實驗室SOP文件

規(guī)范實驗室查找“污染”來源的操作過程,，保證查找“污染”來源的全面性和及時性,。

臨床基因擴增檢驗實驗室,。

臨床基因擴增檢驗實驗室工作人員。

1. 物品準備：生理鹽水（或去RNA酶水）,、1.5ml EP管,、EP管架、采樣拭子,、帶濾芯槍頭,、擴增檢測試劑盒等。

2. 查找“污染”來源的檢測途徑

2.1 空氣沉降檢測：

2.1.1 在試劑準備區(qū),、樣本制備區(qū)和擴增分析區(qū)實驗臺面上分別放置開蓋裝有生理鹽水（或去RNA酶水）的EP管,，過夜。測試試劑準備區(qū),、樣本制備區(qū)和擴增分析區(qū)的空間否存在氣溶膠污染,。

2.1.2 在潔凈工作臺面、生物安全柜內部和核酸提取儀內部分別放置開蓋裝有生理鹽水（或去RNA酶水）的EP管,，過夜,。測試潔凈工作臺、生物安全柜內部和核酸提取儀的空間是否存在氣溶膠污染,。

2.2 物表檢測：

2.2.1 用采樣拭子蘸生理鹽水（或去RNA酶水）分別對試劑準備區(qū),、樣本制備區(qū)和擴增分析區(qū)的實驗臺面反復擦拭后，放入生理鹽水（或去RNA酶水）中進行洗脫,。測試試劑準備區(qū),、樣本制備區(qū)和擴增分析區(qū)的實驗臺面上否存在污染。

2.2.2 用采樣拭子蘸生理鹽水（或去RNA酶水）分別對潔凈工作臺面,、生物安全柜臺面和熒光PCR儀內壁反復擦拭后,，放入生理鹽水（或去RNA酶水）中進行洗脫。測試潔凈工作臺,、生物安全柜內部,、核酸提取儀和熒光PCR儀內面是否存在污染。

2.3 移液器檢測：

2.3.1 將配液的移液器和加模板的移液器分別換上無濾芯槍頭,，在生理鹽水（或去RNA酶水）中反復吹吸10次,。測試移液器內部是否存在污染。

2.3.2 用采樣拭子蘸生理鹽水（或去RNA酶水）后分別對配液的移液器和加模板的移液器的內外表面進行取樣,，取樣后放入生理鹽水（或去RNA酶水）中進行洗脫,。測試移液器表面是否存著污染。

3. 將上述采集到的樣本,，按照擴增檢測試劑盒說明書要求的和核酸樣本量,，直接加入擴增試劑的八連管內，上機擴增檢測,。同批次擴增檢測應設有陽性對照和陰性對照（排除擴增過程中的假陰性和假陽性）。

4. 結果分析：按照擴增檢測試劑盒要求進行結果分析。

4.1 在陽性對照和陰性對照結果正常的情況下分析檢測樣本,。

4.2 若發(fā)現(xiàn)樣本中有擴增曲線,，即說明該樣本檢測的內容存在“污染”。