老板最近讓小妹我做一個(gè)缺氧相關(guān)的課題,,研究一下和缺氧有關(guān)的lncRNA,,小妹我把293T細(xì)胞放在低氧環(huán)境中造成缺氧,加上正常的293T,,分別抽提了RNA,,找了一家公司做了下RNA-seq,然后他們就給了我一堆數(shù)據(jù),,就像這樣子,,光是看倍數(shù)變化以及P值,,依然有好幾百個(gè)啊,。 萬(wàn)里挑一偶買(mǎi)噶,研究哪一個(gè),? 這種情況相信很多童鞋也遇到過(guò),,想再進(jìn)一步縮小目標(biāo)的話(huà),最流行的方法莫過(guò)于GO,、KEGG功能分析了,,恰好小妹朋友里有一個(gè)女性朋友小A,她是相親狂魔,,至少相過(guò)50多個(gè)了,,每次不是因?yàn)楦鞣N不滿(mǎn)意拒絕了,小妹不知怎么一琢磨,,發(fā)現(xiàn)這相親過(guò)程和GO,、KEGG注釋有幾分相似之處,給你開(kāi)開(kāi)腦洞,。 首先還是來(lái)再了解一下GO,、KEGG功能注釋是什么鬼?怎么就和相親扯上邊了,。 (一)給每個(gè)分子貼上標(biāo)簽,,便于檢索 相親的時(shí)候,小A比較感興趣的是他有幾套房,、幾部車(chē),、父母是否健康、癖好,、年收入等,,而職場(chǎng)上HR想要挖掘人才的時(shí)候,都會(huì)想了解那些信息呢,?最基本就是他(她)的姓名,、住哪里、什么專(zhuān)業(yè),、211 or 985,、戶(hù)口,、婚姻狀況、任職經(jīng)歷,、業(yè)務(wù)能力等,,研究的領(lǐng)域不一樣,關(guān)心的分子屬性也會(huì)不同,。 同樣的,,這么多l(xiāng)ncRNA不可能全部研究,只能萬(wàn)里挑一,,結(jié)合你所擅長(zhǎng)的領(lǐng)域或者方向去挑選幾個(gè)lncRNA研究下去,。 (1) GO給每個(gè)分子貼上標(biāo)簽,幫助我們快速尋找到目標(biāo)分子 GO中最基本的概念是“標(biāo)簽(term)”,。GO是用一套統(tǒng)一的詞匯表來(lái)描述生物學(xué)中的分子功能,、生物過(guò)程和細(xì)胞成分。 其思想大概過(guò)程:對(duì)于一個(gè)基因產(chǎn)品(蛋白質(zhì)或RNA),,用某些詞匯來(lái)描述它是干什么的或位于細(xì)胞哪里,、或者參與了哪個(gè)生物過(guò)程,而這些詞匯就是來(lái)自GO的“標(biāo)簽”,。比如'cell', 'fibroblast growth factor receptorbinding',,或者'signal transduction'。 這些標(biāo)簽總共有可以分為三個(gè)類(lèi)別:
最后就形成了諸如此類(lèi)的描述: ①HOTAIR出沒(méi)于胞核(CC),,參與了組蛋白甲基化調(diào)控引發(fā)癌基因沉默(BP),具體是結(jié)合PRC2復(fù)合物以及LSD1(MF),。 ②某相親對(duì)象家住朝陽(yáng)區(qū),、就職于某大型咨詢(xún)公司,崗位是賀函或者老譚,外貌什么的其實(shí)已經(jīng)不重要了,。 (2)KEGG功能注釋 其實(shí)和GO的作用是類(lèi)似的,,只是KEGG里面最知名的是代謝通路(pathway)的注釋?zhuān)遣樵?xún)差異基因參與的信號(hào)通路比較權(quán)威的數(shù)據(jù)庫(kù),KEGG Pathway對(duì)差異基因進(jìn)行pathway分析,,可以了解實(shí)驗(yàn)條件下顯著改變的代謝通路,,在機(jī)制研究中非常重要。 GO分析好比是將基因分門(mén)別類(lèi)放入一個(gè)個(gè)功能類(lèi)群的籃子,,而pathway則是將基因一個(gè)個(gè)具體放到代謝網(wǎng)絡(luò)中的指定位置,。 (二)DAVID、PANTHER是常用的分析工具 GO,、KEGG只是數(shù)據(jù)庫(kù)并不能直接作出文章中那么好看的炫酷圖,,可以通過(guò)DAVID或者PANTHER分析后,在excel里面來(lái)實(shí)現(xiàn),。 DAVID:https://david.(使用方法見(jiàn)《基因功能通路和GO分析,,你用什么軟件做,?》) PANTHER:http://www./ --------分割線(xiàn)-------- 最后,,利用GO、KEGG注釋原理,,小A相親成功了,,她看上了一個(gè)學(xué)醫(yī)的。 小A:你是什么專(zhuān)業(yè)??? 醫(yī)學(xué)博士:我是學(xué)醫(yī)的。 小A:學(xué)醫(yī)的,?(她以前見(jiàn)過(guò)4個(gè)學(xué)醫(yī)的了)很苦吧,。 醫(yī)學(xué)博士:挺辛苦的,起早貪黑,。 小A:最近經(jīng)常聽(tīng)到有醫(yī)生猝死啊(想找理由離開(kāi)了),。 醫(yī)學(xué)博士:是啊,睡眠不足,。 小A:要是離家近就能多睡會(huì)了,,你住哪里啊(手拿著包了)? 醫(yī)學(xué)博士:不遠(yuǎn),,就在外灘旁邊,。 小A:(來(lái)了興趣,手松開(kāi)了包)外灘,?租房很貴吧,。 醫(yī)學(xué)博士:我家就在那邊。 小A:(兩眼放綠光)真的啊,那你工資很高吧,。 醫(yī)學(xué)博士:(流汗)其實(shí)工資不高,,主要是我爸爸,他有9個(gè)公司,。 小A:其實(shí)吧我一直都覺(jué)得學(xué)醫(yī)是最高尚的,,救死扶傷,創(chuàng)造生命的奇跡,! 醫(yī)學(xué)博士:,。。,。,。。,。 --(本段子純屬胡謅,,如有雷同,忘諒解)
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