免疫組化實(shí)驗(yàn)是一種可以通過顏色來原位顯示蛋白質(zhì)的有無及定位(胞外,、胞膜,、胞漿、胞核)的技術(shù),。對于新手來說,,如何準(zhǔn)確判斷蛋白定位是一大難點(diǎn),今天,小編就將蛋白的定位做一個(gè)分類講解,。 第一類:胞膜型表達(dá) 陽性染色顆粒主要定位于細(xì)胞膜表面,。常見的有淋巴細(xì)胞膜抗原(如LCA、CD20,、CD4,、CD8等)、間皮細(xì)胞抗原(如MCA,、CR,、CK5/6等)、細(xì)胞膜受體(insulinR,、FAS,、CD25等)、黏附分子(整合素,、干擾素,、鈣黏蛋白等)、上皮細(xì)胞抗原(EMA,、ECA,、ESA等)等。 左圖:E-cadherin在肝癌中胞膜陽性 右圖:NTCP在大鼠肝臟中胞膜陽性 第二類:胞核型表達(dá) 陽性顆粒定位于細(xì)胞核中,。常見的有增殖細(xì)胞周期抗原(Ki-67,、PCNA等)、性激素受體(ER,、PR,、AR等)、腫瘤相關(guān)基因(P53,、P27,、BRCA1等)、肌核抗原(Myf-3,、MyoD1等),、淋巴細(xì)胞核抗原(OCT-2、MUM1等),、上皮細(xì)胞核抗原(P63,、TTF-1等)等。 左圖:P53在結(jié)腸癌中胞核陽性 右圖:PCNA在肺癌中胞核陽性 第三類:胞質(zhì)型表達(dá) 陽性顆粒定位于細(xì)胞質(zhì),。常見的有細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白 (中間絲蛋白、微絲蛋白等),、細(xì)胞內(nèi)酶和功能蛋白(MPO,、NSE、PLAP等),、神經(jīng)內(nèi)分泌物(GH,、PLR等)等,。 左圖:MPO在小鼠骨髓中胞質(zhì)陽性 右圖:VIM在睪丸癌中胞質(zhì)陽性 第四類:胞膜-質(zhì)型表達(dá) 陽性顆粒分布于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。常見的有腫瘤相關(guān)抗原(如CA家族抗原),、間皮標(biāo)志物(MCA,、CR等)等。 左圖:EGFR在尿路上皮癌中胞膜-質(zhì)陽性 右圖:EPCAM在甲狀腺癌中胞膜-質(zhì)陽性 第五類:胞核-質(zhì)型表達(dá) 陽性顆粒分布于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),。常見的有S-100,、HMB45、Melan A,、HSP27,、MLH1等。 左圖:CCND1在乳腺癌中胞核-質(zhì)陽性 右圖:S100B在黑色素瘤中胞核-質(zhì)陽性 以上我們將蛋白的不同定位類型做了一個(gè)講解,。那如何得知我們要研究的蛋白理論的表達(dá)部位呢,?小編給大家推薦一個(gè)數(shù)據(jù)庫- uniprot。 鏈接:https://www. 打開鏈接,,在搜索欄輸入想查詢的蛋白名稱,,然后根據(jù)物種點(diǎn)開相應(yīng)的數(shù)據(jù)鏈接,即可在Subcellular location這一欄找到該蛋白的理論細(xì)胞定位,。 END |
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