TME 是指腫瘤細胞存在的周圍微環(huán)境,，包括周圍的血管,、免疫細胞、成纖維細胞,、骨髓源性炎性細胞,、各種信號分子和細胞外基質,。腫瘤微環(huán)境是腫瘤細胞賴以生存和發(fā)展的復雜環(huán)境，而這微環(huán)境內的免疫細胞及其調節(jié)方式對腫瘤的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用,。

這些年隨著技術的不斷發(fā)展,，尤其是單細胞空間蛋白組學的發(fā)展，使研究人員得以從不同維度深刻揭示 TME 景觀,。

2022 年 11 月 9 日,，北京大學第一醫(yī)院腫瘤轉化研究中心張寧團隊與北京大學生物醫(yī)學前沿創(chuàng)新中心（BIOPIC）張澤民團隊、北京大學人民醫(yī)院肝膽外科朱繼業(yè)團隊合作,，在 Nature 發(fā)表了題為「Liver tumour immune microenvironment subtypes and neutrophil heterogeneity」的研究論文^[1],。

該研究首次在單細胞精度定義了肝癌的五種免疫微環(huán)境亞型，首次全面揭示腫瘤相關中性粒細胞（TAN）的異質性,，發(fā)現(xiàn)并驗證 CCL4+,、PD-L1+TAN 兩個關鍵亞群的促腫瘤機制，最終通過構建小鼠肝癌模型,，逐步深入地證明靶向腫瘤相關中性粒細胞有望形成新的肝癌免疫治療方案，這些成功為肝癌的基礎研究和臨床診療提供了關鍵信息,。

在 5 種亞型的免疫排斥型中,，細胞毒性 T 細胞（GZMK+CD8+T 細胞）也在該種模型中富集。使用多重免疫組化（mIHC）觀察到 GZMK+CD8+T 細胞主要位于基質中,，但被排除在腫瘤區(qū)域之外,，這表明這些被免疫排斥的 T 細胞實際上具有細胞毒性，而不是耗竭,。

mIHC 揭示了 PD-L1+ 中性粒細胞和 PD1+CD8+T 細胞的物理接近性，支持它們的直接相互作用,。這些結果共同證明 PD-L1+TAN 抑制原發(fā)性肝癌中的細胞毒性 CD8+T 細胞,。

2022 年 9 月 23 日，柳葉刀子刊 eBioMedicine 刊登了關于食管鱗癌腫瘤微環(huán)境的最近進展,，該項研究是由國家癌癥中心/中國醫(yī)學科學院腫瘤醫(yī)院赫捷院士和高樹庚教授組聯(lián)合發(fā)表^[2],。

研究團隊在 TME 內鑒定了 7 個基質細胞的亞群，并在癌和基質區(qū)繪制了不同的亞群結構,。分別用多重免疫組化（mIHC）技術進行驗證,。

這項研究揭示了 TME 內各種細胞亞群的空間分布以及不同細胞之間的潛在串擾,，為癌癥干預提供新的見解,。

兩篇文章都使用多重免疫組化（mIHC）技術對不同腫瘤的微環(huán)境中不同的細胞亞型進行了分析研究。mIHC 基于 TSA（酪胺信號放大技術）染色原理,，解除抗體種屬限制,，在一張樣本上同時放大標記多種生物標志物，對不同類型的細胞進行定量統(tǒng)計,，并在空間原位中刻畫整個腫瘤免疫微環(huán)境,。

相比于流式細胞術、單細胞 RNA-seq 或是免疫組化 IHC,，mIHC 具備明顯的優(yōu)勢：mIHC 從三個維度（定性,、定量、定位）定義和刻畫 TME,！

mIHC 作為近幾年發(fā)展起來的一項新的病理染色技術，在腫瘤空間表型特征方面具有獨特的優(yōu)勢,，可作為發(fā)現(xiàn)新一代生物標志物的利器,，是進行腫瘤免疫微環(huán)境驗證的不二選擇。