一,、基本概念（共 20  分，每小題 2  分）

1.DNA結(jié)構(gòu)的不均一性：反向重復(fù)序列又稱回文序列,，富含A/T的序列,，富含G/C的序列，高度重復(fù)序列,。

2.單鏈結(jié)合蛋白（SSB蛋白）：在DNA復(fù)制過程中,，雙螺旋打開進(jìn)行復(fù)制，為保持單鏈結(jié)構(gòu),，單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合在DNA的一條鏈上,。

3.無義突變：核苷酸的突變成終止密碼子（UAG、UGA,、UAA）,，使蛋白質(zhì)合成提前終止，合成無功能和無意義的多肽,，這種突變稱為無意義突變,。

4.小核RNA（ snRNA）：是一類稱為小核核蛋白體復(fù)合體(snRNP)的組成成分，功能是在hnRNA成熟轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過程中,，參與RNA的剪接,，運(yùn)輸,。

5.核心啟動子元件：指保證RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄正常起始所必需的最少的DNA序列，包括轉(zhuǎn)錄起始位點及轉(zhuǎn)錄起始位點上游TATA區(qū),。

6.信號識別顆粒：含有300個核苷酸的7S小分子RNA（小胞漿scRNA）及6種蛋白質(zhì)的核糖核蛋白,，在信號肽出現(xiàn)后，能識別并引導(dǎo)肽鏈跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),。

7.考斯質(zhì)粒：由于λ-DNA包裝蛋白只識別粘性末端的一小段順序cos區(qū),。將這段DNA與質(zhì)粒連在一起，構(gòu)建的重組質(zhì)粒,，可裝載DNA（32～45.5kb),。

8.復(fù)雜轉(zhuǎn)錄單位：轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可通過不同的方式加工成兩個或兩個以上的mRNA。利用多個剪接位點,，多個加poly(A)位點,，可得到不同的蛋白質(zhì)。

9.帽子結(jié)合蛋白（CBP)：能專一識別帽子結(jié)構(gòu)的蛋白,，具有促進(jìn)有帽子mRNA的蛋白質(zhì)合成的活性,。

10.限制性片段長度多態(tài)性：DNA 順序發(fā)生了突變，使突變所在部位的某種限制性內(nèi)切酶的位點發(fā)生改變,。利用該酶切DNA 時,，便會產(chǎn)生與正常不同的限制性片段。這樣,，在同種生物的不同個體中會出現(xiàn)不同長度的限制性片段類型,。

二、填 空（共 30 分,，每小題 1 分）

1.基因突變單個堿基的改變,，同類堿基之間取代稱為（轉(zhuǎn)換）；否則稱（顛換）,。

2.基因的損傷,，一切使DNA結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變的DNA，都可稱為基因的損傷,。突變也是DNA損傷的一種,，此外還包括：（堿基損傷）,，（DNA鏈斷裂）,。

3.原核生物mRNA與基因是（共線的），順反子是（多順反子）,；真核mRNA與基因（不是共線）,，順反子是（單順反子）。

4.轉(zhuǎn)錄的不對稱性是指在RNA的合成中,，DNA的二條鏈中僅有一條鏈可作為轉(zhuǎn)錄的模板,，稱為轉(zhuǎn)錄的不對稱性,。與mRNA序列相同的那條DNA鏈稱為（編碼鏈）；將另一條根據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)mRNA合成的DNA鏈稱為（模板鏈）,。

5.轉(zhuǎn)錄終止不依賴r因子的終止,，終止位點上游一般存在一個富含（GC）堿基的二重對稱區(qū)，RNA形成（發(fā)夾）結(jié)構(gòu),；終止效率與二重對稱序列和寡聚U的長短有關(guān),，長度增加其終止效率（提高）。

6.質(zhì)粒DNA有三種構(gòu)型 SC構(gòu)型是（超螺旋構(gòu)型）,，oc構(gòu)型是（單鏈開環(huán)）,， L構(gòu)型是（雙鏈開環(huán)），各構(gòu)型在凝膠電泳中從前到后的順序是（SC   L  oc）,。

7.pBR322 的篩選方式是通過（抗生素抗性）篩選,，pUC18/19的篩選方式是通過（藍(lán)白斑）篩選。

8.CAP的調(diào)控作用,，cAMP含量與（葡萄糖）的分解代謝有關(guān),，cAMP與受體（CRP）結(jié)合變?yōu)镃AP，對轉(zhuǎn)錄的作用（促進(jìn)轉(zhuǎn)錄）,。gal操縱子具有兩個啟動子S₁和S₂,，當(dāng)有CAP時，轉(zhuǎn)錄從（S₁）開始,，無CAP時,，轉(zhuǎn)錄從（S₂）開始。

9.原核生物基因表達(dá)調(diào)控,，阻遏蛋白與效應(yīng)物結(jié)合時,，基因不轉(zhuǎn)錄（負(fù)控阻遏）；阻遏蛋白不與效應(yīng)物結(jié)合時基因不轉(zhuǎn)錄（負(fù)控誘導(dǎo)）,；有效應(yīng)物時,，激活蛋白處于無活性狀態(tài)基因不轉(zhuǎn)錄（正控阻遏）；有效應(yīng)物時,，激活蛋白處于活性狀態(tài)基因轉(zhuǎn)錄（正控誘導(dǎo)）,。

10.不同細(xì)胞類型中總有一組經(jīng)常保持表達(dá)狀態(tài)的基因稱為（持家基因）；只有在發(fā)育一定時期才能表達(dá)的一些特異性基因稱為（時態(tài)基因）,。

三,、選擇題（共 30  分，每小題  2  分）

1.通常DNA右手雙螺旋構(gòu)象的表示是(  B  )

    A.A－DNA,、   B.B-DNA     C.Z－DNA      D. H-DNA

2.下列堿基對中DNA雙螺旋的穩(wěn)定性哪個高（ A ）

A.5^／GC 3^／    B.5^／CG  3^／        C.5^／C T  3^／    D.5^／AG  3^／

3^／CG 5^／           3^／GC  5^／          3^／G A 5^／       3^／TC  5^／

3.簡單轉(zhuǎn)錄單位編碼產(chǎn)生一個多肽,，沒有內(nèi)含子，無需剪切，但需要加poly(A)尾,，下列那種基因?qū)儆谶@種類型（ A ）

A.α-干擾素基因     B.組蛋白基因  C. Ig基因   D. 多數(shù)基因

4.PKA全酶由4個亞基組成,，具有活性的 PKA酶的組成是（  A  ）

A.CC      B.RR      C. RC   D.RRCC

5.下列有關(guān)TATA盒(Hognessbox)的敘述,哪個是正確的（  B  ）

    A.它位于第一個結(jié)構(gòu)基因處  B.它和RNA聚合酶結(jié)合

C.它編碼阻遏蛋白          D.它和反密碼子結(jié)合

6.轉(zhuǎn)錄需要的原料是（ D ）

A.dNTP     B. NMP   C. dNMP    D. NTP

7.DNA模板鏈為 5’-ATTCAG-3 ’ , 其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是（ D  ）

    A. 5 ’ -GACTTA-3 ’  B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’

    C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’  D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’     

8.真核細(xì)胞中的mRNA帽子結(jié)構(gòu)是（ A ）

  A. 7-甲基GTP         B. 7-甲基UTP   C. 7-甲基ATP       D. 7-甲基CTP

9.下面哪一項是對三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的正確描述（  B ）

A. σ因子、核心酶和雙鏈DNA            B. 全酶,、模板DNA和新生RNA

    C. 三個全酶在轉(zhuǎn)錄起始點形成的復(fù)合物    D. σ因子,、核心酶和促旋酶

10.原核生物中起始氨基酰-tRNA是（ A ）

A.fMet-tRNA　　　 B.Met-tRNA       C.Arg-tRNA　　　　D.leu-tRNA

11.與pCAGCT互補(bǔ)的DNA序列是（ A ）

A.pAGCTG　　      B.pGTCGA　   　  C.pGUCGA　　　    D.pAGCUG　　

12.PCR實驗的特異性主要取決于（ B ）

　  A.DNA聚合酶的種類　　　        B.引物序列的結(jié)構(gòu)和長度

  C.反應(yīng)體系中模板DNA的量　　   D.四種dNTP的濃度　　　

13.下面哪個元件在色氨酸操縱子的調(diào)控中發(fā)揮作用（ C ）。

A.增強(qiáng)子     B.轉(zhuǎn)錄子    C.弱化子/衰減子    D.順反子

14.下列 DNA序列屬于回文結(jié)構(gòu)的是（  D ）

A.GAAACTGCTGTTTC       B.GAAACTGGTCAAAG

C.GAAACTGGTCTTTC       D.GAAACTGCAGTTTC

15.植物基因工程轉(zhuǎn)入下列那種基因能夠起到抗蟲作用（ C ）

A. 殺菌肽    B. 外殼蛋白基因    C. 蛋白酶抑制劑基因    D. T-DNA

四,、簡答題（共20 分,，每小題 4 分）

1．細(xì)菌基因組的結(jié)構(gòu)特征?

◆相關(guān)的基因串聯(lián)在一起組成操縱子結(jié)構(gòu),形成多順反子mRNA；

◆不存在內(nèi)含子,，基因是連續(xù)的轉(zhuǎn)錄后無須進(jìn)行加工,；        

◆大部分是編碼區(qū)，非翻譯區(qū)主要是調(diào)控部分,；                           

◆少數(shù)基因有基因重疊現(xiàn)象,；

2．反轉(zhuǎn)錄酶的特點？反轉(zhuǎn)錄酶發(fā)現(xiàn)的意義,？

◆RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性,；不具有外切酶活性；      

◆DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性,；DNA內(nèi)切酶活性；                                           

◆意義：作為工具酶,，提取mRNA為模板,，合成的cDNA，由此可構(gòu)建出cDNA文庫(cDNA library),，從中篩選特異的目的基因,。

3．cDNA的扣除文庫的構(gòu)建？

◆將兩種不同組織來源的mRNA進(jìn)行比較,，用扣除雜交排除相同部分,，即共同表達(dá)的那部分mRNA，選出有差異的,、特異表達(dá)的mRNA,，構(gòu)建成的cDNA文庫。                                        

◆構(gòu)建過程：從兩種不同類型的細(xì)胞T,、D分別提取mRNA,，T細(xì)胞mRNA逆轉(zhuǎn)錄合成單鏈的cDNA，向T細(xì)胞 cDNA中過量加入D細(xì)胞總mRNA

◆兩者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA雜合分子,，余下單鏈cDNA代表了僅僅存在于T細(xì)胞表達(dá)的基因信息,。

4．色氨酸操縱子的調(diào)控機(jī)制？

◆阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控：受其上游調(diào)控蛋白R基因的調(diào)控,。R并沒有與O結(jié)合的活性,，只有當(dāng)環(huán)境能提供足夠濃度的色氨酸時，R與色氨酸結(jié)合后而活化,，能夠與O結(jié)合,，阻遏結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。           

◆弱化子及其作用：當(dāng)色氨酸達(dá)到一定濃度,，但還沒有高到能夠活化R使其起阻遏作用的程度時,，產(chǎn)生色氨酸合成酶類的量已經(jīng)明顯降低，而且產(chǎn)生的酶量與色氨酸濃度呈負(fù)相關(guān),。這種調(diào)控現(xiàn)象與色氨酸操縱子特殊的結(jié)構(gòu)有關(guān),。  

5．雙脫氧末端終止法Sanger法測定DNA一級結(jié)構(gòu)的原理與方法？                    

◆原理：采用核苷酸鏈終止劑,，雙脫氧核苷酸ddNTP終止DNA鏈的延長,。                

可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。                            

◆方法：分成4組,，每組中加入4種dNTP和一種相應(yīng)的ddNTP,。                    

?反應(yīng)后可得到不同長度的以雙脫氧結(jié)尾的DNA片段，各DNA片段均只相差一個核苷酸長度,。

?各組的片段經(jīng)凝膠電泳分離后,，每一片段的電泳位置不同，從下而上可直接讀出DNA序列,。 

《分子生物學(xué)》期末試卷（B）

一,、基本概念（共 20  分，每小題 2  分）

1．DNA分子的多樣性：堿基的排列順序,，而構(gòu)成了DNA分子的多樣性100bp DNA分子可能排列方式就是4¹⁰⁰ ,，DNA中的堿基排列順序是DNA分子的重要屬性。

2．回文序列：其中每條單鏈以5^／－3^／方向都是相同的,，易形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)或十字形結(jié)構(gòu),，限制性酶切位點。

3．錯義突變：一個核苷酸的變化,，使一種氨基酸的密碼變成另一種氨基酸的密碼,，合成無功能的多肽。

4．小胞漿RNA(scRNA)：長約300個核苷酸,，主要存在于細(xì)胞漿中,，是蛋白質(zhì)定位合成于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上所需的信號識別體組成成分。

5．上游啟動子元件：包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等,，包括增強(qiáng)子,。

6．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域,，稱之為模體。  

7．信號假設(shè)：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個氨基酸殘基的肽段---信號肽,，他能引導(dǎo)蛋白質(zhì)的肽鏈到達(dá)并通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。

8．細(xì)菌的應(yīng)急反應(yīng)：空載tRNA會激活焦磷酸轉(zhuǎn)移酶，使ppGpp大量合成,，ppGpp的出現(xiàn)會關(guān)閉許多基因,，以稱他們是超級調(diào)控子或稱為魔斑。

9．順式作用元件：主要是起正性調(diào)控作用的元件,，包括啟動子,、增強(qiáng)子；近年又發(fā)現(xiàn)起負(fù)性調(diào)控作用的元件沉寂子,。

二、填 空（共 30 分,，每小題 1 分）

1.基因突變一般可分為：（點突變）,，（堿基的插入突變），（堿基丟失突變）,。

2.基因突變可能造成的后果（可能使生物更有利適應(yīng)環(huán)境,，引起生物進(jìn)化），（導(dǎo)致生物體的死亡）,，（引起結(jié)構(gòu),、形態(tài)和功能的異常，產(chǎn)生疾病）,，（不發(fā)生任何變化和影響）,。

3.蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)折疊單位，常見的三種類型是（αα）,、（ββ）,、（βαβ）。

4.真核生物起始tRNA是（甲硫氨酸Met-tRNA^met）,，原核生物起始tRNA是（甲酰甲硫氨酸fmet-tRNA^fMet）,。

5.限制性內(nèi)切酶的特點（識別位點嚴(yán)格專一），（識別序列的堿基數(shù)一般為4,、6,、8個bp），（識別位點經(jīng)常是一種回文序列的DNA）,。

6.限制性內(nèi)切酶的切割方式（在對稱軸5' 側(cè)切割產(chǎn)生5' 粘端）,，（在對稱軸3' 側(cè)切割產(chǎn)生3' 粘端），（在對稱軸處切割產(chǎn)生平段）,。

7.質(zhì)粒DNA的三種構(gòu)型分別是（ SC構(gòu)型）,、（ oc構(gòu)型）,、（ L構(gòu)型），各構(gòu)型在凝膠電泳中從前到后的順序是（SC   L  oc）,。

8.gal操縱子具有兩個啟動子,，雙啟動子的生理功能是因為半乳糖對細(xì)菌有雙重作用，（一方面可以作為碳源供細(xì)胞生長）,；（另一方面它又是細(xì)胞壁的成分）,。

9.與DNA結(jié)合常見的蛋白質(zhì)功能域有（ 螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋）,、（ 螺旋-環(huán)-螺旋）,、（ 鋅指）、（堿性-亮氨酸拉鏈）,。

10.不同細(xì)胞類型中總有一組經(jīng)常保持表達(dá)狀態(tài)的基因稱為（持家基因）,；只有在發(fā)育一定時期才能表達(dá)的一些特異性基因稱為（時空基因）。

三,、選擇題（共 30  分,，每小題  2  分）

1．DNA左手雙螺旋構(gòu)象的表示是(  C  )

    A、 A－DNA,、  B,、 B-DNA     C、 Z－DNA      D,、 H-DNA

2．下列關(guān)于DNA復(fù)制的敘述中,，錯誤的是（ B ）

A. 以半保留復(fù)制方式進(jìn)行    B. DNA聚合酶延模板的5’向3’方向移動

C. 以4種dNTP為原料       D. 合成方向5’向3’

3．簡單轉(zhuǎn)錄單位編碼產(chǎn)生一個多肽，轉(zhuǎn)錄后加工有3種形式,，基因沒有內(nèi)含子,，轉(zhuǎn)錄后無需加工，也沒poly（A）下列那種基因?qū)儆谶@種類型（ B ）

A.α-干擾素基因     B.組蛋白基因  C. Ig基因   D. 多數(shù)基因

4．DNA復(fù)制時,，子鏈的合成是（ A ）

A. 兩條鏈均為5’向3’                   B. 兩條鏈均為3’向5’

C. 一條鏈5’向3’. 另一條鏈3’向5’    D. 兩條鏈均連續(xù)合成

5．以下關(guān)于端粒及端粒酶的敘述錯誤的是（ A ）

A. 端粒由RNA與蛋白質(zhì)組成       B. 端粒酶由RNA與蛋白質(zhì)組成

C. 端粒酶有逆轉(zhuǎn)錄酶的活性        D. 端粒的長度在細(xì)胞分裂后會發(fā)生變化

6．原核生物中,，識別并結(jié)合啟動子的是（  D  ）

A. r因子        B. a亞基         C. b亞基      D. s因子

7．參與原核生物轉(zhuǎn)錄延長的酶是（  B  ）

A. 引物酶              B. RNA聚合酶核心酶 

C. RNA聚合酶全酶       D. RNA聚合酶II

8．真核生物中，mRNA由下面哪種酶轉(zhuǎn)錄（  B  ）

A. RNA聚合酶I     B. RNA聚合酶II    C. RNA聚合酶III    D. RNA酶

9．下面參與RNA剪接的RNA是（ B ）

A. HnRNA    B. snRNA    C. 5SRNA    D. tRNA

10．與tRNA上反密碼子5’UAG 3’配對的密碼子是（ C ）

A. 5'AUC 3'   B. 5'UAG 3'   C. 5'CUA 3'  D. 5'GAU 3'

11．關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶,，以下描述哪個是錯誤的（ C  ）

A. 酶的識別序列長度一般為4-6bp　    B. 切割位點不一定是交錯的　

C. 只能識別和切割原核生物的DNA      D. 只能切割含有識別序列的雙鏈DNA　

12．在乳糖操縱子中,，阻遏蛋白結(jié)合的是（ A ）

A. 操縱基因   B. 調(diào)節(jié)基因   C. 啟動基因   D. 結(jié)構(gòu)基因

13．下面哪個元件在色氨酸操縱子的調(diào)控中發(fā)揮作用（  C  ）

A. 增強(qiáng)子     B. 轉(zhuǎn)錄子     C. 弱化子/衰減子   D. 順反子

14．分子伴侶是（ B ）

A. 無機(jī)分子    B. 一類蛋白質(zhì)  C. 一類核酸      D. 其他有機(jī)分子

15．植物基因工程轉(zhuǎn)入下列那種基因能夠起到抗病毒作用（ B ）

A. 殺菌肽      B. 外殼蛋白基因 C. 蛋白酶抑制劑基因  D. T-DNA

四、簡答題（共20 分,，每小題 4 分）

1．真核基因組結(jié)構(gòu)特征,？

◆含有大量的重復(fù)序列；                         

◆在脊椎動物中90%左右是非編碼序列,；           

◆編碼序列被非功能DNA所隔開成割裂基因        

◆編碼的內(nèi)含子則存在廣泛的序列變異,，說明內(nèi)含子中的大部分序列是無功能的。   

2．基因移動的方式及其遺傳學(xué)效應(yīng),？

◆插入序列（insertion sequence,，IS）,，轉(zhuǎn)座子（Transposon,Tn）。

◆引起插入突變,，可導(dǎo)致基因表達(dá)失活,。                    

◆產(chǎn)生新的基因。                                         

◆產(chǎn)生的染色體畸變,，引起生物的進(jìn)化,，產(chǎn)生新的功能基因。  

3．cDNA文庫的構(gòu)建,？

◆分離提取細(xì)胞總RNA,；                            

◆利用mRNApoly(A)與其他RNA分開；               

◆以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,；                 

◆所得到的為cDNA,，克隆進(jìn)載體即構(gòu)成cDNA文庫。  

4．天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建對質(zhì)粒主要進(jìn)行哪些方面的改造,？

◆加入合適的選擇標(biāo)記基因,，通常是抗生素基因。             

◆增加或減少合適的酶切位點,，便于重組,。                  

◆縮短長度，切去不必要的片段,，增加裝載量,。              

◆改變復(fù)制子，由嚴(yán)緊變?yōu)樗沙谛?，以增加拷貝?shù),。加裝特殊的基因元件。