制劑生物等效的基本原則是上世紀(jì)90年代初確定的,，即受試制劑和參比制劑主要藥動學(xué)參數(shù)（AUC和Cmax）幾何均值比的90%置信區(qū)間應(yīng)落在80%~125%之間。美國,、日本,、歐盟、加拿大和南非等國相繼制定了各自的指導(dǎo)原則,。中國藥典2000年版首次制訂了《藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗指導(dǎo)原則》,，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心也在2005年3月推出了《化學(xué)制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,。

歐盟于1992年6月頒布了首個生物利用度（BA）和生物等效性（BE）研究指導(dǎo)原則，2001年7月頒布了《對生物利用度和生物等效性研究的說明》,。2010年1月EMA頒布了《生物利用度和生物等效性研究指導(dǎo)原則》,，對既往指導(dǎo)原則做了修訂。該指導(dǎo)原則僅適用于仿制化學(xué)藥品的普通制劑,，不包括調(diào)釋制劑,、透皮制劑、經(jīng)口吸入制劑以及無法用藥物濃度證明生物等效性,，需要藥效動力學(xué)或臨床終點試驗證明等效的藥物制劑,。

FDA于2003年頒布了《口服制劑生物利用度/生物等效性（BA/BE）研究的總體考慮》，另外,，針對具體藥物,，F(xiàn)DA均給出了具體的指導(dǎo)意見。2007年FDA又頒布了《食物對生物利用度的影響以及餐后生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,，作為對上一個指導(dǎo)原則的補充,。2013年12月FDA頒布了《以藥動學(xué)為終點評價指標(biāo)的仿制藥生物等效性研究指導(dǎo)原則》（草案），該指導(dǎo)原則修訂并擬替代前兩個指導(dǎo)原則中有關(guān)仿制藥BE研究的內(nèi)容,。該指導(dǎo)原則也適用于緩控釋制劑的BE試驗,。相對于EMA的指導(dǎo)原則,，F(xiàn)DA的指導(dǎo)原則更加細致,、具體和嚴(yán)格。

本文通過對EMA和FDA指導(dǎo)原則的要點進行比較,，介紹國外對口服制劑生物等效性研究的新規(guī)定和觀點,，以及對我國相應(yīng)領(lǐng)域的啟示。

1生物等效性試驗設(shè)計

EMA和FDA指導(dǎo)原則中,，標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)計都是2′2的雙周期交叉試驗設(shè)計,。對于長半衰期藥物，也可以接受平行設(shè)計,，但不同治療組別的人口學(xué)基線值應(yīng)該相當(dāng),，如年齡、體重,、性別,、種族、吸煙情況和代謝能力等,。因此在平行試驗設(shè)計中,，有必要篩查受試者特定藥物代謝酶的基因型或表型，對受試者合理分組,。對于高變異藥物,，推薦使用重復(fù)交叉試驗設(shè)計,，以準(zhǔn)確評價制劑的個體內(nèi)變異情況。

一般認(rèn)為單次給藥能更敏感地比較藥物釋放進入系統(tǒng)循環(huán)的制劑間差異,，所以指導(dǎo)原則建議采用單次給藥試驗,。在EMA指導(dǎo)原則中，有兩種情況可接受多次給藥的BE試驗,，一是出于安全性/耐受性原因,，只能在患者進行研究，而患者無法停止用藥,；二是由于分析方法檢測靈敏度不夠,，需要多次給藥達到較高的濃度。在后一種情況下,，如果沒有溶解度和安全性的限制,，也可單次給予高于臨床的劑量進行BE試驗。而FDA指導(dǎo)原則規(guī)定,，只有在第一種情況時可接受多次給藥的BE試驗,。

2選擇受試者

EMA和FDA均建議優(yōu)先選擇健康志愿者，但出于安全性原因,，可選擇患者進行生物等效性研究,。均要求有足夠的受試者例數(shù)，以保證試驗的把握度,。EMA對受試者例數(shù)的要求是不少于12例,，認(rèn)為在大多數(shù)情況下健康志愿者體內(nèi)模型足以檢測制劑的差別，并允許將結(jié)果外推到參比藥品被批準(zhǔn)治療的群體（老年人,、兒童,、腎或肝功能受損患者等）。FDA新的指導(dǎo)原則要求生物等效性試驗受試人群具有代表性,，要考慮年齡,、性別和種族等因素，如果試驗藥物的適用人群包括不同性別,，則受試人群應(yīng)有相似的男女比例,，如果試驗藥物主要用于老年人，則建議盡可能多地入選60歲以上的老年志愿者,。對于高變異藥物采用比例標(biāo)化的平均生物等效性試驗時,，F(xiàn)DA要求例數(shù)不少于24例。

3選擇參比藥品

按照EMA要求,，參比制劑應(yīng)該是在歐盟已經(jīng)獲得上市授權(quán)的藥品,，并具有的全面的藥效和安全性資料。因此原研產(chǎn)品的最初批準(zhǔn)劑型應(yīng)該是首選,。

FDA對于參比制劑的選擇很明確,，在處方藥及非處方藥的目錄中,，F(xiàn)DA規(guī)定了參比藥品目錄，以此來避免由于參比制劑使用的不同而可能導(dǎo)致的各仿制品之間發(fā)生顯著的差異,。每個品種的參比藥品都非常明確,，給出了特定藥廠和特定規(guī)格。

EMA和FDA都要求受試制劑藥物含量與參比制劑藥物含量差值小于5%,，對于BE試驗中的藥品,，F(xiàn)DA要求要保存足量的留存樣品。

4選擇空腹或餐后服藥

EMA認(rèn)為空腹條件在評價制劑差別時最敏感,，一般只要求空腹給藥下的試驗,。但如果參比制劑注明餐后給藥，則一般在餐后條件下進行BE試驗,。如果餐后給藥僅僅是為了避免患者長期用藥出現(xiàn)耐受性問題,，則也可以接受空腹條件的BE試驗；如果是基于藥動學(xué)原因?qū)е滤幬锉┞读匡@著不同而采用餐后給藥方式時,，則只能進行餐后給藥的BE試驗,。對于特殊劑型特征的藥品（如微乳、固體分散體）,，生物等效性試驗需要既在空腹也在餐后條件進行,，除非藥品必須僅在空腹或僅在餐后服用。

FDA新的指導(dǎo)原則整合了餐后BE研究的相關(guān)內(nèi)容,。要求除空腹給藥外,，還要進行餐后給藥的BE試驗，除非參比藥品說明書明確規(guī)定空腹給藥,。對于只能餐后給藥的立即釋放制劑,，除餐后給藥外,，只要沒有嚴(yán)重不良事件的風(fēng)險,，也要做空腹給藥BE試驗。因此,，按照FDA的要求,，大部分藥物均需要進行空腹和餐后兩種條件下的BE試驗。而對于緩釋制劑,，均要求在空腹和餐后兩種條件下進行單次給藥的BE試驗,。

在FDA新的指導(dǎo)原則中，對于食物組成與EMA要求相似,，只規(guī)定食物的熱量和脂肪含量,，以及試驗用餐中，蛋白,、糖類和脂肪的熱量比例,。不再推薦相應(yīng)的食譜,，因此可以根據(jù)試驗地點的飲食習(xí)慣選擇食物組成。

5選擇檢測物質(zhì)

5.1原形或代謝物 原則上,，評價生物等效性應(yīng)該基于母體化合物的測得濃度,，即使是非活性前藥，這已得到共識,。按照EMA的要求,，如果已經(jīng)測了母體藥物，則不需要檢測活性代謝物,。但FDA要求,，當(dāng)主要代謝物由系統(tǒng)前代謝形成（如首過效應(yīng)，腸壁或腸腔代謝）且對藥物安全性或療效有顯著影響時,，需要檢測該代謝物,，但僅對原形藥物進行生物等效性評價，代謝物只作為支持?jǐn)?shù)據(jù),。

特殊情況下,，如非活性前藥血漿濃度很低，并且快速清除,，導(dǎo)致難于證明母體化合物的生物等效性時,，或者試驗研究藥物母體化合物的分析方法不能改進（即使在高劑量下），可考慮用活性代謝物或主要代謝物進行BE評價,。

5.2對映體或外消旋體 通常推薦用非手性的方法進行生物等效性研究,。按照FDA的要求，同時滿足以下4種情況時才需要對映體選擇性分析：①兩對映異構(gòu)體藥效不同,。②兩對映異構(gòu)體藥動學(xué)不同,。③兩對映異構(gòu)體中占少數(shù)的異構(gòu)體發(fā)揮主要療效。④至少有一個對映異構(gòu)體吸收過程呈現(xiàn)非線性（隨著藥物吸收速率的變化,，兩對映異構(gòu)體濃度比例發(fā)生改變）,。

6內(nèi)源性物質(zhì)的生物等效性試驗

如果試驗藥物和內(nèi)源性物質(zhì)結(jié)構(gòu)相同，則應(yīng)該用基線校正來計算藥動學(xué)參數(shù),，以使藥動學(xué)參數(shù)計算反映給藥后增加的濃度,。而對于基線校正的方法。用得最多的校正方法是給藥后測得濃度減去基線濃度,，而基線濃度一般為給藥前3個以上濃度水平的均值,。EMA推薦標(biāo)準(zhǔn)縮減基線校正法，即減去個體的內(nèi)源性物質(zhì)給藥前濃度的均值,，或者減去個體給藥前內(nèi)源性AUC,。也有人用內(nèi)源性物基線水平的對數(shù)值進行校正。比較成熟的辦法是在給藥前檢測不同時間點內(nèi)源性物質(zhì)水平，以獲得有晝夜節(jié)律的基線值,，給藥后濃度用相應(yīng)時間點的校正值,。這個方法與FDA推薦的方法相似，即對于由機體產(chǎn)生的內(nèi)源性物質(zhì),，建議給藥前根據(jù)藥動學(xué)特征多點測定基線值,，從給藥后的血藥濃度中減去相應(yīng)的基線值。若經(jīng)過基線校正后血藥濃度出現(xiàn)負值,，則以零計,。校正前和校正后的數(shù)據(jù)應(yīng)分別進行藥動學(xué)參數(shù)計算和統(tǒng)計分析。采用校正后的數(shù)據(jù)進行生物等效性評價,。FDA強調(diào)對來源于食物的內(nèi)源性物質(zhì),，試驗中控制飲食的必要性。EMA建議考慮超治療劑量給藥,，只要該劑量能被很好耐受,，使給藥后增加的超過基線的濃度能被可靠測定。不管何種校正方法,，都應(yīng)該在試驗前規(guī)定,。

7關(guān)于窄治療指數(shù)藥物

EMA對治療指數(shù)窄的藥物比較嚴(yán)格，AUC的等效性標(biāo)準(zhǔn)縮窄至90%~111.11%,，在Cmax對安全性,、藥效或藥物濃度監(jiān)測特別重要的情況下，同樣適用于上述范圍,。FDA在2012年前對窄治療指數(shù)藥物的接受標(biāo)準(zhǔn)仍然是80%~125%,。而目前FDA推薦的是比例標(biāo)化的方法，在等效性限值90%~111%基礎(chǔ)上根據(jù)參比制劑的變異度放寬標(biāo)準(zhǔn),。當(dāng)參比制劑的個體內(nèi)變異CV≤10%時,，等效性限值為90%~111%；CV在10%~21%之間時,，等效性限值比80%~125%窄,；CV大于21%時，等效性限值為80%~125%,。另外要求受試制劑和參比制劑的個體內(nèi)變異比值swT/ swR≤2.5,。基于這一要求,，只能采用完全重復(fù)的交叉試驗設(shè)計（4周期）。FDA推薦的窄治療指數(shù)藥物的生物等效性評價具體算法見華法林片生物等效性的指導(dǎo)意見,。

8其他

EMA的指導(dǎo)原則可以接受兩階段試驗設(shè)計,，但要求必須在試驗方案中預(yù)先規(guī)定，為減少I類錯誤的發(fā)生,，要規(guī)定調(diào)整后顯著性水平,。在分析第1階段以及第1和第2階段合并的數(shù)據(jù)時,，使用94.12%置信區(qū)間是可以接受的。

EMA和FDA都對數(shù)據(jù)的剔除做了說明,，如嘔吐和腹瀉,、非零基線濃度大于Cmax的5%以及AUC(0-t)覆蓋AUC(0-￥)少于80%的數(shù)據(jù)處理。

新版的FDA指導(dǎo)原則指出：對于半衰期較長的（24h以上）藥物,，如果藥物分布和清除個體內(nèi)變異較大,，明確說明不能截取部分AUC來評價藥物暴露量。因為在給藥后短時間內(nèi)（5~15min）未采集早期的樣本,，導(dǎo)致首個樣本即為Cmax,，則一般不應(yīng)將該受試者的數(shù)據(jù)納入統(tǒng)計分析。另外,，特殊問題點考慮到了酒精對非常釋制劑可能的影響,。

原文見：張逸凡，鐘大放. 歐美國家口服固體制劑生物等效性試驗指導(dǎo)原則的要點和啟示[J].中國新藥雜志,，2014,23（13）：1501-1505.