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我的圖書館

 余舍我的圖書館 2018-12-14

在檢驗科生化室工作,,熟知儀器的工作原理,,定標(biāo)、質(zhì)控結(jié)果的判讀,,異常警報的分析及處理是必須掌握知識,,對我們的日常工作有著非常重要的作用。下面分享一例質(zhì)控失控,、定標(biāo)失敗,,通過結(jié)果判讀分析原因,并成功解決的案例,。


一,、案例經(jīng)過


今天,在對P800生化分析儀項目進(jìn)行常規(guī)質(zhì)控時,,發(fā)現(xiàn)無機(jī)磷(P)備用瓶質(zhì)控結(jié)果嚴(yán)重偏低,,質(zhì)控品為朗道定值質(zhì)控,分為高值和低值兩個水平,。對當(dāng)前瓶和備用瓶進(jìn)行質(zhì)控時,,使用的是同一批號,同一天復(fù)溶的質(zhì)控品,。但是,,P當(dāng)前瓶在控,備用瓶遠(yuǎn)超過3sd,。




基于P備用瓶的高值和低值質(zhì)控都失控,,考慮檢測單元異常,即①水質(zhì),,②透光窗,,③反應(yīng)杯,④試劑,,⑤試劑針\樣本針吸取異常等,。


綜合其他項目均在控,優(yōu)先考慮試劑問題,。于是我決定對備用瓶試劑進(jìn)行定標(biāo),,形成新的校準(zhǔn)曲線,再做質(zhì)控,。


結(jié)果,,再次定標(biāo)后,在定標(biāo)界面顯示“failed”,,P備用瓶項目發(fā)紅,,即定標(biāo)失敗,。


在校準(zhǔn)報告頁觀察,可見S1處,,Std1主副波長吸光度差值異常,,并有“Dup”報警信息。



想到之前老師講課時說道,,Dup報警信息即Duplication Limit,,是重復(fù)性界限報警,原因為同一濃度,,兩次重復(fù)測試的吸光度差值超出設(shè)定范圍,。此警報在S1(即0濃度)時,考慮①氣泡②光源③試劑狀態(tài)④水質(zhì),,等,。


此例中,其他指控項目均在控,,其他定標(biāo)項目均通過,,開機(jī)自檢時光源正常,則考慮試劑狀態(tài)問題,。


我隨后停機(jī),,更換備用瓶P試劑盒,掃描試劑后重新定標(biāo),。


伴隨著我緊張的心情,,點開定標(biāo)報告界面,終于定標(biāo)通過了,!



隨后,,對P的備用瓶進(jìn)行兩個水平的質(zhì)控,結(jié)果也均在控,。


二,、總結(jié)與反思


通過此例,我在下班后回想,、復(fù)習(xí)了之前老師講過的關(guān)于生化分析儀定標(biāo)判讀的知識:


1,、生化分析儀的基本原理就是朗伯比爾定律,即A=εLc  ,。

A為吸光度,,ε為摩爾吸光系數(shù),L是反應(yīng)系統(tǒng)的光徑,,c為溶液濃度,。


對于固定的物質(zhì),它的ε是固定的,,一個反應(yīng)系統(tǒng)的L也是固定的,,所以,測得A,,即可求得c濃度,。


2、以我們用的羅氏為例,,主要分析類型有2 point End(兩點終點法),,1 point End(一點終點法),Rate A(速率A法),,2 point Rate(兩點速率法),。


其中,一點終點法,,讀取終點的吸光度,;


兩點終點法,讀取終點的吸光度,,并能去除樣本空白的影響,;


速率A法,讀取一段時間內(nèi)吸光度的變化率,;


兩點速率法,,讀取兩個時間點的吸光度,計算吸光度變化率,,不受曲線線性約束,。


3、對于定標(biāo)結(jié)果的判讀,,我們首先要知道,,儀器實測的是物質(zhì)的吸光度/光量子數(shù),而定標(biāo)曲線就是一個橋梁,,也是一把尺子,。將實測的吸光度/光量子數(shù)轉(zhuǎn)化為待測物濃度,這就是儀器的作用和原理,。



如上,,S1為0濃度,S2為定標(biāo)品濃度,。兩個濃度的計算吸光度為定標(biāo)時形成定標(biāo)曲線所用,,參考吸光度不使用。上圖,,無報警信息,,求得了K值,代表定標(biāo)成功,,但是還要通過質(zhì)控這一關(guān),。


而定標(biāo)失敗時,,會有主要四類定標(biāo)參數(shù),下面簡單回顧定標(biāo)參數(shù)的意義,。


1. SD Limit  漂移度界限

觸發(fā)原因:理論吸光度與實際吸光度差距超過設(shè)定范圍,。

報警信息:SD.E

2. Duplication Limit  重復(fù)性界限

觸發(fā)原因:同一濃度兩次重復(fù)測試,吸光度差值超過設(shè)定范圍,。

報警信息:Dup.E

3. Sensitivty Limit  靈敏度界限

觸發(fā)原因:單位濃度吸光度變化/變化率超過設(shè)定范圍,。

報警信息:Sen.E

4. S1 Abs Limit  試劑空白吸光度界限

觸發(fā)原因:Std1/即0濃度的吸光度超出設(shè)定范圍

報警信息:S1A.E



在我們生化室的日常工作中,熟知定標(biāo),、質(zhì)控的意義,,常用項目的反應(yīng)曲線,了解常見的定標(biāo)參數(shù)意義和報警信息,,對于解決日常遇到的問題有著非常大的意義,。正如此例,通過定標(biāo)報告的判讀,,可以最快速度找到定標(biāo)失敗,、質(zhì)控失控的原因,及時糾正,,節(jié)省了時間成本,,同時也保證了檢驗報告的準(zhǔn)確和及時發(fā)出,不耽誤患者的就診,。

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