隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,，特別是人類基因組計(jì)劃的順利實(shí)施,、人類基因組序列的剖析以及相關(guān)基因功能的識(shí)別，已經(jīng)賦予了傳統(tǒng)意義上的腫瘤實(shí)驗(yàn)診斷以全新的內(nèi)涵,，腫瘤分子診斷也逐漸成為分子醫(yī)學(xué)的重要組成和研究熱點(diǎn),。

　　就定義而言，腫瘤分子診斷尚存有爭(zhēng)議,。有人認(rèn)為,，在分子生物學(xué)理論和技術(shù)基礎(chǔ)上建立起來的診斷技術(shù)在腫瘤領(lǐng)域的應(yīng)用就是分子診斷。也有人認(rèn)為,，從分子水平上完成對(duì)與腫瘤相關(guān)的核酸(DNA和RNA)和蛋白質(zhì)這些生物大分子的檢測(cè)即屬腫瘤分子診斷,。前者強(qiáng)調(diào)所采用的技術(shù)和方法，后者則更關(guān)注所檢測(cè)的對(duì)象,。筆者更傾向于不必清晰界定,，腫瘤分子診斷可以理解為是一類將分子生物學(xué)原理和技術(shù)應(yīng)用于腫瘤診斷的方法，其核心為基于核酸和蛋白的診斷技術(shù),，通過檢測(cè)與腫瘤發(fā)生相關(guān)的大分子以及大分子體系的存在,、結(jié)構(gòu)或表達(dá)調(diào)控等改變，為腫瘤的預(yù)測(cè),、診斷,、治療、預(yù)后及轉(zhuǎn)歸提供分子水平上的診斷信息,。在這個(gè)意義上,，目前臨床上得以普遍應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，均可歸入腫瘤分子診斷的范疇,。

　　腫瘤發(fā)生、發(fā)展的有跡可循,，促使人們投放了更多的精力于發(fā)現(xiàn)新標(biāo)志物,。自從1846年Henrey Bence-Jones在多發(fā)性骨髓瘤患者中發(fā)現(xiàn)了最早的腫瘤標(biāo)志物——本-周蛋白以來，160多年的研究中，人們已經(jīng)陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了100多種腫瘤標(biāo)志物,。這些標(biāo)志物各具有不同的生化性質(zhì)或生理功能,，分屬于胚胎蛋白和糖蛋白類、酶類,、激素類,、癌基因蛋白類等。目前將它們歸類為：（1）原位性腫瘤相關(guān)物質(zhì),，如細(xì)胞內(nèi)酶,；（2）異位性腫瘤相關(guān)物質(zhì),，如肺癌中升高的促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH),；（3）胎盤和胎兒性腫瘤相關(guān)物質(zhì)，如AFP,、CEA,、hCG等；（4）病毒性腫瘤相關(guān)物質(zhì),，如與腫瘤相關(guān)的HTL-1病毒(成人T細(xì)胞白血病),、EB病毒(Burkitt淋巴肉瘤)、HS病毒(宮頸癌與皮膚癌),、HB病毒(肝癌)和人巨細(xì)胞病毒等,。

　　近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)展,，腫瘤生物標(biāo)志物所囊括的種類也越來越多,，除了癌基因、抑癌基因及其產(chǎn)物這一重要類別外,，單核苷酸多態(tài)性（SNP）,、基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組等都被列入腫瘤生物標(biāo)志物的范疇,。

　　隨著人類基因組計(jì)劃的完成，越來越多的基因組和蛋白組信息被人們用來服務(wù)于與臨床診斷相關(guān)的實(shí)驗(yàn)工作中,，承擔(dān)這些信息分析的各種分子生物技術(shù)也不斷涌現(xiàn),。盡管分子雜交、PCR和DNA序列測(cè)定仍然是檢測(cè)DAN和RNA的基本和主流技術(shù),；Western blot,、免疫法、質(zhì)譜法仍然是分析測(cè)定蛋白質(zhì)的主要手段,，但新的分子診斷技術(shù)正層出不窮,。另一方面，在原有技術(shù)基礎(chǔ)上的衍生、組合或聯(lián)合而形成新的分析方法也大大提高了分子診斷的特異性,、敏感性和準(zhǔn)確性,。

　　近年在腫瘤診斷技術(shù)方面，有幾個(gè)方面的進(jìn)展值得關(guān)注：

　?。?）基因擴(kuò)增在芯片上進(jìn)行已經(jīng)實(shí)現(xiàn),。單核苷酸多態(tài)性（SNP）、突變分析芯片,、差異表達(dá)芯片,、比較基因組雜交芯片等多種高密度微陣列芯片，正在被用于發(fā)現(xiàn)與腫瘤相關(guān)的生物標(biāo)志物,，并被用于臨床對(duì)腫瘤的診斷和治療指導(dǎo),。個(gè)體化用藥將借助芯片技術(shù)實(shí)現(xiàn)由候選基因向全基因組研究的飛躍。集成各項(xiàng)功能的芯片實(shí)驗(yàn)室也即將步入產(chǎn)業(yè)化階段,。

　?。?）測(cè)序技術(shù)在腫瘤基因診斷，尤其是在腫瘤分子分型,、個(gè)體化治療方案選擇中發(fā)揮著日益重要的作用,。隨著測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，在未來2-3年內(nèi),，僅百萬(wàn)美元即可測(cè)定全基因組的目標(biāo)將有可能實(shí)現(xiàn),，測(cè)序技術(shù)將可能成為臨床實(shí)驗(yàn)室分析腫瘤基因組變化的常規(guī)武器。

　?。?）分子顯像技術(shù)的應(yīng)用為腫瘤診斷提供了新的方法,。該技術(shù)在細(xì)胞、基因和分子水平上實(shí)現(xiàn)了生物體內(nèi)部生理或病理過程的無(wú)創(chuàng),、實(shí)時(shí),、動(dòng)態(tài)的在體成像，從而對(duì)機(jī)體內(nèi)的腫瘤進(jìn)行早期發(fā)現(xiàn)和精確定位,。

　?。?）分子病理學(xué)在腫瘤研究領(lǐng)域的重要作用日益突出和彰顯。分子病理診斷突破了單純的診斷范疇,，擔(dān)負(fù)起為臨床個(gè)體化治療提供信息和證據(jù)的責(zé)任,。近年在臨床得以普遍應(yīng)用的有：乳腺癌HER-2基因的擴(kuò)增檢測(cè)，肺癌,、結(jié)直腸癌EGFR和K-RAS基因突變檢測(cè),，腹腔胃腸道間質(zhì)瘤C-kit基因檢測(cè)等。隨著腫瘤研究的拓展和深入,，以基因診斷為主導(dǎo)的分子病理分型將成為指導(dǎo)臨床個(gè)體化治療的重要手段,。
　　三,、腫瘤分子診斷的臨床應(yīng)用

　　縱觀腫瘤分子診斷的發(fā)展，其將主要應(yīng)用于：腫瘤的早期診斷及鑒別診斷,；腫瘤的分級(jí),、分期及預(yù)后判斷；微小病灶,、轉(zhuǎn)移病灶及血中殘留癌細(xì)胞的識(shí)別檢測(cè),；判斷手術(shù)中腫瘤切除是否徹底、有無(wú)周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等,。

　　近年在下列幾個(gè)方面的發(fā)展可能代表了未來的趨勢(shì)：

　?。?）腫瘤的易感基因檢測(cè)：從腫瘤診斷過渡到腫瘤遺傳相關(guān)易感基因檢測(cè)。目前已明確的腫瘤易感基因有Rb1(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤),、WT1(腎母細(xì)胞瘤),、p53(Li-Fraumeni 綜合征)、APC(家族性腺瘤性息肉病),、HNPCC(遺傳性非息肉病性結(jié)腸癌),、NF1(神經(jīng)纖維瘤病),、VHL(VonHippel-Lindau綜合征),、PTEN(Bannayan-Riley-Ruvalcaba綜合征)、BRCA(家庭性乳腺癌,、卵巢癌),、Ret基因突變（Ⅱ型多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤）和GST基因型（判斷個(gè)體暴露于致癌物時(shí)的致癌危險(xiǎn)性）等。

　?。?）腫瘤的鑒別診斷：在擁有可靠的分子診斷標(biāo)志物和診斷技術(shù)后,，我們可對(duì)一些臨床上的良、惡性增生性疾病進(jìn)行鑒別診斷,。例如,，對(duì)Bcr區(qū)基因重排的檢測(cè)，可幫助對(duì)急,、慢性粒細(xì)胞性白血病進(jìn)行鑒別,。N-myc和C-myc的擴(kuò)增和表達(dá)檢測(cè)，對(duì)鑒別神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神經(jīng)上皮瘤具有應(yīng)用價(jià)值,。

　?。?）腫瘤的預(yù)后評(píng)估和監(jiān)測(cè)：腫瘤預(yù)后常常與腫瘤基因突變、擴(kuò)增及過度表達(dá)密切相關(guān),，研究發(fā)現(xiàn)從分子水平上判斷腫瘤的生物學(xué)行為及預(yù)后具有較高的準(zhǔn)確性,。例如，p53基因突變與乳腺癌,、肝癌,、結(jié)腸癌等多種腫瘤預(yù)后有關(guān),；nm23的狀態(tài)與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)。研究者們根據(jù)胃癌,、肝癌,、肺癌、結(jié)腸癌等相關(guān)基因的變化,，提出了它們癌變和演進(jìn)的分子模型,，闡述了癌基因激活、抑癌基因失活與主質(zhì)細(xì)胞增生,、癌前狀態(tài),、癌變和轉(zhuǎn)移各階段基因變化的特征，這些為臨床上判斷腫瘤預(yù)后和預(yù)后監(jiān)測(cè)開辟了新的途徑,。

　?。?）腫瘤的個(gè)體化治療：近年來，隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展和人類基因組序列的破解,，以及腫瘤靶向藥物的問世,，人們開始嘗試通過患者基因及其表達(dá)狀態(tài)來預(yù)測(cè)其治療效果。在靶向藥物,、生物制品和激素等新型抗腫瘤藥物治療方面,，乳腺癌采用Her2表達(dá)水平的分子病理或FISH分析，指導(dǎo)臨床Herceptin的正確應(yīng)用,，已經(jīng)成為個(gè)體化治療的經(jīng)典范例,；Lynch發(fā)現(xiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）特定部位的突變可以預(yù)測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者對(duì)靶向藥物易瑞沙治療的反應(yīng)。然而,，目前有關(guān)腫瘤個(gè)體化治療的分子診斷尚屬于起步性階段,。鑒于腫瘤的發(fā)生是一個(gè)多階段、多步驟和多基因參與的過程,，腫瘤敏感性和耐藥性也可能由復(fù)雜的基因網(wǎng)絡(luò)調(diào)控,。基于多個(gè)基因或標(biāo)志物的表達(dá)狀態(tài),，以及相關(guān)節(jié)點(diǎn)蛋白質(zhì),、代謝物的變化規(guī)律的個(gè)體化分子治療方案和技術(shù)尚有待探索。

　　綜上,，腫瘤分子診斷在腫瘤學(xué)的基礎(chǔ)和臨床研究中已經(jīng)顯示出強(qiáng)大的生命力,。憑借分子診斷的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和巨大潛能，將極大地推動(dòng)在更深層次揭示腫瘤的本質(zhì),、指導(dǎo)臨床診斷和治療,。