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草莓的繁殖主要采用匍匐莖分株繁殖，雖然繁殖容易,，但效率較低,，占地多，易遭受病毒侵害,，引起品種退化,，影響產(chǎn)量和品質(zhì)。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)不僅能夠快繁優(yōu)質(zhì)草莓種苗,，利于品種的提純和更新,，而且能夠脫除草莓體內(nèi)的病毒。 草莓(Fragaria spp．)為薔薇科多年生草本植物,，是重要的漿果植物,。其果實(shí)顏色鮮艷、營(yíng)養(yǎng)豐富,，可鮮食,，是良好的配餐食品，也可加工成果醬,、果酒等,。其促成栽培的迅速發(fā)展，填補(bǔ)了水果的淡季市場(chǎng),。 脫毒苗繁育工藝流程如圖4-15所示,。  01 草莓的脫毒處理  一、熱處理脫毒 草莓植株先栽種于用熱處理的特定容器內(nèi)生長(zhǎng)1～2個(gè)月，使其根系健壯生長(zhǎng),，以增加對(duì)高溫的抵抗能力,。然后放人恒溫箱中，保持光照16 h/d,，光照強(qiáng)度5000 lx,，晝溫38℃，夜溫35℃,。處理的時(shí)間因病毒種類(lèi)而異,。如38℃的恒溫培養(yǎng)12～15 d即可脫去草莓斑駁病毒；草莓輕型黃斑病毒和草莓鑲脈病毒,，因耐熱性強(qiáng),，需在38℃恒溫條件下處理50 d熱處理之后再進(jìn)行微莖尖培養(yǎng)則脫毒比較徹底，即便所取微莖尖稍大一點(diǎn),，也可以培育出無(wú)病毒苗,，且能提高外植體的成活率。 二,、外植體的選擇與處理 取經(jīng)過(guò)熱處理的草莓母株上新抽出的匍匐莖作外植體,，以每年6～7月最為適宜。如果母株沒(méi)有經(jīng)過(guò)熱處理,，則于7～8月匍匐莖發(fā)生最旺盛的時(shí)期,，在無(wú)病蟲(chóng)害的田塊，連續(xù)晴天3～4 d時(shí)選取生長(zhǎng)健壯,、新萌發(fā)且未著地的3 cm長(zhǎng)匍匐莖梢作外植體,。然后用肥皂水洗刷，流水沖洗2 h,，剝?nèi)ネ鈱尤~片,，75％的酒精浸泡30 S，除去表面的蠟質(zhì),，2％～3％次氯酸鈉溶液(加數(shù)滴0.1％吐溫20或吐溫80)浸泡15～20 min,，無(wú)菌水沖洗3～5次進(jìn)行材料表面滅菌，最后用無(wú)菌濾紙吸干表面水分,。在無(wú)菌條件下借助解剖鏡將芽外面的幼葉和部分葉原基除去,，使生長(zhǎng)點(diǎn)暴露，然后用解剖刀切下帶有1～2個(gè)葉原基,、0.2～0.5 mm大小的微莖尖,，迅速接入MS、BA 0.5 mg/L,，NAA 0.25 mg/L或White,、IAA 0.1 mg/L的初代培養(yǎng)基上,。 02 草莓快繁與配方  一、初代培養(yǎng) 微莖尖接種后,，放置于25±2℃,、光照16～18 h/d，光照強(qiáng)度2000～3000 lx的條件下培養(yǎng),。1～2個(gè)月后莖尖生長(zhǎng)并分化出芽叢,。若在低溫和短日照條件下，莖尖可能進(jìn)入休眠,，所以應(yīng)保持較高的溫度和充足的光照時(shí)間,。 二、 繼代培養(yǎng) 將芽叢切割成有3～4個(gè)芽的芽叢轉(zhuǎn)入MS,、6-BA 1 mg/L繼代培養(yǎng)基上,，每瓶放置3～4個(gè)芽叢，經(jīng)過(guò)3～4周的培養(yǎng)可獲得由30～40個(gè)腋芽形成的芽叢,。在轉(zhuǎn)接過(guò)程中,，去掉原生葉片有利于新苗的分化；增殖培養(yǎng)中隨時(shí)清除愈傷組織,，有利于芽苗的增殖和生長(zhǎng)。在轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基前一次繼代培養(yǎng)時(shí),，改換培養(yǎng)基為MS,、6-BA 0.5 mg/L，以利于形成壯苗,。 三,、生根培養(yǎng) 將長(zhǎng)到2cm長(zhǎng)的草莓苗接種到1/2 MS、IBA 0.1 mg/L的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng),，生根率達(dá)100％,，平均根條數(shù)為2.4條。培養(yǎng)基中不附加IBA或IBA濃度超過(guò)0.2 mg/L,，多數(shù)芽苗都在基部切口處產(chǎn)生愈傷組織,，隨后在愈傷組織上分化生根，致使成活率大大降低,。另外,，也可以將具有兩片以上正常葉的芽苗在試管外生根。 注意在繼代增殖和生根培養(yǎng)時(shí),，培養(yǎng)溫度控制在18～26℃范圍內(nèi),，瓶苗可以正常生長(zhǎng)及發(fā)根；而在28℃以上時(shí),，綠苗普遍變黃,，生根率降低,，根尖發(fā)黃老化，容易產(chǎn)生玻璃化苗現(xiàn)象,。 03 草莓的移栽與管理  一,、草莓移栽 當(dāng)生根培養(yǎng)15～20 d時(shí)，試管苗根多且粗壯,。當(dāng)主根長(zhǎng)1.5 cm左右,，白色無(wú)須根、葉大而厚,、深綠,，具3片以上葉片時(shí)可以馴化移栽。栽培基質(zhì)為腐熟的鋸木屑或腐葉土,，也可采用蛭石與珍珠巖配比為1：1或園土與煤渣配比為2：1的復(fù)合基質(zhì),。溫室內(nèi)或塑料拱棚內(nèi)溫度要控制在15～20℃，濕度維持在80％左右為宜,。同時(shí)由于剛移栽的小苗莖稈脆嫩,，應(yīng)盡量采用噴霧澆水，水量不宜過(guò)大,，干后再?lài)?。移栽初期遮?0％，1周后逐漸增加光強(qiáng),。這樣試管苗移栽成活率可達(dá)90％~100％,。 二、危害管理 防止蚜蟲(chóng)的危害：草莓脫毒苗的繁殖要重點(diǎn)防止病毒的再度污染,。由于草莓病毒主要是通過(guò)蚜蟲(chóng)吸吮汁液而傳播的,，所以要做好蚜蟲(chóng)防治工作。用馬拉松乳劑,、氧化樂(lè)果乳劑等殺蟲(chóng)劑,，防治期在5～6月和9～10月，特別是9～10月防治可阻止蚜蟲(chóng)的越冬,。 |
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