)（NCT01006044）證實(shí)了腫瘤疫苗與放療聯(lián)合 的安全性和有效性[78]。 5 結(jié)語免疫治療的目標(biāo)是激活有效抗腫瘤的免疫反 應(yīng),，而新抗原已被證實(shí)是T 細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的關(guān) 鍵,。因此，新抗原篩選技術(shù)的成熟開啟了個(gè)體化疫 苗的新時(shí)代,。疫苗治療的發(fā)展不可避免地會(huì)遇到各 種問題：新抗原負(fù)荷低,、表位丟失、腫瘤免疫抑制 微環(huán)境及難以誘導(dǎo)腫瘤特異性T 細(xì)胞等,。但研究者 們也探索出許多方法可以在一定程度上解決這些問 題,，尤其是聯(lián)合治療的模式。腫瘤新抗原疫苗聯(lián)合 其他免疫治療或傳統(tǒng)療法可有效規(guī)避單種療法的缺 陷,，成為治療實(shí)體瘤的有效方法,。總之,，新抗原和 腫瘤治療性疫苗的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合具有廣闊的應(yīng)用前景,。 參考文獻(xiàn)（略） |
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