2022年伊始,，中國科學院院士卞修武教授在《中華病理學雜志》上,，首次提出了“下一代診斷病理學（next-generation diagnostic pathology）”概念，并進行了詳細闡述,。

下一代診斷病理學以病理形態(tài)和臨床信息為診斷基礎,，以分子檢測與生物信息分析、智慧制樣與流程質控,、智能診斷與遠程會診,、病灶活體可視化與“無創(chuàng)”病理診斷等創(chuàng)新前沿交叉技術為主要特征，以多組學和跨尺度整合診斷為病理報告內容,，實現對疾病的“最后診斷”,，并預測疾病演進和結局、建議治療方案和評估治療反應,，形成新的疾病診斷“金標準”,。

具體到腫瘤診療領域，下一代診斷病理學已經從定性診斷（判斷病變良惡性）,、組織學分型,，向預測性診斷（演變傾向,、預后判斷）和分子分型（基因和蛋白質異常）發(fā)展，推動病理診斷更高效,、精準,。

事實上，下一代診斷病理學在腫瘤領域并非新事物,，自2015年“精準醫(yī)療”理念提出后就開始隨著基因組學時代萌芽并迅速發(fā)展,，誕生了大批腫瘤NGS企業(yè),。

如今,，隨著多組學研究和腫瘤免疫微環(huán)境（TME）研究的臨床價值深入人心，腫瘤精準診斷正在從NGS向以多重熒光免疫組化（mIHC）技術為代表的下一代病理（NGP）技術發(fā)展,。

具有前瞻性目光的企業(yè),，已經在推動下一代診斷病理學的進一步成熟和臨床轉化應用。闊然基因是下一代病理技術的倡導者,，正在著力打通多重熒光免疫組化技術上中下游產業(yè)鏈,，以多重熒光免疫組化技術為核心，推出了腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案,。

腫瘤診療思路大致經歷了三個階段，首先是手術切除,、放療化療為代表的傳統(tǒng)治療方法,；其次是靶向治療興起，NGS技術應運而生,；之后是免疫治療在部分腫瘤上取得重大突破,，京都大學教授本庶佑和德州大學奧斯丁分校的James P. Allison因“發(fā)現抑制負面免疫調節(jié)的癌癥療法”共同獲得2018年的諾貝爾醫(yī)學或生理學獎。分析腫瘤微環(huán)境的多重熒光免疫組化技術吸引了全世界的目光,。

現階段腫瘤診斷病理的重點正在快速從靶向治療轉移到腫瘤免疫微環(huán)境研究,。

科學界對腫瘤發(fā)生、發(fā)展的認識日益加深,，臨床進行腫瘤診療的思路已經從單純關注腫瘤細胞本身,，升級為關注腫瘤和周圍組織的互動關系，認為“腫瘤的發(fā)生發(fā)展是腫瘤細胞與其微環(huán)境相互影響,、共同進化的結果”,，腫瘤免疫微環(huán)境研究成為提升腫瘤診療水平的希望之光。

隨著腫瘤免疫微環(huán)境研究成為腫瘤精準診療基礎,，既往的病理診斷技術均暴露出一定的局限性,，無法適應下一代診斷病理學的需求。

例如,，免疫熒光僅能標記2-3個指標,，難以準確刻畫復雜的腫瘤微環(huán)境的真實特征,；免疫組化可通過連續(xù)切片進行多指標標記，但無法準確分析各個蛋白,、細胞間的相關性,，只能進行定性判讀且存在人為主觀性；流式細胞術和基因檢測可以獲得大量細胞和基因層面的信息,，但缺失了所得信息的原位空間位置關系,。

換言之，腫瘤免疫微環(huán)境研究驅動腫瘤診療邁向下一代病理,，對現有的病理診斷技術進行升級迭代勢在必行,。“多重熒光免疫組化技術正是為了解決傳統(tǒng)技術在研究腫瘤免疫微環(huán)境中的弊端而生的一項技術,。”闊然基因告訴動脈網,。

多重熒光免疫組化技術是近幾年全球熱點技術，在腫瘤治療,、神經科學,、干細胞研究、器官移植等多個領域都有重要的研究成果報道,，為多種疾病精準診療指明了新方向,。

2021年，在Akoya Biosciences的《空間表型特征：表征實體腫瘤和預測免疫治療反應的新型生物標志物》白皮書中,，多重熒光免疫組化技術被稱為“下一代病理技術”,。

在腫瘤領域，多重熒光免疫組化技術可以進行腫瘤免疫微環(huán)境全景分析,，在一張組織切片上對7-9個生物標志物進行標記,，定量評估細胞的表型和活性，全景刻畫腫瘤免疫微環(huán)境以及細胞間的原位空間信息,。

已有研究結果表明,，多重熒光免疫組化技術可大幅提高檢測靈敏度，檢測低豐度樣品,，實現對患者腫瘤免疫分型全面,、客觀地分析，基于多重熒光免疫組化技術的腫瘤微環(huán)境檢測,，能夠更深入地了解腫瘤的發(fā)生機制,，更有可能預測腫瘤對治療的反應，精準篩查免疫治療獲益人群,。

2018年諾貝爾生理學獎得主,、免疫學家James P Alison素來推崇多重熒光免疫組化技術在腫瘤免疫微環(huán)境研究中的應用，在乳腺癌,、黑色素瘤,、胰腺癌等領域都發(fā)表了重磅成果,。

不過目前，即使是在腫瘤診療研究高度發(fā)達的海外,，多重熒光免疫組化技術也尚未應用于臨床,，有臨床試驗、前瞻性研究在進行中,，正處于臨床應用關鍵節(jié)點,。國內，在NGS研究如火如荼的情況下,，2020年闊然基因率先在國內開展多重熒光免疫組化技術的臨床轉化研究,。總的來看，在多重熒光免疫組化技術研究上,，國內外差距并不大,，機會已經涌現,。

目前，闊然基因已經布局了整套多重熒光免疫組化技術平臺,，包括多標記染色,、多光譜成像系統(tǒng)和圖像分析系統(tǒng)，并開發(fā)了7款檢測產品,。

闊然基因多重熒光免疫組化技術平臺三大突破

其中,，Opal?多標記染色技術突破了抗體物種來源沖突的限制，可在石蠟切片上同時標記多重生物標記物,，節(jié)約稀有樣品用量,，同時由于熒光信號強度高且穩(wěn)定不易淬滅，將檢測靈敏度提升1000倍,。

Vectra^?多光譜成像系統(tǒng)擁有高精度光譜重疊拆分技術,，可以精準掃描并記錄一張石蠟切片上的所有信息，實現超高速批量分析,，提高了圖像的信噪比,、檢測精度和效率。

InForm?圖像分析系統(tǒng)能夠智能識別組織和細胞類型,，精準定量評價組織形態(tài)學,，通過深入的數據挖掘，進行相關性分析,、多靶點共表達陽性率分析,、細胞密度分析、空間距離分析,、空間浸潤性分析,、組間差異性分析等,。

依托多重熒光免疫組化技術平臺，闊然基因推出了腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案,，全景剖析腫瘤免疫微環(huán)境中的殺傷性T細胞,、耗竭性T細胞、巨噬細胞,、B細胞,、NK細胞、細胞因子和免疫檢查點受體的浸潤情況,，全面評估患者的預后和接受免疫抑制劑治療的療效,，挖掘腫瘤免疫微環(huán)境與腫瘤發(fā)生發(fā)展、復發(fā),、轉移和耐藥機制的關系和臨床分子機理,。

臨床試驗表明，在評估PD-L1蛋白表達水平方面,，闊然基因的腫瘤免疫微環(huán)境全景分析解決方案與PD-L1 (22C3,28-8 SP142,SP263 ) IHC“金標準”具有較好的一致性,，并能從腫瘤免疫微環(huán)境角度輔助醫(yī)生制定更精準的用藥和治療方案。

雖說國內已有企業(yè)引進多重熒光免疫組化技術,，提供下游科研服務和藥企服務,。但闊然基因認為，中國企業(yè)在多重熒光免疫組化技術上的關鍵競爭要素在于打通上下游產業(yè)鏈,，促進技術合規(guī)化,。

在產業(yè)鏈上游，闊然基因正在推動儀器,、軟件,，以及抗體熒光染料等關鍵原料的注冊申報工作，在降低多重熒光免疫組化技術成本的同時提高企業(yè)技術壁壘,；中游,，闊然基因聯合中國頭部病理中心、科研機構,，形成產業(yè)聯盟,；下游，公司提供科研服務,、藥企服務和臨床診斷服務,。

在合規(guī)化上，闊然基因將一面以LDT形式提供服務,，一面在積極推動多重熒光免疫組化技術取得NMPA批準,，未來會以IVD產品的形式在市場上進行推廣。

下一代病理診斷學背景下,，多個前沿技術交叉,、多學科融合是重要特點。如果說NGS是下一代腫瘤病理的第一階段,，多重熒光免疫組化技術可以看作是第二階段,，推動腫瘤病理更精準、高效,，契合腫瘤診療從腫瘤細胞本身向微環(huán)境轉變的趨勢,。

“未來，多重熒光免疫組化技術將與NGS等技術形成優(yōu)勢互補,，共同推動腫瘤病理診斷圍繞更全面,、更精準、更高效率幾個關鍵詞,，不斷向前演進,。”

闊然基因專注于精準醫(yī)學轉化研究與應用,，致力于提供多應用場景的一站式分子診斷解決方案,。公司正著眼于下一代診斷病理學，圍繞腫瘤發(fā)生發(fā)展的整個過程,，從基因,、蛋白到代謝，布局了NGS,、多重熒光免疫組化技術、質譜技術等,，助力解決困擾多年的腫瘤精準診療老大難問題,。

闊然基因憑借“服務+產品”雙重模式開展腫瘤分子診斷、腫瘤免疫微環(huán)境檢測等業(yè)務,，首創(chuàng)NGP（下一代病理）+NGS（下一代測序）的臨床新應用服務,，目前擁有6款IVD產品注冊申報儲備，服務中國500余家醫(yī)院和科研機構,，建立了龐大的基因組數據庫,。

接下來，多組學,、多技術整合診斷會快速被臨床醫(yī)生接受,。多重熒光免疫組化會加速在臨床落地應用，可標記指標將更多,，機器識別能力和可視化能力也將顯著提升,，多維度展示腫瘤細胞和腫瘤免疫微環(huán)境間的關系。

然而，與眾多新興技術一樣,，多重熒光免疫組化技術還存在尚未合規(guī)化,、成本高昂、結果判讀沒能形成標準化等問題,。闊然基因表示：“接下來,，行業(yè)內的企業(yè)、協會等各方角色需要推動相應的行業(yè)標準,、收費標準的建立,，相關指南和專家共識的發(fā)布，以及上游原料,、儀器國產化,。”