常見(jiàn)問(wèn)題

解決對(duì)策

兩塊玻璃板之間灌膠,，膠總是不平

玻璃沒(méi)有洗干凈，應(yīng)該洗得很干凈

過(guò)硫酸銨和TEMED加量相對(duì)較多

加完試劑后應(yīng)搖勻

           總是漏膠

避免玻璃邊緣（與膠條接觸處）破損

將兩塊玻璃板擺放對(duì)齊,，底部處于同一平面

膜上有明顯氣泡

操作時(shí)將氣泡完全排除

靠膜一側(cè)的濾紙應(yīng)鋪平

特異性低

優(yōu)化一抗

提高一抗和二抗的稀釋度

降低SDS-PAGE中蛋白的上樣量

背景高

優(yōu)化封閉液

優(yōu)化洗滌緩沖液,，增加洗滌次數(shù)

減少曝光時(shí)間

 信號(hào)低

優(yōu)化一抗

濃縮樣品

選擇更高靈敏度的發(fā)光液,，如enlight等。