一,、概述

人體內(nèi)出凝血系統(tǒng)是一個非常龐大且繁雜的系統(tǒng)，機(jī)體通過凝血,、纖溶,、血小板、內(nèi)皮四個系統(tǒng)的參與時刻維持著動態(tài)平衡,。促凝與抗凝活性的失衡將直接導(dǎo)致血栓性疾病與出血性疾病的發(fā)生,，且血栓性疾病更常見,。目前實(shí)驗室凝血常規(guī)檢測項目，如PT,、APTT,、TT、Fbg,、D-二聚體,、FDP、抗凝血酶,、凝血因子等已涵蓋凝血,、纖溶等系統(tǒng)，但都屬于在血栓形成后的被動檢測,、晚期篩查項目,，對血栓前狀態(tài)、Pre-DIC等疾病不敏感,，同時對于溶栓治療監(jiān)測不能在第一時間反饋效果,。

血栓分子標(biāo)志物（TAT、PIC,、TM,、tPAI-C）與D-二聚體、FDP聯(lián)合檢測,，可在早期更加敏感,、可靠的向臨床反饋血栓的發(fā)生與形成、術(shù)后血栓與出血情況的監(jiān)控,、Pre-DIC的狀態(tài),、溶栓治療的效果、血管內(nèi)皮系統(tǒng)損傷等情況,。

二,、臨床意義

注：TAT：凝血酶抗凝血酶復(fù)合物；PIC：纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物,；TM：血栓調(diào)節(jié)蛋白,；t-PAIC：組織型纖溶酶原激活物-纖溶酶原激活抑制復(fù)合物；AT：抗凝血酶,；PC：蛋白C,；PS：蛋白S；APC：活化的蛋白C,；FV/FⅧ：凝血因子V/Ⅷ；α2-PI：ａ２-纖溶酶激活抑制物,；t-PA：組織型纖溶酶原激活物,；PAI：纖溶酶激活抑制物,；FDP／DD：纖維蛋白（原） 降解產(chǎn)物／D-二聚體；PAF：血小板活化因子,；vWF：Vonwilebrand因子

圖1：凝血標(biāo)志物活化示意圖

1,、凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物（TAT）

凝血酶生成是靜脈血栓形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，它作用于纖維蛋白原使其轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白而形成血栓,。但凝血酶在血液中半衰期不到1分鐘,，會很快被抗凝物質(zhì)中和，因此直接檢測凝血酶非常困難,。而作為凝血酶與抗凝血酶1:1結(jié)合形成的復(fù)合物,，TAT可作為凝血酶生成的分子標(biāo)志物，直接證實(shí)凝血系統(tǒng)的活化,。

正常參考區(qū)間：0-4.0ng/mL

TAT升高見于：

1) DIC,，DIC前期狀態(tài)

2) 深靜脈血栓（DVT），肺栓塞（PE）

3) 某些心房顫動,，與二尖瓣狹窄相關(guān)的心房顫動

4) 其他凝血系統(tǒng)激活狀態(tài)

2,、組織型纖溶酶原激活劑及其抑制劑復(fù)合物（tPAI-C）

當(dāng)凝血活化，纖維蛋白形成后可以激活組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）,，活化的t-PA進(jìn)一步激活纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶,，后者降解纖維蛋白形成D-二聚體。組織型纖溶酶原激活劑抑制劑PAI-1是t-PA的生理性抑制劑,，二者1:1形成復(fù)合物即tPAI-C后,，t-PA激活纖溶酶原的活性被抑制，進(jìn)而抑制纖維蛋白降解,。tPAI-C水平與t-PA濃度及血管內(nèi)皮損傷程度呈正相關(guān),，是評估兩者的直接標(biāo)志物。

正常參考區(qū)間：男性：0-17ng/mL

              女性：0-10.5ng/mL

tPAI-C升高見于：

1) DIC　

2) 血管內(nèi)皮損傷

3) 各種動脈和靜脈血栓形成（DVT,、急性心肌梗死等）

3,、纖溶酶-α2抗纖溶酶復(fù)合物（PIC）

纖溶酶是纖溶系統(tǒng)的重要組成部分，活化的纖溶酶半衰期極短,，僅僅幾秒鐘,，體內(nèi)不易測定，纖溶酶生成后迅速與α2纖溶酶抑制劑1:1結(jié)合形成復(fù)合物,，纖溶酶-α2抗纖溶酶復(fù)合物（PIC）的出現(xiàn)直接反應(yīng)纖溶酶的生成,，可用于纖溶類疾病的輔助診斷及療效觀察。

正常參考區(qū)間：0-0.8ug/mL

PIC升高見于：

1) DIC, DIC前期狀態(tài)

2) DVT,，PE

3) 在溶栓治療的給藥過程中（t-PA,，尿激酶）

4) 其他纖溶激活狀態(tài)

4、血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）

血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）是1981年首次由Esmon等確認(rèn)并提出的一種存在于細(xì)胞膜表面的跨膜糖蛋白,，TM大多出現(xiàn)在動脈,、靜脈,、毛細(xì)血管和淋巴管的內(nèi)皮細(xì)胞表面，可以輔助凝血酶激活蛋白C系統(tǒng)產(chǎn)生抗凝效果,。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生病變或受損時,，常引起TM的表達(dá)、分泌異常,、釋放入血,，從而引起TM含量變化，因此可作為內(nèi)皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志物,。

正常參考區(qū)間：3.8-13.3TU/mL

TM升高見于：

1) 自身免疫性疾?。?/span>SLE等

2) DIC

3) 急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）

4) 血管內(nèi)皮損傷

TAT對于DIC、DVT等引起高度凝血激活的病理狀態(tài),，是敏感標(biāo)志物,，已列入2014年日本血栓止血學(xué)會暫定的DIC診斷標(biāo)準(zhǔn)。但對于進(jìn)行華法林等抗凝治療的患者,，無法發(fā)現(xiàn)低凝水平的血栓形成,，因此不宜作為血栓監(jiān)測指標(biāo)，而是作為抗凝效果的指標(biāo),。tPAI-C和PIC代表纖溶系統(tǒng)活化,，具有很好的血栓診斷意義，原因可能在于其存在反映了纖維蛋白的生成（血栓形成）,，因此可以成為靜脈血栓形成良好的監(jiān)測指標(biāo),。而纖溶的下游產(chǎn)物FDP和D-二聚體易受到底物量、血栓部位,、血循環(huán),、代謝等因素影響，特異性較低,。

三,、檢測原理

以TAT為例，本檢測采用化學(xué)發(fā)光免疫分析兩步法定量檢測凝血酶-抗凝血酶Ⅲ復(fù)合物（TAT）,。生物素化凝血酶單克隆抗體（小鼠）與被檢樣本中的TAT 發(fā)生特異性反應(yīng),，再與鏈霉親和素磁微粒結(jié)合。去除未反應(yīng)物質(zhì)后,，加入堿性磷酸酶（ALP）標(biāo)記的抗凝血酶Ⅲ單克隆抗體（小鼠）與磁微粒上的TAT 發(fā)生特異性反應(yīng),。再次去除未反應(yīng)物質(zhì)后， 添加發(fā)光底物經(jīng)磁微粒上的ALP 分解并發(fā)光,，測定其發(fā)光強(qiáng)度,。發(fā)光強(qiáng)度隨被檢樣本中TAT濃度的增加而增加。如圖2。

圖2.TAT檢測原理

四,、醫(yī)囑項設(shè)置

1,、開展時間：2017年9月1日起檢驗科新街口院區(qū)開展檢測；

2,、醫(yī)囑名稱：血栓分子標(biāo)志物，可輸入首字母“xsfzbzw”進(jìn)行檢索,；

3,、采血須知：靜脈抽取2.7mL全血(無需空腹)于枸櫞酸鈉抗凝管（藍(lán)帽），采樣后立即送檢,；

4,、送檢時間: 工作日11:00AM前送至檢驗科。

5,、報告發(fā)送：1-3個工作日,。

6、聯(lián)系電話：010-58516142（檢驗科新街口院區(qū)臨檢血液檢驗組）,。     

五,、主要參考文獻(xiàn)

1.阮長耿.出血與血栓性疾病的診斷和治療進(jìn)展.臨床血液學(xué)雜志,2010,23(1):1-4.

2.Su EP, Chatzoudis N, Sioros V, et al. Markers of thrombin generation during resurfacing and noncemented total hip arthroplasty: a pilot study[J]. Clin Orthop Relat Res, 2011,469(2):535-540. DOI:10.1007/s11999-010-1659-z.

3.孟英，劉建龍,，吳俊,，等.應(yīng)用凝血標(biāo)志物診斷創(chuàng)傷骨科術(shù)后靜脈血栓形成的病例對照研究[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016,39(10):751-755.