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隨著養(yǎng)殖行業(yè)，規(guī)?；?，技術(shù)化的不斷發(fā)展。豬場對于免疫抗體檢測的需求越來越多,。兩年前,，小編在中牧生物的平臺上，發(fā)表了一篇解讀豬瘟抗體檢測報告的文章,，傳送：http://mp.weixin.qq.com/s/LRjJpFZ2rRpL4mZQrcCdeA 今天,，小編從操舊業(yè)，為大家準(zhǔn)備了藍(lán)耳抗體檢測報告的解讀方法,，與大家分享,。 首先，讓我們先重溫一下酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）抗體檢測的原理： 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：酶聯(lián)免疫吸附試驗,，簡稱ELISA,，是實驗室最常用的檢測方法。ELISA具有準(zhǔn)確性高,、檢測時間短,、價格低廉、判斷結(jié)果有客觀標(biāo)準(zhǔn),、結(jié)果便于記錄和保存等優(yōu)點,，適合于大批標(biāo)本的檢測，廣泛應(yīng)用于食品安全檢測,、醫(yī)療檢測以及免疫實驗分析等領(lǐng)域,。 基本原理： 抗原抗體的特異性結(jié)合以及抗原或抗體的酶標(biāo)記。 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定,，是否有免疫反應(yīng)的存在,，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度,。測定對象：可以是抗原也可以是抗體,。 藍(lán)耳疫苗抗體的免疫評估： 1.OD值：如果OD值＜0.6，樣品應(yīng)判定為PRRSV2（藍(lán)耳抗體）陰性,；如果OD值≥0.8,，樣品應(yīng)判定為PRRSV2（藍(lán)耳抗體）陽性,。 但由于假陽性抗體的存在（主要是野毒感染與隱性帶毒干擾）,。目前的ELISA檢測手段并不能100%準(zhǔn)確的反映豬群藍(lán)耳抗體情況（藍(lán)耳天津株由于配備了專用試劑盒，可以做到區(qū)分疫苗抗體和野毒抗體） 2.變異系數(shù)：Coefficient of Variation(CV) 變異系數(shù)計算的是平均個體的變化,，以平均滴度背離的百分?jǐn)?shù)來表示 公式如下： CV≤40%,顯示豬群有一個均衡的,、相似反應(yīng)。（表示豬群內(nèi)不同個體之間抗體水平穩(wěn)定,，免疫效果良好） CV≥60%,顯示了豬群抗體滴度反應(yīng)變化高于正常估計值,。（表示豬群內(nèi)不同個體之間抗體水平差異較大；生產(chǎn)管理水平,，疫苗質(zhì)量,、免疫程序制定有提升與商榷的余地） 實例報告解讀 此報告樣本采自北京某豬場，存欄900頭母豬,。豬群均為首次免疫藍(lán)耳,，使用的疫苗為中牧股份生產(chǎn)的威聯(lián)（藍(lán)耳－豬瘟二聯(lián)活疫苗）。此豬場由于之前未做過藍(lán)耳疫苗免疫,，免疫程序為斷奶仔豬25日齡免疫一頭份,，后備豬在配種前免疫了一頭份，經(jīng)產(chǎn)母豬普免一頭份,。 藍(lán)耳抗體陽性率 送檢樣本共有45個,，后備母豬樣本有6個，經(jīng)產(chǎn)母豬樣本有13個,，仔豬26個,。其中OD值≥0.8的合格樣本,共有43個，藍(lán)耳免疫合格率95.5%,。OD值≤0.6的陰性樣本共有2個,，其中經(jīng)產(chǎn)母豬1個，仔豬1個結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值,，分析出現(xiàn)此問題的原因是由于檢測操作失誤干擾所造成的,。（若OD值≥3，則懷疑豬群有野毒感染的情況發(fā)生）。 變異系數(shù)CV值 變異系數(shù)作為衡量豬群抗體穩(wěn)定性與均勻度的指標(biāo),，對評判免疫結(jié)果同樣有重要的意義,。各位豬倌在研究自己豬場的檢測報告時注意不要漏掉CV值的讀取。那么,，回到這份報告當(dāng)中,，通過上述公式計算，最后可算得變異系數(shù)CV值為：后備母豬26%,，經(jīng)產(chǎn)母豬為33%,；仔豬群為41%。表示豬群抗體總體穩(wěn)定,，免疫效果確實,。 上面這些信息，都是對抗體檢測原理以及對其數(shù)值概念的解讀,。那么,，我們應(yīng)該如何利用好這些數(shù)據(jù)呢？接下來,，我們就來說說檢測報告的應(yīng)用,。 免疫效果評估 免疫評估標(biāo)準(zhǔn)：種豬群（公豬和母豬）：藍(lán)耳疫苗免疫后4-6周，檢測抗體,，要求 ：免疫合格率≥90%,CV≤40%,。 商品豬：藍(lán)耳免疫后4-6周 ，要求：陽性率 ≥80%,CV≤40%,。 后備豬（全群檢測）：進(jìn)入隔離舍后1-2周,、進(jìn)入配種舍前1個月（6-6.5月齡），要求： 免疫合格率 ≥40%,，陰性豬補打疫苗,，3周后復(fù)檢，不合格則淘汰,。 按照上述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估,，使用中牧股份威聯(lián)產(chǎn)品免疫后的種豬群，在免疫合格率（95.5%）與變異系數(shù)（26%,，33%,，41%）這兩項指標(biāo)均達(dá)到優(yōu)秀水平。威聯(lián)免疫后仔豬藍(lán)耳抗體合格率（96.1%）優(yōu)秀,，變異系數(shù)（41%）合格,。 推薦免疫程序 仔豬：28-35日齡，免疫一頭份 后備母豬：配種前 14 周免疫一次,，3 周后二免 ,，每次一頭份 經(jīng)產(chǎn)母豬：每3-4 個月免疫一次 ，每次一頭份 |
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