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光合菌菌種 - 光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方

 萬寶路 2009-07-20
1 光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方
    光合細(xì)菌是兼性厭氧的,不同的光合細(xì)菌用的培養(yǎng)基不一樣我現(xiàn)在就在做關(guān)于光合細(xì)菌的問題,,這幾中細(xì)菌都是常見的細(xì)菌,,培養(yǎng)基在許多微生物上后面都有,光合細(xì)菌的富集培養(yǎng)基是:

 

NH4Cl0.1g   NaHCO3 0.1g    KH2PO4 0.02g        CH3COONa 0.1-0.5g    MgSO4.7HO2 0.02g

NaCl0.05-0.2g 三生長因子1ml 微量元素溶液1ml 蒸餾水97ml PH7.0

生長培養(yǎng)基加氮源(谷氨酸鈉)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸鹽等)及可.其他菌的分離只要選擇不同的培養(yǎng)基就可以選擇分離啊

光合細(xì)菌富集純化詳見網(wǎng)易網(wǎng)盤

光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方

氯化氨1克,,磷酸氫二鉀0.5克,,氯化鎂0.2克,氯化鈉2克,,酵母膏0.1克,,水900毫升。
各成份溶解后15磅滅菌20分鐘,,然后無菌的加入過濾的碳酸氫鈉5.0克/50毫升水,;50毫升過濾的乙醇。用過濾的0.1N磷酸調(diào)PH=7.0即可,。

響應(yīng)面設(shè)計(jì)法優(yōu)化光合細(xì)菌培養(yǎng)基配方,。培養(yǎng)基成分中醋酸鈉和蛋白胨對(duì)于光合細(xì)菌的生長影響最為顯著,最優(yōu)培養(yǎng)基配方為:醋酸鈉1.145g/L,、蛋白胨0.055g/L,、碳酸氫鈉0.6g/L、硫代硫酸鈉0.4g/L,、氯化鈉0.3g/L,、硫酸鎂0.1g/L、磷酸二氫鉀0.05g/L,。在此條件下,,光合細(xì)菌生長最為良好,經(jīng)過5d培養(yǎng)以后,,培養(yǎng)液OD600可以達(dá)到0.5以上

光合細(xì)菌(含生產(chǎn)工藝)

優(yōu)良的光合細(xì)菌菌種的外觀質(zhì)量是啥樣,?


   一般優(yōu)良的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品的外觀質(zhì)量有以下幾點(diǎn):

1、外觀上看比較均勻,,基本無上下分層,。      相反,市場上有許多光合細(xì)菌是上下分層的,,包括我中心初期的產(chǎn)品也是這樣,,上層比較清淡,下層則比較深厚,,上層顏色淺,,下層顏色深,最底層可能還會(huì)有一層黑黑的沉淀,。
   而優(yōu)秀的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品,,上下都是比較均勻的,沒有較明顯的分層,,顏色比較均勻,,外觀看起來也悅目。(當(dāng)然,除了培養(yǎng)基溶解時(shí),,會(huì)與硬水中的重金屬離子反應(yīng)產(chǎn)生的絮裝沉淀除外)
   這種上下無分層,顏色均勻,,不是靠加懸浮劑,,或增稠劑而造成的,而是自然培養(yǎng)出來的,,不加任何修飾而成的。少數(shù)地方,由于水質(zhì)的原因,,可能會(huì)產(chǎn)生稍稍的差別,。
2、沒有粘壁現(xiàn)象,。    很多市場上的產(chǎn)品都有粘壁現(xiàn)象,,即在容器的壁上形成一層紅紫色的顏色層,就象是油漆一樣,,洗不掉,,抹不去。這主要是在培養(yǎng)過程中形成的,,也有在保存過程中形成的,。
   優(yōu)秀的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品,應(yīng)該是沒有一絲一毫的粘壁現(xiàn)象,。所以外觀上看起來質(zhì)量也更好,。
3、顏色的深度比較深,。    根據(jù)國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),,可以用721分光光度計(jì),測量A660nm處的吸光值,,如果大于1.5,,則說明,濃度一般都在30億/毫升以上,,好的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品都在1.5以上,。
4、顏色鮮艷無雜色,。    優(yōu)秀的菌種和產(chǎn)品,,不僅顏色深,而且,,比較鮮艷,,沒有雜色,比如是大紅色,血紅色,,或是深紫色,,看起來是很悅目的,沒有不良的雜色,,或是暗暗的顏色,。
5、保存期限長,。    可以保存夏天3月以上,,冬天6月以上。在期限內(nèi)外觀基本無變化,。保持80%以上的活力,。
6、培養(yǎng)周期短,,接種量少,。    好的菌種,接種量在10--20%即可,,我中心推崇20%接種量,,培養(yǎng)條件好的,可只用10%接種量,,都可以在3--5天內(nèi)培養(yǎng)好(條件是用白熾燈培養(yǎng),, 溫度在30--37度),或在7天培養(yǎng)好(條件是用太陽光照培養(yǎng),,陽光充足時(shí),,僅是白天照射培養(yǎng),液體溫度在30--38度,,晚上不培養(yǎng)),。
   而市場上很多菌種要50%以上接種量,當(dāng)然,,在有條件情況下,,用大接種量是有好處的,在有條件的情況下,,我中心也推薦您用30%的接種量,,能更穩(wěn)妥,更快地培養(yǎng)成功,。
7,、基本不存在雜菌污染      在保證清潔培養(yǎng)的情況下,一般不存在雜菌污染的情況,,當(dāng)然,,這也與培養(yǎng)基配方技術(shù)有一定關(guān)系,。


8、可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去,。      不僅可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去,,而且,性能不變,,質(zhì)量不減,。當(dāng)然,這也與培養(yǎng)基配方技術(shù)有一定關(guān)系,。

小規(guī)模光合細(xì)菌燈光培養(yǎng)中用60--100瓦白熾燈較好

     在實(shí)驗(yàn)室用紙箱法培養(yǎng)光合細(xì)菌時(shí),要用到白熾燈(注意,,不能用日光燈,,日光燈的光波不適合培養(yǎng)光合細(xì)菌,所以日光燈是沒有用的),,以前做的試驗(yàn)由于是用 500*500*350mm的小紙箱,,所以有40瓦的白熾燈就可以維持箱內(nèi)溫度在35℃左右,甚至到40℃,,用40瓦的白熾燈培養(yǎng),,一般需要5天以上才能 長得非常深紅色。

   后來用到了700*700mm的大紙箱,,我們才改用60瓦的白熾燈,,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的時(shí)間可以大大縮短了,而且進(jìn)入冬季后,,紙箱中的溫度只能維持到25℃,,我們 發(fā)現(xiàn),即使是在25℃的箱內(nèi)溫度下,,也只要培養(yǎng)4天左右就長得非常深紅色了,,所以我們分析,可能是60瓦以上的白熾燈的光波更加適合于光合細(xì)菌的生長繁 殖,,所以我們建議各位用戶,,改用60瓦的白熾燈,可以大大提高培養(yǎng)的成功率,,和大大縮短培養(yǎng)的時(shí)間,。

   如果是夏天,若用60瓦的白熾燈太熱,,可以在紙箱上戮大量孔洞,,用于散熱,維持箱內(nèi)溫度在35度左右,。


光合細(xì)菌發(fā)生劑的用法(即光合細(xì)菌的生產(chǎn)工藝)
一,、光合細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)條件        用“光合細(xì)菌發(fā)生劑”生產(chǎn)的終端產(chǎn)品:光合細(xì)菌液,,PSB細(xì)胞濃度達(dá)到30--100億/毫升,生產(chǎn)成本只要0.30元/公斤,,而使 用價(jià)值可達(dá)到2元/公斤,,投入產(chǎn)出比達(dá)到1:6--12以上。做成的液體產(chǎn)品,,密封保存在通氣干燥處,,可保質(zhì)達(dá)1年以上。
  二,、光合細(xì)菌生長所需環(huán)境條件        有了營養(yǎng)全面的“光合細(xì)菌發(fā)生劑”,,還必須有一個(gè)良好的培養(yǎng)環(huán)境條件,才能生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品出來,。PSB所需的環(huán)境條件有以下幾個(gè):
1:培養(yǎng)介質(zhì),,含雜菌較少的清潔淡水。地下水,、河水,、海水等,硬度低的水更好(如河水),,選取水源時(shí),,最好先做幾種水源的對(duì)比試驗(yàn),使用哪里的水源在培養(yǎng)試驗(yàn)中最先變成紅色(生長良好),,就選用哪里的水作為生產(chǎn)用水,。自來水取自河水,硬度低,,雜菌少,,只要菌種能耐漂白粉殺菌劑,用自來水比其它水反而更好更快,。您不妨做一次自來水的試驗(yàn),。 2:酸堿度,PH值在8~8.5為最好,,光合細(xì)菌的適應(yīng)PH范圍在6~10之間,。  
3:溫度,以28~36℃為最適生長溫度,,其適應(yīng)的生長溫度范圍為15~41℃,。  
4:光照強(qiáng)度,以3000~4000勒克斯(LX)為最佳,,即每25公斤菌液需要用相當(dāng)于60瓦左右的白熾燈作光源,,而太陽光照為最好且不要成本。宜春專利中心提供光合細(xì)菌發(fā)生劑,。 三,、光合細(xì)菌成品的生產(chǎn)  
1,、培養(yǎng)液的配制        將購得的我中心的光合細(xì)菌發(fā)生劑取一公斤,放入一個(gè)干凈的容器中,,加入100公斤水,,攪拌均勻,直到發(fā)生劑(培養(yǎng)基)溶化為止,。若容器不夠大,,則可以少配一點(diǎn)。  
注意事項(xiàng):水源一定要選擇好,,含菌量較低的清潔淡水,、海水或加粗食鹽的淡水。從經(jīng)濟(jì),、實(shí)用的角度考慮,,地下水(井水)含菌量低,為最佳水源,,另外,若當(dāng)?shù)?自來水含氯較低,,也可用,,效果很好;清潔的地表水也可使用,;含氯量較高的自來水應(yīng)敞口放置兩三天或調(diào)PH值至偏堿后使用,;蒸餾水及純凈水固然很好,但成本 太高,,可用于提純菌種,。  
選擇容器:少量生產(chǎn)可用透明度較高的白色或透明塑料桶、玻璃容器,。大量生產(chǎn)可用水泥池,、水泥船,也可臨時(shí)開挖土池,,墊上雙層塑料膜防漏防渾濁,,培養(yǎng)液的深度為30公分最佳。
2,、培養(yǎng)方式有以下三種:
(1)做小試驗(yàn)培養(yǎng)的方法
容器為:1.25升的飲料瓶,,即小規(guī)模生產(chǎn)方法,由于飲料瓶的量小,,瓶子透明度好,,又密封,所以培養(yǎng)環(huán)境好,,需要的接種量也少,, 比較簡單,。
設(shè)備為:光照箱,用一個(gè)大的紙箱,,放一個(gè)40瓦的白熾燈懸掛在箱子的空中(注意防火),,紙箱內(nèi)壁四周,堆放著已裝好了培養(yǎng)液并 接了種的飲料瓶,,這樣,,既達(dá)到了保溫到25—40度的效果,又達(dá)到了光照的效果,。 較大的箱子要用60瓦的白熾燈,,一般一個(gè)箱子,可 放這種飲料瓶8個(gè)以上,,即一次可生產(chǎn)約10公斤/箱,。 燈泡與瓶子的距離不超過20厘米。夏天,,可撤去紙箱,,以防溫度過高,春秋秋 天,,也要在紙箱四周鉆孔以散熱,。
操作規(guī)程如下:
配料:培養(yǎng)液為1%濃度的發(fā)生劑溶液,接種量為20%,,注意水源必須一干凈衛(wèi)生,,最好用地下水,自來水可以試用一下,, 第一次做試驗(yàn)時(shí),,要多選擇幾種水源同時(shí)做,以確定哪種水源最好,,最先轉(zhuǎn)成紅色的水源最好,,可確定為今后的生產(chǎn)用水。
培養(yǎng):在箱子內(nèi),,打開白熾燈,,照幾天即可,一般可達(dá)到溫度在35度,,控制在30--40度之內(nèi),,所以要密切注意溫度不要過高,第一次培養(yǎng)可能需要5天以上,,一定要注意,,每天要搖晃兩次,這很重要,,菌種適應(yīng)了貴地的水源后,,一般只需要2天即可長成深紅色,。
培養(yǎng)成熟標(biāo)準(zhǔn):以培養(yǎng)液長成深紅色為準(zhǔn),這時(shí)一般成品的光合細(xì)菌濃度可達(dá)到30--100億/毫升,。 (2)用塑料桶進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)   或用培養(yǎng)蝦苗用的塑料袋來做效果更好,。一袋20公斤的樣子。
例如容器選用25公斤裝的大塑料桶,,由于條件不如做小試驗(yàn)的培養(yǎng)方法好,,所以接種量要達(dá)到至少20%以上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培養(yǎng)液(即1%的培養(yǎng)基溶液),,再加入2.5公斤的菌種液,,搖勻。
①利用太陽能培養(yǎng): 把上述塑料桶放到太陽底下曬即可,,只要注意:夏季氣溫過高,,若用太陽作為光照能源,則應(yīng)采取部分遮陽(用黑色的遮陽塑料網(wǎng)),,通風(fēng)的降溫措施,,以防光合細(xì) 菌快速老化死亡;冬天則氣溫低,,則要采取搭建一個(gè)塑料暖棚增溫的方法,,把塑料桶放入暖棚內(nèi)曬太陽即可;春秋季則可直接放在太陽底下不用管即可,。總之要使之 溫度在25度--36度之間最好,。過些日子它自然會(huì)長成深紅色的成品,。經(jīng)方法即是懶漢培養(yǎng)工藝法, ②利用白熾燈作為光能生產(chǎn):在一個(gè)容器內(nèi)懸掛一個(gè)白熾燈,,容器內(nèi)裝的培養(yǎng)液深度不得大于30公分,,燈泡與液面距離不得大于20公分。  
(3)用塑料膜做的池子來大規(guī)模生產(chǎn)
    您還可以這樣利用太陽能大規(guī)模培養(yǎng)(以培養(yǎng)2噸菌液為例):
選擇陽光充足的地方,,開挖一土池(長5米,、寬1.8米、深0.4米),,有現(xiàn)成的水泥池更好,。墊上塑料薄膜,然后再鋪上桶狀塑料薄膜,,并將其一端密封,,從 另一端加入1.8噸配制好的培養(yǎng)液,和0.2噸的菌種,,一共2噸,,排盡薄膜中空氣后,,再將該端密封。保持適當(dāng)?shù)臏囟?,冬天如果溫度過低,,搭建透明塑料薄膜 棚增溫。這樣,,幾天后,,菌液培養(yǎng)成熟。長成深紅色,。
    也可以在室外挖一個(gè)土坑,,深40厘米,墊上 一層塑料薄膜,,再倒入培養(yǎng)液,,液面上再蓋一層塑料薄膜,以免與大量空氣接觸,,造成污染雜菌,,再用太陽照射培養(yǎng)成熟,天氣冷就搭塑料棚升溫,。 當(dāng)然這一套裝置也可放于室內(nèi),,用每半平方料一個(gè)60瓦白熾燈照射,燈與液面距離小于25厘米,,溫度不夠,,也要搭一個(gè)室內(nèi)塑料棚,棚內(nèi)放一爐火即可保溫到 30度以上,。  
四,、光合細(xì)菌固態(tài)產(chǎn)品的生產(chǎn)         將高濃度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后,陰干或風(fēng)干粉碎即得粉狀固體PSB產(chǎn)品,??砂b出廠,便于運(yùn)輸和售賣,。也更象一個(gè)產(chǎn)品了,。一般售價(jià)可達(dá)到2元/公斤以上,光合細(xì)菌︰沸石粉=1︰3~4,。也可用其它載體來做 干燥吸附劑,,如草炭、硅藻土等,。

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