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人參中總皂甙的超聲波快速提取方法研究 許漢英，梁春,，商明磊 (吉林出入境檢驗檢疫局,，長春130062) 摘要：建立了人參中總皂甙超聲波半微量快速提取方法。與索氏提取法相比．此法提取時間 由索氏法的l～2個工作日縮短到30min,，節(jié)省大量試劑,，綜合提取效率提高數(shù)十倍。與索氏提取 法對照分析表明,，此法可完全滿足人參中總皂甙的快速測定要求,。 關(guān)鍵詞：人參總皂甙；超聲波提??；半微量分析 中圖分類號：0657 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1001—4020(2002)12—0625—02 RAPID UI TRASONIC EXTRACTION ()F TOTAL GINSENOSIDE FR()M GINSENG XU Han-ying，LIANG Churl,，SANG M ing-lei (dilin Entry-EJqt Inspection and Quarantine Bureau．Changch“”130062,，China) Abstract：A rapid ultrasonic extraction method of total ginsenoside from ginseng was reported in this paper． In the operation of ultrasonic extraction，only 0． essary for the extraction．As compared with the conventional Soxhlet s extraction method,，the ultrasonic extraction method required shorter extraction time and less solvent reagent．Furthermore the compo site extraction efficiency of the ultrasonic method was about 10 times higher than the Soxhlet s method．There was no significant difference be— tween the analytical results obtained by these tWO methods． Keywords：Ultrasonic extraction,；Gensenoside；Semimicro analysis 長期以來,，在人參總甙的測定方法中,，總皂甙的 提取過程一直是決定方法快慢的關(guān)鍵步驟。常用的 提取方法有索氏提取法和超聲波提取法,。索氏法是 經(jīng)典的提取方法,，應(yīng)用范圍較廣，提取比較徹底,；缺 點是提取時間長,，操作繁瑣，約需2個工作日l1 ],。 超聲波提取法大大縮短了提取時間,，只需約1個工 作日，提高了工作效率[4],。本法采用甲醇作提取劑,。 研究了超聲波提取的各種影響因素,，建立了人參中 總皂甙的半微量快速提取方法，將單一樣品的分析 時間進一步縮短為約lh,，大大提高了分析速度及工 作效率,，節(jié)省試劑，降低了實驗室勞動強度,。與索氏 提取法對照分析表明,，本法不僅快速，而且也比較準(zhǔn) 確,，對樣品的提取和測定完全符合一般測試要求,。 1 試驗部分 1．1 主要儀器與試劑 收稿日期：2001一O2一O5 作者簡介：許漢英(1962)，男,，山東平度人,，工程師．從事進出 I21食品的檢驗及技術(shù)研究工作。 760MC雙光束紫外分光光度計 超聲波發(fā)生器,，工作頻率40kHz,。 香草醛一冰乙酸溶液： 人參皂甙(Re)標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98 (吉林省藥 品檢驗所提供) 人參皂甙標(biāo)準(zhǔn)溶液：lmg·ml ，稱取人參皂甙 標(biāo)準(zhǔn)品5．Qmg,，用甲醇溶解并定容至5ml,。 其他試劑均為分析純，水為一次蒸餾水,。 1．2 樣品中總皂甙的提取 稱取供試樣品約0．1OOg[粒度應(yīng)通過60號篩 (孑L徑0． 醇2ml，加塞后放人超聲波水浴中超聲30min,。然 后取出試管置離心機中以1500r·min 離心 15min,，取出，備用,。 1．3 樣品測定 移取上清液 浴中揮干溶劑。取出后再依次加入香草醛一冰乙酸 溶液0．2ml,，高氯酸0．8ml,，搖勻 置于 加熱l5min。取出后于冷水中冷卻至室溫,，再加入 冰乙酸5ml，搖勻,，于560nm 波長處測定吸光度,，與 · 62S · 許漢英等：人參中總皂甙的超聲波快速提取方法研究 標(biāo)準(zhǔn)對照，計算樣品中總皂甙含量,。 2 結(jié)果與討論 2．1 取樣量對超聲提取效果的影響 與所有的聲波一樣,，超聲波在不均勻的介質(zhì)中 傳播也會發(fā)生散射衰減[s],。在對樣品進行超聲提取 時，樣品整體作為一種介質(zhì)是各向異性的,，即在各個 方向上都不均勻,，造成超聲波的散射，因此,，到達樣 品內(nèi)部的超聲能量會有一定程度的衰減,，影響提取 效果。由于本法采用10ml具塞試管作為樣品提取 時的容器,，其截面積較小,，當(dāng)取樣量大時，則樣品厚 度增大,，到達樣品內(nèi)部的超聲能量衰減也就越嚴(yán)重,， 提取效果越差。綜合以上試驗結(jié)果及其他因素,，本 法選擇取樣量為0． 2．2 供試樣品的細(xì)度對提取效果的影響 超聲波不僅在兩種介質(zhì)的界面處發(fā)生反射和折 射，而且在較粗糙的界面上還發(fā)生散射,，引起能量的 衰減_5],。在本法中，供試樣品的細(xì)度將直接影響作 用于樣品中的超聲波能量的大小,。資料表明,，當(dāng)顆 粒直徑與超聲波長的比值為l ～lO 時，這種散 射很??；當(dāng)比值大于lO 時，散射逐漸增大,，造成能 量大幅度衰減l53,。本法所用超聲波發(fā)生器工作頻率 為40kHz，經(jīng)計算得知,，當(dāng)供試樣品的細(xì)度為6O目 時,，其顆粒直徑與超聲波長的比值大約為1 ，此時 提取效果較好,；當(dāng)細(xì)度小于6O目時,，提取效果下降。 此外,，在較大的顆粒內(nèi)部,，溶劑的浸提作用也會 明顯減弱，這也是供試樣品細(xì)度對提取效果產(chǎn)生影 響的另一個重要原因,。 2．3 提取時間的選擇 通過對4個不同的人參樣品,，采用不同的提取 時間來進行超聲提取,，結(jié)果表明，當(dāng)超聲提取時間達 到30min時,，即可達到較好的提取效果,。 2．4 超聲提取液直接顯色及與標(biāo)準(zhǔn)品的光譜對照 文獻中不論索氏提取法還是超聲波提取法(采 用正丁醇作提取劑)，都要經(jīng)過脫脂處理,。本法采用 甲醇作提取劑,，由于甲醇的極性要高于正丁醇，脂類 在甲醇中的溶解度要小于在正丁醇中的溶解度,，并 且本法取樣量僅為0． 聲波法為1． 聲提取并離心后，直接吸取甲醇溶液進行顯色測定,， 省去脫脂步驟,，簡化了試驗操作，進一步縮短了檢驗 時間,。與索氏提取法并經(jīng)脫脂處理的樣品吸收光譜 相對比,，其形狀相似，最大吸收峰位置相同(見圖 1),，同時也與標(biāo)準(zhǔn)品顯色后的吸收光譜作了對比,，結(jié) 果表明本法省略了脫脂步驟是基本可行的。 圖1 本法及索氏提取法與標(biāo)準(zhǔn)品的吸收光譜對照 l_人參皂甙標(biāo)準(zhǔn)品(Re) 2．索氏提取法并經(jīng)脫脂處理的樣品 3．本法未經(jīng)脫脂處理的樣品 2．5 方法對照試驗 分別采用索氏提取法和超聲波提取法(本法)進 行人參總皂甙的9次平行測定試驗,，并將測定結(jié)果 進行統(tǒng)計分析比較,。結(jié)果表明，經(jīng)t檢驗和F檢驗,， 兩種方法之間無顯著性差異,。見表l。 表1 方法對照試驗 2．6 綜合提取效率比較 本法采用超聲波提取法進行人參總皂甙測定,， 所用提取劑的量和樣品量僅為索氏提取法的幾十分 之一,，而單樣分析速度則快十幾倍左右；即使與文獻 超聲波提取法相比,，在分析速度和節(jié)省試劑方面也 有較明顯的優(yōu)勢,，并且在進行成批樣品分析時具有 更大的優(yōu)越性。比較結(jié)果見表2,。 表2 綜合提取效率比較 第38卷第12期 2002年12月 理化檢驗一化學(xué)分冊 P'I'CA (PART B：CHEMICAI ANAI YSIS) Vol_38 No．12 Dec． 2002 二安替比林甲烷光度法測定工業(yè)硅中鈦 王永雙,，張俊安，朱利斌,，余磊 (襄樊出入境檢驗檢疫局,，襄樊441003) 中圖分類號：0657．31 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1001-4020(2002)12 0627—01 工業(yè)硅中雜質(zhì)元素的測定，一般只測定其中的 鐵,、鋁,、鈣含量 j。在近年的出口工業(yè)硅檢驗中,， 對鈦也提出檢測要求,。本法采用二安替比林甲烷光 度法l3 測定工業(yè)硅中鈦，方法簡便,、穩(wěn)定,，結(jié)果準(zhǔn)確。 1 試驗部分 1．1 儀器與試劑 TU一1901分光光度計(北京普析通用儀器公 司) Ti(IV)標(biāo)準(zhǔn)溶液：0．1mg·ml ,，稱取高純二氧 化鈦0． 塊后移人 度。使用時再稀釋成 二安替比林甲烷溶液： 比林甲烷 所用試劑均為分析純 1．2 試驗方法 準(zhǔn)確移取適量Ti(IV)標(biāo)準(zhǔn)溶液于100ml容量 瓶中,，加HCI(1+1)2ml,，加 液5ml，搖勻,。5min后,，加HC1(1+1)20ml，二安 替比林甲烷溶液20ml,，以水稀釋至100ml,。在常溫 下放置1h后，以試劑空白作參比,，用 390nm波長處測定吸光度,。 2 結(jié)果與討論 2．1 吸收光譜 收稿日期：2000—12—05 + 一+ 一+ 一—+-一+ 一—+--+ 一+ 一+ 一+ 一+ 一+ 一+ 一+ -+ 一+ 一+ 一+ 一+ 在鹽酸介質(zhì)中，Ti(IV)與DAPM 生成黃色配合 物,，最大吸收波長為390nm,。 2．2 顯色酸度 按試驗方法，在不同酸度介質(zhì)中進行試驗,，結(jié)果 表明,，在0．5～2．5mol·I 鹽酸介質(zhì)中顯色均適 宜。本法選用1．8mol·L 鹽酸,。 2．3 顯色劑用量 取50p-g鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液,，按試驗方法試驗顯色劑 用量,，結(jié)果表明，顯色劑用量在0．5～0． 度穩(wěn)定,。本法選用顯色劑用量為0． 2．4 顯色時間 取50／~g鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液，改變顯色時間,，按試驗方 法進行操作,，結(jié)果表明顯色lh后吸光度穩(wěn)定，且顯 色后體系至少可穩(wěn)定8h,。 2．5 工作曲線 按試驗方法測定吸光度,，結(jié)果表明，Ti(IV)濃度 在0-1．2mg·I 范圍內(nèi)符合比耳定律,，一元線性 回歸方程A一一2．50×10 +3．20× 系數(shù)e39o一1．54×10 ,。 2．6 共存離子的影響 在選定條件和50mg抗壞血酸存在下,，測定Tj (Ⅳ)40~g／100ml，當(dāng)相對誤差不超過±5 時,，以下 離子(以mg計)不干擾：Fe(Ⅲ)(5),，AI(Ⅲ)、Ca(1I) (2),，Cu(II),、Pb(II)、Ni(1I)(0．2),，Mn(Ⅶ )(0．5)． POj一(0．6),。 2．7 樣品分析 (下轉(zhuǎn)第630頁) 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