1．用6孔板培養(yǎng)細胞,，待細胞生長達到60%-70%,，根據(jù)實驗需求處理，繼續(xù)培養(yǎng),；

2．根據(jù)實驗細胞處理后,，把細胞吸出至1.5ml離心管內，200g 離心5min,；

3．用 PBS 洗滌細胞2次,，200g離心5min，收集1-5×105 細胞,；

4．細胞固定：加入1ml冰浴預冷70%乙醇中,，輕輕吹打混勻，4℃固定2h或更長時間,。固定12-24 h可能效果更佳,。200g左右離心3-5min，沉淀細胞,。加入約1ml冰浴預冷的PBS,，重懸細胞。再次離心沉淀細胞,，小心吸除上清,，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細胞,。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞,，避免細胞成團。 注意：70%乙醇在使用前需進行預冷處理

5．碘化丙啶染色液的配制：參考下表,，根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量配制適量的碘化丙啶染色液：

6．染色：每管細胞樣品中加入0.5 ml碘化丙啶染色液,，緩慢并充分重懸細胞沉淀，37℃避光溫浴30min,。隨后可以4℃或冰浴避光存放,。染色完成后宜在24h內完成流式檢測。

7．流式檢測：用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光,，同時檢測光散射情況,。

圖片解析：

①G1期(gap1)，指從有絲分裂完成到期DNA復制之前的間隙時間,；

②G2期(gap2),，指DNA復制完成到有絲分裂開始之前的一段時間,；

③S期(synthesis phase)，指DNA復制的時期,。

圖中第一個峰為G1期,，第二個峰為S期，第三個峰為G2期