人類自然殺傷細(xì)胞 (NK) 占所有循環(huán)淋巴細(xì)胞的15%。NK細(xì)胞發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)70年代,，主要與殺死感染的微生物和惡性轉(zhuǎn)化的同種異體和自體細(xì)胞有關(guān),。NK細(xì)胞表現(xiàn)出抗腫瘤細(xì)胞毒性，無需事先致敏和產(chǎn)生細(xì)胞因子以及調(diào)節(jié)各種免疫反應(yīng)的趨化因子,。最近的研究表明,，自然殺傷細(xì)胞的實(shí)際作用不僅限于殺死惡性轉(zhuǎn)化和病毒感染的細(xì)胞，而且還直接或間接地影響適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的參與者,，如樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞,，擴(kuò)展其功能域。此外,，NK細(xì)胞亞群在其細(xì)胞毒性,、細(xì)胞因子產(chǎn)生和歸巢能力方面表現(xiàn)出主要的功能差異。根據(jù)細(xì)胞表面CD56的密度,，將NK細(xì)胞分為CD56^bright和CD56^dim兩者類型,，它們具有不同的表型特征。CD56^bright NK細(xì)胞具有產(chǎn)生豐富細(xì)胞因子的能力,，而CD56^dim NK細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性,，表達(dá)更多的免疫球蛋白樣受體和FcγRIII（Fcγ受體III，又稱CD16）,。

激活性受體和抑制性受體均在NK細(xì)胞表面表達(dá),，有助于NK細(xì)胞執(zhí)行功能。MHC-I（主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ類）抗原特異性的抑制性受體可密切調(diào)節(jié)NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性和淋巴因子的產(chǎn)生,。MHC-I特異性受體的抑制信號(hào)對(duì)于造血細(xì)胞避免NK細(xì)胞的破壞至關(guān)重要,。這個(gè)概念被稱為“丟失自我”，最初是由 Ljunggren和Karre 提出的。這種MHC-I識(shí)別抑制性受體形成了NK細(xì)胞表面受體的三個(gè)家族,，即KIRs（殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體）,、LIRs（白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體）和NKG2A（自然殺傷細(xì)胞2族A）。KIRs是免疫球蛋白超家族的成員,，是識(shí)別經(jīng)典人類白細(xì)胞抗原A,、B和C（HLA-Ia類）的I型跨膜分子。LIRs又稱ILTs（免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄物）,，形成第二組受體,，除了HLA Ia類外，主要識(shí)別非經(jīng)典HLA-G（Ib類）分子,。LIRs與KIRs屬于同一個(gè)Ig超家族,。NKG2A是NKG2族的一個(gè)成員，包括A,、B,、C、D,、E,、F和H，與CD94二聚形成NKG2A/CD94受體,。它屬于受體的C型凝集素家族,，識(shí)別非經(jīng)典HLA-EⅠ類分子作為其配體。

NK細(xì)胞的殺傷作用不僅需要通過抑制性受體檢測(cè)轉(zhuǎn)化細(xì)胞上的MHC-I分子,，還需要通過激活性受體激活NK細(xì)胞,。自然細(xì)胞毒性受體（NCR）是一組自然殺傷細(xì)胞表面激活性受體，包括NKp46,、NKp30和NKp44,。這些受體以及NKG2D和DNAM-1（DNAX輔助分子-1）識(shí)別病毒感染或惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞表面表達(dá)的配體。一些共受體（2B4,、NKp80,、NTB-A和CD59）也被表達(dá)，它們只有與其他激活性受體結(jié)合才能發(fā)揮作用,。CD16（或FcγRIII）也是一種激活性受體,，主要由CD56^dim NK細(xì)胞亞群表達(dá)，對(duì)IgG包被靶細(xì)胞的抗體依賴性細(xì)胞毒性（ADCC）至關(guān)重要,。

腫瘤通過建立免疫抑制腫瘤微環(huán)境來逃避免疫系統(tǒng),。涉及NK細(xì)胞的免疫逃避包括幾個(gè)機(jī)制。腫瘤細(xì)胞或腫瘤微環(huán)境的其他組分如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）,、IL-6,、IL-10,、色氨酸分解代謝產(chǎn)物、前列腺素E2（PGE2）,、dickkopf相關(guān)蛋白2（DKK2）,、吲哚胺2,3-雙加氧酶（IDO）、可溶性HLA-G,、可溶性NKG2D配體,。據(jù)報(bào)道，半乳糖-3（NKp30可溶性抑制性受體）可降低NK細(xì)胞的活化,、細(xì)胞毒性,、IFNγ的產(chǎn)生及其激活性受體的表達(dá)和激活。此外,，腫瘤細(xì)胞還發(fā)現(xiàn)激活性受體的配體脫落和抑制性受體配體的上調(diào),。因此，人們開發(fā)了多種策略來恢復(fù)NK細(xì)胞的功能,，包括過繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移、細(xì)胞因子治療,、靶向激活,、抑制性受體和腫瘤微環(huán)境的單克隆抗體。腫瘤利用NK細(xì)胞抑制性受體進(jìn)行免疫逃避就是這樣一種機(jī)制,，稱為免疫檢查點(diǎn)抑制,，并已被證明是最有效和最受歡迎的治療靶點(diǎn)。C

KIR家族（也被稱為CD158）是一類具多樣性和多態(tài)性的NK細(xì)胞受體亞型,，包含抑制性和激活性KIRs,，每個(gè)受體識(shí)別特定的HLAⅠ類同系物（HLA-a、-B或-C）作為配體,。抑制性KIR₂DL₁,、KIR₂DL₂和KIR₂DL₃識(shí)別HLA-C作為它們的配體，而HLA-B和HLA-A作為其他KIRs的配體,，包括抑制性KIR₃DL₁和KIR₃DL₂,。除了NK細(xì)胞外，T細(xì)胞亞群和NKT細(xì)胞（不變自然殺傷性T細(xì)胞）也表達(dá)KIR,。作為KIRs和KIRs配體的MHC-I分子（HLA-A,、-B和-C）本身表現(xiàn)出廣泛的自然多態(tài)性。KIR等位基因組合的多樣性（染色體19q13,，14上共有17個(gè)KIR基因）,，每個(gè)基因內(nèi)的多態(tài)性，以及每個(gè)表達(dá)KIR的NK細(xì)胞,，使得這個(gè)復(fù)雜的KIR序列能夠識(shí)別MHC-I表達(dá)的微小變化,。

IPH2101和lirilumab（IPH2102/BMS-986015）是針對(duì)KIR₂DL1/2/3 NK細(xì)胞抑制受體的IgG4單克隆抗體,，目前正在臨床評(píng)估和開發(fā)中，作為單一療法或與其他藥物聯(lián)合使用,，包括分子靶向劑（來那度胺）,、單克隆抗體（elotuzumab和rituximab）和免疫檢查點(diǎn)阻斷劑（ipilimumab和nivolumab）。IPH2101可用于各種血液學(xué)（AML,、CLL,、NHL）或?qū)嶓w惡性腫瘤（乳腺癌和卵巢癌）的臨床評(píng)估。據(jù)報(bào)道,，高達(dá)10mg/kg的IPH2101仍然具有良好的耐受性,。到目前為止，IPH2101作為單一療法在多發(fā)性骨髓瘤（MM）患者的臨床應(yīng)用中還沒有取得令人滿意的效果,。

在RRMM中,，IPH2101作為單藥治療的劑量遞增I期試驗(yàn)，其主要目的是評(píng)估最大劑量耐受性和限制性毒性,，報(bào)告了可接受的安全性和耐受性,，但沒有任何自身免疫的證據(jù)。然而,，根據(jù)國(guó)際骨髓瘤工作組（IMWG）標(biāo)準(zhǔn),，只有11例（34%）的患者獲得了疾病穩(wěn)定的最佳反應(yīng)。結(jié)果表明,，在MM患者中輸注IPH2101可降低NK細(xì)胞表面KIR2D受體的表達(dá)和NK細(xì)胞的反應(yīng)性,。臨床前證據(jù)表明，來那度胺與IPH2101聯(lián)用可增強(qiáng)NK細(xì)胞的功能,，并上調(diào)NK細(xì)胞表面受體的配體,，顯示了對(duì)來那度胺耐藥腫瘤的體內(nèi)排斥作用。IPH2101和來那度胺作為MM患者的“雙重免疫療法”已經(jīng)被報(bào)道達(dá)到了24個(gè)月的中位無進(jìn)展生存率,，5個(gè)具有可接受毒性的客觀響應(yīng)（5個(gè)嚴(yán)重不良事件）,，并且沒有自身免疫?？偟膩碚f,，盡管IPH2101不能作為單一的藥物，但這種組合仍有希望對(duì)MM患者進(jìn)行進(jìn)一步的臨床評(píng)估,。

lirilumab的II期試驗(yàn)因未能達(dá)到為MM患者設(shè)定的客觀療效標(biāo)準(zhǔn)（M蛋白下降50%）而終止,，總共9名入選患者中，僅有1名（11%）和6名（66%）達(dá)到最低反應(yīng)和疾病穩(wěn)定,。然而,，lirilumab增強(qiáng)了elotuzumab介導(dǎo)的細(xì)胞殺傷作用，并在KIR2DL3轉(zhuǎn)基因和RAG缺陷小鼠中顯示出增強(qiáng)抗腫瘤效果的協(xié)同作用,。Sola等人也報(bào)道了lirilumab在體外增強(qiáng)了elotuzumab介導(dǎo)的ADCC作用以及l(fā)irilumab介導(dǎo)的有效的elotuzumab抗MM活性的體內(nèi)協(xié)同作用,，為MM患者的臨床評(píng)估奠定了基礎(chǔ),。目前正在進(jìn)行一項(xiàng)I期（NCT2252263）研究，評(píng)估elotuzumab和lirilumab聯(lián)合治療多發(fā)性骨髓瘤患者的安全性,。

體內(nèi)IPH2101阻斷KIR可提高存活率,，臨床前證據(jù)也表明對(duì)AML細(xì)胞（急性髓系白血病）有效。AML患者的臨床療效相對(duì)較好,，平均PFS為7.7個(gè)月,，RFS為10.8個(gè)月，OS為12.7個(gè)月,。這些臨床結(jié)果隨著劑量的增加而改善,，但程度不顯著。與之前的0.3mg/kg劑量相比,，只有在1-3mg/kg劑量下OS顯著增加（27.9個(gè)月vs.11.8個(gè)月,，p<0.034）。安全性和耐受性是可以接受的,，不良事件均為輕微和短暫的,。這項(xiàng)研究的延伸揭示了lirilumab作為老年患者維持治療的作用，通過反復(fù)給藥延長(zhǎng)生存期和獲得令人滿意的安全性,。然而,，effiki試驗(yàn)的結(jié)果顯示lirilumab與安慰劑組之間沒有顯著差異，這使得人們對(duì)lirilumab作為一種單一的藥物產(chǎn)生了懷疑,。lirilumab聯(lián)合全劑量氮胞苷對(duì)重度預(yù)治療/復(fù)發(fā)的AML患者具有良好的耐受性。最近的一項(xiàng)研究報(bào)告了lirilumab作為單藥或聯(lián)合阿扎胞苷治療骨髓增生異常綜合征（MDS）患者的有效性和耐受性,。在人類模型中,，與抗淋巴瘤治療的細(xì)胞系模型相比，lirilumab和rituximab聯(lián)合給藥相對(duì)于rituximab單藥顯示出NK細(xì)胞毒性增加,。在KIR轉(zhuǎn)基因和同基因小鼠淋巴瘤模型中,，這種組合在體外和體內(nèi)都顯示了NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性增強(qiáng)，并依賴于rituximab,。這些結(jié)果為臨床評(píng)估抗KIR和抗CD20單抗的聯(lián)合治療提供了支持,。

最近，這組抗KIR抗體的第三個(gè)成員IPH4102,，一種人源化抗KIR3DL2單克隆抗體,，已經(jīng)進(jìn)入臨床評(píng)估階段。IPH4102,，也稱為L(zhǎng)acutamab,，在復(fù)發(fā)/難治性皮膚T細(xì)胞淋巴瘤的I期臨床評(píng)估中耐受性良好，最常見的不良反應(yīng)包括水腫,、疲勞和淋巴細(xì)胞減少,。臨床活性也令人鼓舞,，44例患者中有16例（36%）獲得了總體療效。復(fù)發(fā)/難治性皮膚T細(xì)胞淋巴瘤伴Sézary綜合征的患者表現(xiàn)出更好的臨床反應(yīng)（43%）,。一項(xiàng)II期臨床試驗(yàn)（NCT03902184）正在研究IPH4102作為單一藥物或聯(lián)合化療治療T細(xì)胞淋巴瘤,。

白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體（LIR）或免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄物（ILT）與KIR一樣,，屬于Ig超家族，由激活性受體和抑制性受體組成,。在總共11個(gè)LIR成員中鑒定出5個(gè)抑制受體（LIRB1-5）。許多免疫細(xì)胞（NK,、T,、B和包括巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞在內(nèi)的髓系細(xì)胞）不同程度地表達(dá)這些受體。其中,，LIRB1（ILT2）和LIRB2（ILT4）除了其它配體外,，還識(shí)別HAL-G作為它們的主要配體，從而導(dǎo)致免疫原性耐受,。ILT2在自然殺傷細(xì)胞（正常NK細(xì)胞的36±18%）,、T細(xì)胞、B細(xì)胞,、單核細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞亞群和髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）上表達(dá)，而ILT4主要在髓系細(xì)胞上表達(dá),。因此,，ILT2和HLA-G相互作用可以抑制NK、T和B細(xì)胞的免疫功能,，從而作為一個(gè)免疫治療靶點(diǎn),。

各種原發(fā)性腫瘤和轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤都表達(dá)HLA-G，它也被認(rèn)為是各種癌癥進(jìn)展和預(yù)后的指標(biāo),。它的表達(dá)與各種癌癥中NK功能的降低有關(guān),，如肝細(xì)胞癌（HCC）、卵巢癌,、非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）,、膠質(zhì)瘤和腎細(xì)胞癌（RCC）。此外,，膜表面表達(dá)的HLA-G或可溶性HLA-G與ILT2的相互作用已證明抑制NK功能,，包括細(xì)胞毒性、細(xì)胞因子產(chǎn)生和趨化因子分泌,。蛻膜NK細(xì)胞的細(xì)胞溶解作用可以被HLA-G表達(dá)的靶細(xì)胞所抵抗,。HLA-G的表達(dá)保護(hù)靶細(xì)胞免受外周血和NK細(xì)胞系中NK細(xì)胞毒性的影響。ILT2與HLA-G相互作用也抑制了靶細(xì)胞誘導(dǎo)的NK細(xì)胞產(chǎn)生極化IFN-γ,?？扇苄訦LA-G（sHLA-G）對(duì)NK細(xì)胞（CD56^bright和CD56^dim）的趨化性,、細(xì)胞因子和趨化因子的分泌有不同程度的調(diào)節(jié)作用。sHLA-G上調(diào)了CD56^bright和CD56^dimNK細(xì)胞CCL2的分泌,，以及外周血CD56^dim NK細(xì)胞CCL2,、CCL8和CXCL2-CXCL3的分泌。HLA-G1/ILT2相互作用也通過抑制NK細(xì)胞毒性來減輕MICA/NKG2D的激活,。

在胃癌中,，HLA-G/ILT2相互作用可抑制浸潤(rùn)性NK細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性。然而,，HLA-G在B細(xì)胞惡性腫瘤中有表達(dá),，由于B細(xì)胞惡性腫瘤也同時(shí)表達(dá)ILT2表面受體，因此反而抑制了惡性B細(xì)胞的增殖,，而ILT2表面受體在實(shí)體瘤細(xì)胞中不表達(dá),。這可能是LIR-1阻斷劑未能增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)MM細(xì)胞的細(xì)胞毒性的原因。然而,，LIR-1和NKG2A的雙重阻斷能夠增加KIR陰性NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性,。這些發(fā)現(xiàn)提示HLA-G-ILT2相互作用起著雙重作用：經(jīng)典的抑制檢查點(diǎn)在實(shí)體惡性腫瘤中的作用，以及由于ILT2在血液惡性腫瘤細(xì)胞上的表達(dá)而導(dǎo)致疾病進(jìn)展的反作用,。因此,，用抗體阻斷這個(gè)檢查點(diǎn)可以被認(rèn)為是實(shí)體癌的潛在靶點(diǎn)。需要進(jìn)一步的研究來證實(shí)它在血液學(xué)癌癥中的作用,。來那度胺也顯示了慢性淋巴細(xì)胞白血?。?/span>CLL）中NK細(xì)胞和白血病細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。ILT2在CLL中的表達(dá)在NK細(xì)胞上增加,，而在白血病細(xì)胞中表達(dá)降低,。來那度胺的免疫調(diào)節(jié)作用增加白血病細(xì)胞ILT2的表達(dá)，并部分恢復(fù)其配體（HLA-E）的表達(dá),。此外，NK細(xì)胞活化和增殖也增加,。ILT2阻斷進(jìn)一步增強(qiáng)NK細(xì)胞的活化和增殖,。

NKG2A（也稱為CD159）和CD94是C型凝集素家族的異二聚體抑制性受體，它識(shí)別非經(jīng)典MHC-I分子HLA-E作為配體,。CD94-NKG2A及其HLA-E配體呈非多態(tài)性,。HLA-E*0101和HLA-E*0103是全球人群中僅有的兩個(gè)HLA-E等位基因。外周血中近50%的NK細(xì)胞表達(dá)CD94/NKG2A,，主要是那些不表達(dá)抑制性KIR的NK細(xì)胞,。CD94/NKG2A與其他不同特異性的抑制性受體也存在共表達(dá)。此外,，γδ和cd8+T細(xì)胞也表達(dá)CD94/NKG2A,。NKG2A和CD94與正常細(xì)胞上表達(dá)的HLA-E反應(yīng)可抑制信號(hào)激活,，從而避免對(duì)正常旁觀者細(xì)胞的破壞。

腫瘤細(xì)胞（血液學(xué)和實(shí)體瘤）為了避免NK細(xì)胞的殺傷,，表現(xiàn)出HLA-E表達(dá)的上調(diào),。在各種癌癥中，預(yù)后不良與HLA-E上調(diào)有關(guān),，包括結(jié)直腸癌,、卵巢癌、婦科癌,、肝癌,、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、霍奇金淋巴瘤,、慢性淋巴細(xì)胞白血病,、食管、胃,、胰腺,、結(jié)腸癌、腎臟,、頭頸部,、肺癌和黑色素瘤。用抗體阻斷CD94/NKG2A受體可作為一種治療策略,。因此,，天然制藥公司開發(fā)的抗CD94/NKG2A抗體（IPH2201 Monalizumab）已用于各種試驗(yàn)。體外和體內(nèi)研究結(jié)果表明人源化抗NKG2A抗體對(duì)血液惡性腫瘤的應(yīng)用是安全有效的,。在體外實(shí)驗(yàn)中,，monalizumab可改善慢性淋巴細(xì)胞白血病的NK細(xì)胞功能障礙。Monalizumab作為單藥治療婦科惡性腫瘤具有良好的耐受性（靜脈給藥或SC給藥可達(dá)10mg/kg）,，未報(bào)告DTLs或SAEs,。這項(xiàng)正在進(jìn)行的大量預(yù)處理隊(duì)列試驗(yàn)顯示，41%的可評(píng)估患者（128人）病情穩(wěn)定,。

在免疫檢查點(diǎn)抑制劑領(lǐng)域,，從單一療法向聯(lián)合治療方法的轉(zhuǎn)變正在興起，這主要是因?yàn)檫@些受體中的一些同時(shí)在一些先天性和適應(yīng)性免疫細(xì)胞上大量表達(dá),，以及由于細(xì)胞間的相互作用和相互依賴性,。Monalizumab正在與durvalumab、 cetuximab和ibrutinib聯(lián)合評(píng)估,。各種表達(dá)HLA-E的實(shí)體癌具有浸潤(rùn)性CD8+T,、NK和NKG2A+免疫細(xì)胞。這些浸潤(rùn)的NKG2A+NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞在受體阻斷時(shí)表現(xiàn)出增強(qiáng)的NK和T細(xì)胞反應(yīng)。已有報(bào)道PD-1與NKG2A在腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞中共表達(dá),。在體外和體內(nèi)用抗體阻斷NKG2A/HLA-E和PD-1/PD-L1通路均顯示出完全緩解率,。初步數(shù)據(jù)顯示，monalizumab和durvalumab的聯(lián)合應(yīng)用已顯示出臨床療效和可控制的毒性,，且無DTLs,，這是在大量預(yù)處理的轉(zhuǎn)移性微衛(wèi)星結(jié)直腸癌患者中發(fā)現(xiàn)的。

體外研究發(fā)現(xiàn),，抗NKG2A抗體與其他腫瘤免疫療法具有協(xié)同效應(yīng),。monalizumab聯(lián)合cetuximab對(duì)先前治療過、復(fù)發(fā)和/或轉(zhuǎn)移的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌（SCC）的安全性和有效性進(jìn)行了初步評(píng)估,，結(jié)果顯示聯(lián)合用藥的ORR（客觀緩解率）為27.5%,，5個(gè)月的中位PFS（無進(jìn)展生存率）和10個(gè)月的中位總生存率（OS）。如果與以往研究中單用cetuximab療效的歷史記錄相比,，這是一個(gè)令人鼓舞的結(jié)果（ORR12.6%,，PFS 2.3 m，OS 5.6 m）,。聯(lián)合治療的不良反應(yīng)與單用cetuximab相似,。最近的體內(nèi)分析表明，NKG2A對(duì)CD8+T細(xì)胞的誘導(dǎo)會(huì)阻礙疫苗治療的效果,，阻斷NKG2A受體可提高疫苗治療的療效,。總的來說,，阻斷NKG2A代表了一種令人興奮的治療方法,，特別是，它與其他免疫腫瘤治療藥物的結(jié)合是前進(jìn)的方向,，并值得進(jìn)一步的探索,。

TIGIT（具有免疫球蛋白和ITIM域的T細(xì)胞免疫受體）是一種在NK和T細(xì)胞上表達(dá)的免疫抑制性受體，如活化的NK,、T,、mT（記憶T細(xì)胞）、fTh（濾泡輔助性T細(xì)胞）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）,。與TIGIT相比,，CD96是同一免疫球蛋白超家族的成員，具有類似的抑制作用,，但與配體CD155的結(jié)合親和力較低。CD226是一種激活性受體,，與TIGIT和CD96競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合CD155,。CD155（主要）和CD112作為TIGIT和CD96結(jié)合的配體，以抑制T細(xì)胞和NK細(xì)胞介導(dǎo)的免疫。CD155是一種跨膜糖蛋白,，又稱脊髓灰質(zhì)炎病毒受體（PVR）,，最初被鑒定為脊髓灰質(zhì)炎病毒進(jìn)入受體。CD155是免疫球蛋白超家族的一員,，也是連接蛋白樣分子家族的第五個(gè)成員,，因此也被稱為necl-5。它在正常人體組織中幾乎不表達(dá),，但許多腫瘤細(xì)胞系和原發(fā)性惡性腫瘤高表達(dá)CD155,。在CD155的功能中，通過其與抑制性受體TIGIT和CD96以及激活受體CD226的相互作用來進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)是特別令人感興趣的,。各種癌癥都表現(xiàn)出CD155的上調(diào),，相應(yīng)的TIGIT和CD96的NK和T細(xì)胞表達(dá)上調(diào)，以通過誘導(dǎo)T細(xì)胞或NK細(xì)胞抑制來逃避抗腫瘤免疫,。臨床前證據(jù)支持阻斷NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫激活檢查點(diǎn)的想法,，臨床轉(zhuǎn)化正處于初級(jí)階段。

NK,、效應(yīng)和記憶T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表達(dá)TIGIT,。到目前為止，TIGIT阻斷主要是在血液腫瘤中得到評(píng)估,，TIGIT阻斷多發(fā)性骨髓瘤主要與CD8+T細(xì)胞有關(guān),。多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞CD155配體上調(diào)，其免疫監(jiān)視和治療依賴于NK和T細(xì)胞分泌的CD226,。阻斷TIGIT阻止了干細(xì)胞移植后骨髓瘤逃逸的T細(xì)胞衰竭機(jī)制,。CD8+T細(xì)胞表面表達(dá)高水平TIGIT與多發(fā)性骨髓瘤進(jìn)展相關(guān)，通過在小鼠和人類的多發(fā)性骨髓瘤中阻斷TIGHT,，增強(qiáng)了對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的免疫反應(yīng),。在PD-1靶向藥物治療無效的情況下，抗TIGIT治療可作為單一治療或與其他治療藥物聯(lián)合治療多發(fā)性骨髓瘤患者,，其臨床療效已在進(jìn)行測(cè)試,。

急性髓系白血病（AML）患者不良的臨床預(yù)后和CD8+T細(xì)胞衰竭與TIGIT相關(guān),。通過體外單獨(dú)阻斷TIGIT和PVR或PVRL2相互作用或結(jié)合BiTE?雙抗AMG 330,，T細(xì)胞顯著增強(qiáng)了AML細(xì)胞的溶解。同種異體移植后骨髓中TIGIT表達(dá)較高的患者,，其II-IV級(jí)急性移植物抗宿主?。?/span>aGVHD）的發(fā)生率顯著降低（p=0.048），PFS縮短（p=0.024）,，OS縮短（p=0.046）,。TIGIT的高表達(dá)也降低了同種異體移植后BM中NK細(xì)胞的數(shù)量,，提示TIGIT可能在GVL效應(yīng)和GVHD中起重要作用，從而控制同種異體移植后NK細(xì)胞的活性和增殖,?；谶@些觀察結(jié)果，提示TIGIT可能是異基因造血干細(xì)胞移植后的預(yù)后預(yù)測(cè)因子,，阻斷TIGIT可能是一種有效的免疫治療策略,，可以增強(qiáng)AML患者異基因造血干細(xì)胞移植后移植物對(duì)白血病的影響。Hodgkin和Reed-Sternberg（HRS）細(xì)胞或Tregs通過PD-1參與Th1,、CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞活性的抑制,。在霍奇金淋巴瘤患者CD3+T細(xì)胞上觀察到PD-1和TIGIT的可變表達(dá)，提示TIGIT阻斷劑單獨(dú)或聯(lián)合其他藥物可能是一個(gè)潛在的治療靶點(diǎn),。然而,，還需要進(jìn)一步評(píng)估。由于PD-1或TIM-3由TIGIT陽性T細(xì)胞共同表達(dá),，靶向TIGIT可能是避免B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）中T細(xì)胞耗竭的另一種機(jī)制,。雖然HL和NHL在T細(xì)胞上表達(dá)TIGIT，但其在NK細(xì)胞上的表達(dá)及在這類患者中的相關(guān)治療應(yīng)用至今尚未得到評(píng)價(jià),。

TIGIT固有表達(dá)抑制NK和CD8+T細(xì)胞功能,，從而幫助腫瘤（結(jié)腸直腸癌）在體內(nèi)生長(zhǎng)。TIGIT與荷瘤小鼠和結(jié)腸癌患者的NK細(xì)胞耗竭有關(guān),，而這種耗竭通過其阻斷而恢復(fù),，從而激發(fā)了強(qiáng)大的抗腫瘤免疫。NK細(xì)胞的存在對(duì)于TIGIT和/或PD-L1阻斷或雙重阻斷這兩個(gè)檢查點(diǎn)的治療效果非常重要,，因?yàn)镹K細(xì)胞缺失與IFNy-或TNF-分泌TIL（CD8+）頻率較低和PD-1表達(dá)TIL（CD8+）頻率較高相關(guān),。NK細(xì)胞占肝臟淋巴細(xì)胞的25-50%，這表明它們對(duì)肝臟免疫的重要性,。此外,，HCC患者的生存和預(yù)后與血液和腫瘤組織中的NK細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)。HCC患者的腫瘤進(jìn)展與腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞功能紊亂有關(guān),，主要是CD11b-CD27-NK亞群,。Sun等人發(fā)現(xiàn)衰竭的腫瘤浸潤(rùn)性CD96+NK細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)與HCC患者不良臨床結(jié)局相關(guān),。當(dāng)CD96-CD155相互作用或TGF-β1被阻斷時(shí),，NK細(xì)胞衰竭被逆轉(zhuǎn)。

近年來,，檢查點(diǎn)抑制劑的聯(lián)合應(yīng)用越來越受到重視,，以達(dá)到協(xié)同效應(yīng)。據(jù)報(bào)道,，通過增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞活化,，PD-1和TIGIT雙重靶向的荷瘤小鼠的生存率得到了提高,。Dixon等人報(bào)道，在MC38結(jié)腸癌模型中,，TIGIT和PD-1雙重阻斷可產(chǎn)生協(xié)同抗腫瘤作用，導(dǎo)致腫瘤完全消退,。在黑色素瘤患者中,，TIGIT和PD-1雙重阻斷可協(xié)同增加腫瘤浸潤(rùn)和腫瘤抗原特異性CD8+T細(xì)胞的增殖、脫顆粒和細(xì)胞因子分泌,，顯示雙重阻斷的可能性,。Hong等人提示PD-1和TIGIT也可以作為治療RCC的潛在靶點(diǎn)。在GBM患者中,，這種雙重阻滯劑還可以提高抗腫瘤免疫力和生存率,。雖然這些研究通過探索T細(xì)胞的作用來反映雙檢查點(diǎn)阻斷在各種癌癥中的療效，但也有一些研究表明雙檢查點(diǎn)的療效也依賴于NK細(xì)胞,?？筎IGIT加抗PD-L1阻斷劑可防止荷瘤小鼠和結(jié)腸癌患者的NK細(xì)胞衰竭。另一方面,，抗CD96聯(lián)合阿霉素化療,、抗CTLA-4或抗PD-1在三種不同的腫瘤模型中顯示出更有效的抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。膀胱癌（BC）患者的衰竭NK細(xì)胞在外周和腫瘤中均顯示TIM-3和TIGIT的上調(diào),。事實(shí)上,，TIGIT和CD96在各種癌癥中NK細(xì)胞衰竭中的作用仍在研究中，還需要進(jìn)一步的揭示,，以確定其作為單藥治療或與其他檢查點(diǎn)聯(lián)合使用的潛力,。

唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素（Siglecs）是一種免疫調(diào)節(jié)性唾液酸結(jié)合受體，屬于I型凝集素家族,。Siglecs在各種免疫細(xì)胞上表達(dá),，這些免疫細(xì)胞包括淋巴和髓系來源的免疫細(xì)胞，即中性粒細(xì)胞,、嗜酸性粒細(xì)胞,、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞,、NK細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞以及B和T細(xì)胞,。Siglecs在兩個(gè)性質(zhì)上表現(xiàn)出多樣性：表達(dá)和對(duì)含唾液酸配體的特異性,。這些Siglec大多是抑制性受體，如Siglec-2,、Siglec-3,、Siglec-5,、Siglec-6、Siglec-7,、Siglec-8,、Siglec-9、Siglec-10和Siglec-11,。在抑制性Siglec中,，Siglec-7和Siglec-9被報(bào)道在人類NK細(xì)胞上表達(dá)。與經(jīng)典NK細(xì)胞抑制受體NKG2A/CD94和KIRs類似,，抑制性siglec在其胞內(nèi)段C端也含有一個(gè)或多個(gè)ITIM和ITIM樣基序,。連接后，ITIM被Src家族激酶磷酸化,，招募并激活Src同源2（SH2）結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì),，主要是酪氨酸磷酸酶SHP1和SHP2或細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)3蛋白的抑制因子（SOCS3）。

唾液酸（一種九碳糖）的變化與癌癥有關(guān),。除了異常的腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)外,，唾液酸的改變和唾液酸的含量或密度與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。這些包括高唾液酸化,、異種唾液酸（攝取Neu5Gc）和唾液酸改變,，包括唾液酸的C5羥基修飾（產(chǎn)生KDN）和唾液酸的O-乙酰化（特別是9-O-乙?；?/span>）,。高唾液酸化與一些癌癥有關(guān)，如口腔癌,、腎細(xì)胞癌,、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、乳腺癌,、前列腺癌和結(jié)腸癌,。KDN的變化與卵巢癌和頭頸部癌有關(guān)，而唾液酸的O-乙?；诮Y(jié)直腸癌中有報(bào)道,。

Siglec-唾液酸相互作用參與免疫耐受的調(diào)節(jié)，并可作為誘導(dǎo)抗腫瘤免疫的靶點(diǎn),。針對(duì)這些抑制檢查點(diǎn)抗體（抗Siglec-2,；Inotuzumab ozogamicin和抗Siglec-3；Gemtuzumab ozogamicin）與細(xì)胞毒性劑結(jié)合的抗體偶聯(lián)藥物,，已經(jīng)在臨床測(cè)試了療效,。人類NK細(xì)胞主要上調(diào)Siglec-7和Siglec-9。此外,，在癌癥中,，外周NK細(xì)胞也上調(diào)Siglec-9,，主要在cd56^dimcd16+NK細(xì)胞上。Fab片段阻斷Siglec-7和Siglec-9可提高NK細(xì)胞體外抗腫瘤細(xì)胞（K562）的細(xì)胞毒性,。在移植人NK細(xì)胞和人腫瘤細(xì)胞的免疫缺陷小鼠體內(nèi)模型中,，腫瘤細(xì)胞的殺傷是通過抑制NK細(xì)胞的唾液聚糖依賴性介導(dǎo)的。已開發(fā)的NK-92MI細(xì)胞系的Siglec-7陰性表型表明對(duì)白血病細(xì)胞具有高度和持續(xù)的細(xì)胞毒性,。唾液酸酶治療后,，乳腺、腦,、結(jié)腸、肝臟或淋巴組織的各種重塑腫瘤株（Siglec-7豐富型腫瘤細(xì)胞系）對(duì)NK細(xì)胞殺傷的敏感性增加,。唾液酸酶與靶向HER2抗體的體外融合增強(qiáng)了NK細(xì)胞對(duì)HER2+腫瘤細(xì)胞的殺傷作用,。通過唾液酸酶切斷唾液酸配體，特別是Siglec-7和Siglec-9結(jié)合的配體,，可以增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的殺傷作用,。這表明，這種抗體唾液酸酶結(jié)合物使腫瘤細(xì)胞的表面糖蛋白選擇性去唾液酸化可以使腫瘤更容易受到的ADCC的影響,。

高親和力Siglec-9抗體通過阻斷唾液酸在腫瘤靶細(xì)胞上的表達(dá)而增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性,。這些針對(duì)Siglec-9的抗體也提高了NKG2A阻斷劑誘導(dǎo)的抗腫瘤反應(yīng)。Siglec-9在非小細(xì)胞肺癌,、卵巢癌和結(jié)直腸癌中對(duì)腫瘤浸潤(rùn)的CD8+T細(xì)胞上調(diào),。黑色素瘤中的腫瘤內(nèi)效應(yīng)記憶CD8+T細(xì)胞亞群也顯示Siglec-9通過磷酸化SHP1參與上調(diào)和抑制。體外和體內(nèi)靶向唾液酸聚糖-SAMP/Siglec通路可增強(qiáng)抗腫瘤免疫,。其他抑制性受體如PD-1也由表達(dá)Siglec-9的T細(xì)胞共同表達(dá),，這提示了共同抑制的可能性。Siglec-9在不同類型的免疫細(xì)胞上表達(dá),，提示Siglec-9的多模式作用,。這些數(shù)據(jù)支持了這樣一種觀點(diǎn)，即抗Siglec-7和抗Siglec-9阻斷抗體可以開發(fā)用于癌癥免疫治療,，并可與其他免疫檢查點(diǎn)抑制劑結(jié)合使用,。

LAG-3（淋巴細(xì)胞活化基因-3）也是免疫球蛋白超家族受體的一員，具有抑制性,。LAG-3被發(fā)現(xiàn)在活化的CD4+T細(xì)胞,、CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞表面上調(diào)。除了這些細(xì)胞外,，Lag-3還表達(dá)在其他幾種免疫細(xì)胞上,，包括TIL、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,、iNKT細(xì)胞,、B細(xì)胞和DC細(xì)胞,。它識(shí)別MHCII類分子，與CD4分子結(jié)構(gòu)相似,，但與MHC-II分子結(jié)合的親和力大于CD4,。LSECtin在肝臟和其他幾種腫瘤中表達(dá)，是DC-SIGN家族的一員,，也被描述為表達(dá)LAG-3免疫細(xì)胞的潛在配體,。LAG-3參與抑制T細(xì)胞效應(yīng)器功能，并參與T細(xì)胞衰竭,。它還促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制活性,。阻斷LAG-3已被證明可以誘導(dǎo)T細(xì)胞功能的改善。Relatlimab是一種抗LAG-3單克隆抗體,，目前正在進(jìn)行的幾項(xiàng)臨床試驗(yàn)中進(jìn)行研究,，無論是單獨(dú)使用還是與PD-1阻斷劑聯(lián)合應(yīng)用，都可以用于各種癌癥,。LAG-3和PD-1在T細(xì)胞功能調(diào)節(jié)中顯示出協(xié)同作用,，以促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。

盡管LAG-3在NK細(xì)胞上有表達(dá),，但其在NK細(xì)胞調(diào)控中的作用尚未得到充分證實(shí),。在小鼠模型中敲除LAG-3基因?qū)е翹K細(xì)胞不能殺死某些腫瘤靶點(diǎn)。然而,，這種缺失對(duì)MHC I類錯(cuò)配的細(xì)胞溶解活性沒有影響,。另一方面，人類NK細(xì)胞卻表現(xiàn)出相反的結(jié)果,。阻斷LAG-3通路的抗體不能誘導(dǎo)人NK細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒性,。可溶性LAG-3能與MHC-II分子結(jié)合,，對(duì)人類NK細(xì)胞的殺傷能力也沒有影響,。在HIV患者中，病毒控制與NK細(xì)胞上LAG-3的低表達(dá)以及其他抑制分子有關(guān),。Wiskott-Aldrich綜合征蛋白（WASp）缺乏與癌癥的高易感性相關(guān),，很可能是由于NK細(xì)胞和DC的抗癌能力受損所致。WASp敲除的NK細(xì)胞顯示出細(xì)胞衰竭和NK細(xì)胞記憶LAG-3表達(dá)增強(qiáng)相關(guān),。這似乎有一個(gè)明顯的關(guān)聯(lián),，然而，LAG-3對(duì)NK細(xì)胞功能的直接影響和潛在機(jī)制還需要進(jìn)一步研究,。與NK細(xì)胞相比,，其對(duì)NKT（自然殺傷性T細(xì)胞）功能的調(diào)節(jié)已被廣泛報(bào)道。在慢性HIV患者中，iNKT細(xì)胞耗竭和IFN-γ產(chǎn)生減少與LAG-3表達(dá)升高有關(guān),。LAG-3信號(hào)通路通過阻斷S期細(xì)胞周期,，下調(diào)活化的CD1d限制NKT細(xì)胞的增殖。

可溶性重組LAG-3-Ig融合蛋白Eftilagimod alpha（IMP321）已被用作免疫佐劑,，用于預(yù)防各種感染和癌癥,。它也被應(yīng)用于癌癥的單一治療或聯(lián)合化療。在體外的短期試驗(yàn)中,，IMP321能夠在健康個(gè)體（60個(gè)捐贈(zèng)者中的52個(gè)）誘導(dǎo)NK細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子（IFN-γ和/或TNF-α）,，以及在較低程度上在21個(gè)未經(jīng)治療的轉(zhuǎn)移性癌癥患者體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子。在轉(zhuǎn)移性腎癌患者中,，IMP321在劑量遞增研究（P003）中,，作為單藥治療誘導(dǎo)NK細(xì)胞活化。標(biāo)準(zhǔn)化療的IMP321與乳腺癌患者數(shù)月內(nèi)NK細(xì)胞活化增強(qiáng)相關(guān),。因此,，LAG-3具有激活T細(xì)胞和NK細(xì)胞的潛力。因此,，它可以作為檢查點(diǎn)抑制的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步的研究。此外,，在最近對(duì)CIML NK細(xì)胞的研究中,，CD56^bright、CD16-和CD62L+NK細(xì)胞被鑒定為細(xì)胞因子誘導(dǎo)的記憶樣（CIML）NK細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)亞群,，NKG2A的持續(xù)表達(dá)參與抑制HLA-E陽性靶細(xì)胞的殺傷,。CIML-NK細(xì)胞亞群KIR+和NKG2C+表達(dá)LAG-3，表明CIML-NK細(xì)胞是雙重檢查點(diǎn)抑制的潛在靶點(diǎn),。

共抑制受體TIM-3（T細(xì)胞免疫球蛋白和粘蛋白結(jié)構(gòu)域3）識(shí)別galectin-9作為配體,，在各種癌癥和慢性感染中上調(diào)。此外,，TIM-3可變IgV結(jié)構(gòu)域也被報(bào)道與其他配體結(jié)合,，如HMGB1（高遷移率組蛋白B1蛋白）、Ceacam-1（癌胚抗原細(xì)胞粘附分子1）和PtdSer（磷脂酰絲氨酸）,。TIM-3的表達(dá)是多種多樣的,，包括幾種類型的免疫細(xì)胞，包括CD4+T細(xì)胞,、CD8+T細(xì)胞,、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、B細(xì)胞,、NK細(xì)胞,、NKT細(xì)胞和髓樣細(xì)胞。TIM-3與其配體的結(jié)合通過耗盡T細(xì)胞和NK細(xì)胞來誘導(dǎo)免疫耐受,。這種途徑的上調(diào)與各種慢性感染和癌癥中T和NK細(xì)胞的耗竭有關(guān),，使TIM-3成為T和NK細(xì)胞免疫的負(fù)調(diào)節(jié)因子,。相應(yīng)地，它的阻斷作用逆轉(zhuǎn)了T細(xì)胞或NK細(xì)胞功能障礙,。TIM-3和PD-1的共表達(dá)參與介導(dǎo)了多種癌癥和慢性病毒感染中CD8+T細(xì)胞衰竭,。研究表明，TIM-3和/或PD-1阻斷可逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭,，并減緩腫瘤生長(zhǎng),。針對(duì)TIM-3的抗體，如Sym023,、Cobolimab,、LY3321367、BGB-A425和MBG453,，以及幾種抗PD-1/PD-L1抗體,，正在進(jìn)行臨床研究，以確定其對(duì)各種癌癥的療效,。

TIM-3在NK細(xì)胞上的表達(dá)有幾個(gè)方面的原因,。它被認(rèn)為是成熟、活化和預(yù)后的標(biāo)志物,。與CD56+/CD3+NKT和CD56-/CD3+T細(xì)胞群相比,，TIM-3在靜止CD56+/CD3+NK細(xì)胞群中高表達(dá)。健康成人血液中部分成熟CD56^dimCD16+NK細(xì)胞亞群顯示TIM-3表達(dá),，而其在未成熟CD56^brightCD16-NK細(xì)胞亞群中的表達(dá)不均一,。此外，幾種細(xì)胞因子（IL-12、IL-15和IL-18）強(qiáng)烈誘導(dǎo)TIM-3的表達(dá)，主要是在未成熟的CD56^bright NK細(xì)胞中,。IL-12和IL-18誘導(dǎo)的NK細(xì)胞活化和IL-15誘導(dǎo)的成熟是TIM-3在這些細(xì)胞中表達(dá)的主要原因，識(shí)別出TIM-3在NK細(xì)胞中的表達(dá)作為活化和分化或兩者兼而有之的標(biāo)記,。TIM-3在外周NK細(xì)胞中的上調(diào)在一些癌癥中被觀察到，即胃癌,、肺腺癌,、晚期黑色素瘤和膀胱癌,，導(dǎo)致NK細(xì)胞衰竭,。腫瘤生長(zhǎng)的NK細(xì)胞中TIM-3水平的增加表明TIM-3的表達(dá)是一個(gè)預(yù)后的生物標(biāo)志物。GIST（胃腸道間質(zhì)瘤）和膀胱癌患者的腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞也表達(dá)TIM-3,。與TIM-3和PD-1在T細(xì)胞中的共表達(dá)相似，衰竭的腫瘤浸潤(rùn)NK細(xì)胞在MHC-I缺陷腫瘤中也顯示出可檢測(cè)的共表達(dá)。然而，GIST患者在TIM-3+腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞中缺乏PD-1共表達(dá)。

CD200R是另一種在T、B、NK和髓系細(xì)胞上表達(dá)的抑制性受體,。它識(shí)別CD200作為其配體，除了在各種腫瘤上表達(dá)外,，CD200還表達(dá)于各種正常組織，如中樞神經(jīng)系統(tǒng)、視網(wǎng)膜、毛囊細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞，以及活化的T,、B和DC細(xì)胞,。CD200被認(rèn)為是腫瘤進(jìn)展的標(biāo)志物，因?yàn)樗谠煅头窃煅吹母鞣N癌癥上過度表達(dá)，如急性髓系白血病、多發(fā)性骨髓瘤、毛細(xì)胞白血病、B細(xì)胞慢性白血病,、黑色素瘤、卵巢癌、直腸癌和膀胱癌,，其表達(dá)與最差預(yù)后相關(guān),。此外,，CD200的表達(dá)也可以誘導(dǎo)癌細(xì)胞,。事實(shí)上，癌細(xì)胞表達(dá)CD200對(duì)CD200–CD200R信號(hào)抑制抗癌反應(yīng)沒有影響,。因此,，CD200阻斷劑是一種潛在的治療選擇，不局限于治療表達(dá)CD200的腫瘤,。抑制性CD200-CD200R通路通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞和DC細(xì)胞間接抑制T細(xì)胞的效應(yīng)器功能,。因此，阻斷CD200–CD200R的相互作用可以抑制腫瘤生長(zhǎng),，這支持了拮抗性CD200或CD200R抗體作為癌癥治療的一種選擇,。Samalizumab（人源化抗CD200抗體）耐受性良好，CD4陽性T細(xì)胞和CD200陽性B-CLL呈劑量依賴性變化,，Th1細(xì)胞因子反應(yīng)中等,。

對(duì)于NK細(xì)胞，有證據(jù)表明CD200–CD200R抑制途徑直接參與了NK細(xì)胞的抑制,。在AML患者中,，CD200的過度表達(dá)抑制了NK細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)，從而增加了這些患者復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。AML患者的NK細(xì)胞亞群表達(dá)CD200R，提示CD200-CD200R相互作用抑制了NK細(xì)胞,。此外,，在CD200hi患者中,，阻斷CD200的抗體可恢復(fù)NK細(xì)胞的活性,。這些數(shù)據(jù)表明CD200-CD200R相互作用直接導(dǎo)致AML患者NK細(xì)胞的抑制。這是唯一直接表明表達(dá)CD200的靶細(xì)胞能夠抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性和IFNγ產(chǎn)生活性的研究。Liu等人在研究CD200+黑色素瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移限制中的CD200信號(hào)部分時(shí)發(fā)現(xiàn)，在CD200缺乏的轉(zhuǎn)移性腫瘤生長(zhǎng)的肝臟中,，NK細(xì)胞的數(shù)量顯著減少,。然而,，CD200缺乏如何影響肝臟局部NK反應(yīng)仍有待解釋。這提示CD200-CD200R檢查點(diǎn)是血液學(xué)和實(shí)體瘤檢查點(diǎn)阻斷的一個(gè)很好的靶點(diǎn),。由于NK細(xì)胞與AML和多發(fā)性骨髓瘤中的其他檢查點(diǎn)受體（如KIR和NKG2A）相關(guān),，因此在這類患者中可以驗(yàn)證聯(lián)合檢查點(diǎn)靶點(diǎn),。

CD47，也被稱為整合素相關(guān)蛋白（IAP），是免疫球蛋白超家族中廣泛表達(dá)的糖蛋白。其作為參與β3整合素介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的白細(xì)胞膜蛋白被首次發(fā)現(xiàn),。它是一種跨膜蛋白,，除了整合素外,，還與血小板反應(yīng)蛋白-1（TSP-1）和信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）相互作用,。在CD47所執(zhí)行的功能中,，它與SIRPα和TSP-1的結(jié)合，確立了其作為一種抑制受體的作用,，通過抑制吞噬,、抗原呈遞和T/NK細(xì)胞抑制參與癌癥的免疫逃避。因此,，用抗體靶向這個(gè)信號(hào)通路顯示出潛在的治療腫瘤的能力,。

CD-47在NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗病毒或抗腫瘤細(xì)胞毒性中起抑制作用。NK細(xì)胞毒性與HNSCC細(xì)胞CD47表達(dá)有關(guān),。高表達(dá)CD47的HNSCC細(xì)胞株表現(xiàn)出較低水平的NK細(xì)胞毒性,。用中和MHC-1或抗CD47抗體預(yù)處理細(xì)胞可增加NK細(xì)胞對(duì)HNSCC細(xì)胞系的細(xì)胞毒性。SIRPα和TSP-1均與NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性有關(guān),。在免疫功能正常的同基因小鼠中,，抗SIRPα抗體通過阻斷CD47的相互作用而顯著抑制RCC或黑色素瘤細(xì)胞的腫瘤形成。除了巨噬細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞外,，NK細(xì)胞的選擇性耗竭大大削弱了抗SIRPαAb的抗腫瘤作用,。然而，在體外,，NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用不受同一抗體的抑制,，提示NK細(xì)胞的CD47功能與SIRPα無關(guān)。與此類似,，TSP-1也被證明在抑制NK細(xì)胞早期增殖和促進(jìn)晚期擴(kuò)張中發(fā)揮作用,，但CD47的作用尚未被證實(shí)。因此,，在這方面仍有許多問題有待解決,。然而，用抗體攻擊CD-47是值得探索的，不僅在巨噬細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞,，而且在NK細(xì)胞。CD47與PD-L1的雙重阻斷作用也已被研究,，并被證明能增強(qiáng)對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的免疫治療作用,。抗CD47抗體Magrolimab（Hu5F9-G4）正在多個(gè)I期和II期臨床試驗(yàn)中與其他藥物（如利妥昔單抗,、西妥昔單抗,、阿扎胞苷、acalabrutinib和atezolizumab等）進(jìn)行不同組合的研究,。

CTLA-4（細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4）是一種共抑制受體,，可在多種免疫細(xì)胞上表達(dá)，如荷瘤小鼠的活化T淋巴細(xì)胞（CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞）,、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,、腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞和脾臟Kit+CD11b?NK細(xì)胞，并在IL-2刺激下誘導(dǎo)小鼠NK細(xì)胞,。CTLA-4與共刺激受體CD28競(jìng)爭(zhēng)癌細(xì)胞或抗原呈遞細(xì)胞上的配體B7-1（CD80）和B7-2（CD86）,。CTLA-4被公認(rèn)為T細(xì)胞活化的負(fù)調(diào)節(jié)因子和外周T細(xì)胞耐受性和自身反應(yīng)性的調(diào)控者。用抗體阻斷CTLA-4（ipilimumab）可以改善各種癌癥的T細(xì)胞功能,。

已有研究表明CTLA-4/CD28/CD80/CD86通路參與NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性,。在體內(nèi)，CD28觸發(fā)NK細(xì)胞的增殖,，它們的細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子的分泌已經(jīng)在許多研究中被描述,。癌細(xì)胞上的配體B7-1和B7-2似乎也能提高人類NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。同樣,，NK細(xì)胞表達(dá)的CTLA-4作用樹突狀細(xì)胞的B7-1可以抑制IFN-γ的產(chǎn)生,。在小鼠中，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的IL-18可誘導(dǎo)具有B7-H1依賴性免疫清除功能的Kit+CD11b?NK細(xì)胞,。Kit+CD11b?NK細(xì)胞也報(bào)告CTLA-4上調(diào),；然而，其在NK細(xì)胞控制的癌癥中參與腫瘤進(jìn)展的情況尚未被研究,。這些研究揭示了這一途徑在NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性中的不可否認(rèn)的作用,。然而，人類NK細(xì)胞中不存在CD80-CD28/CTLA-4介導(dǎo)的共刺激,。共刺激CD28/B7也被否認(rèn)在小鼠CMV感染的外周NK細(xì)胞中起任何重要作用,。

CTLA-4+腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞是一個(gè)基于抗CTLA-4單克隆抗體的前瞻性免疫治療靶點(diǎn)。如上圖所示,，阻斷CTLA-4可能間接地減輕被抑制的NK細(xì)胞,。CTLA-4在Tregs上的表達(dá)被認(rèn)為是其抑制功能所必需的,。在西妥昔單抗治療的頭頸部癌患者中，NK細(xì)胞毒性抑制和CTLA-4陽性Tregs增加與預(yù)后不良相關(guān),。Ipilimumab是一種抗CTLA-4單克隆抗體,，導(dǎo)致Tregs的耗竭，以Fc介導(dǎo)的方式對(duì)黑色素瘤患者產(chǎn)生臨床療效,，部分原因可能是由于減輕了Tregs對(duì)NK細(xì)胞毒性的抑制,。Ipilimumab還可以通過原代NK細(xì)胞以及IL-2激活的NK細(xì)胞和γδT細(xì)胞上的FcyRIIIA與黑色素瘤細(xì)胞系和組織上的CTLA-4反應(yīng)來觸發(fā)ADCC作用。此外,，Ipilimumab和CTLA-4陽性黑色素瘤細(xì)胞的相互作用也導(dǎo)致NK細(xì)胞釋放TNF-α,。CTLA-4阻斷和IL-2免疫治療聯(lián)合應(yīng)用可延緩黑色素瘤的生長(zhǎng)和延長(zhǎng)生存期，顯示協(xié)同作用,。CTLA-4阻斷可增加免疫細(xì)胞（包括CD8陽性T細(xì)胞和NK細(xì)胞）的腫瘤浸潤(rùn),，而IL-2可降低腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞耗盡和分化的比例。Ipilimumab在NK細(xì)胞表型上誘導(dǎo)IL-2Rα鏈表達(dá),，隨后增強(qiáng)對(duì)IL-2刺激和細(xì)胞毒性的反應(yīng),，這與晚期黑色素瘤患者更好的臨床反應(yīng)相關(guān)。

程序性死亡受體-1（PD-1）在各種免疫細(xì)胞上表達(dá),，包括T細(xì)胞（CD4+&CD8+）,、B細(xì)胞和髓細(xì)胞,、NK細(xì)胞,、NKT細(xì)胞和其他固有淋巴細(xì)胞。PD-1,、PD-L1和PD-L2配體的上調(diào)在各種癌癥中已有報(bào)道,，它們的相互作用導(dǎo)致T細(xì)胞抑制，導(dǎo)致免疫逃逸,。大約四分之一健康人的外周血中可檢測(cè)到NK細(xì)胞上PD-1的高表達(dá),。然而，在癌癥患者,，如卵巢癌患者的腹水,、卡波西肉瘤患者的外周血、腎細(xì)胞癌和多發(fā)性骨髓瘤患者中,，NK細(xì)胞上PD-1的表達(dá)上調(diào),。在消化道癌，如食道癌,、胃癌,、膽管癌、肝癌和結(jié)直腸癌中,，外周血NK細(xì)胞和腫瘤浸潤(rùn)性NK細(xì)胞也同樣上調(diào),。慢性感染如HIV（人類免疫缺陷病毒）,、HCV（丙型肝炎病毒）、HCMV（人類巨細(xì)胞病毒）和結(jié)核分枝桿菌也顯示出NK細(xì)胞PD-1表達(dá)增強(qiáng),。

PD-1在NK細(xì)胞上的表達(dá)是多種多樣的,，因癌癥而異。PD-1在CD56^bright NK細(xì)胞中普遍缺乏表達(dá),。然而,，CD56^dimNK細(xì)胞已證明PD-1表達(dá)受限于NKG2A?KIR+CD57+表型，一種完全成熟的NK細(xì)胞,。NKG2A?KIR+CD57+表型NK細(xì)胞被認(rèn)為具有顯著下調(diào)的激活受體,，如NKp30和NKp46。此外,，PD-1表達(dá)與NK細(xì)胞抗腫瘤活性受損之間存在相關(guān)性,，而抗體干擾PD-1和PD-L1的相互作用導(dǎo)致部分修復(fù)。PTLD兒童移植患者也顯示出NK細(xì)胞功能改變,，PD-1增加,，NKp46和NKG2D表達(dá)降低。另一方面,，CD56^bright  NK細(xì)胞在慢性HCV患者中表達(dá)PD-1,。同時(shí)，在消化道癌癥患者中,，兩種類型的NK細(xì)胞（CD56^bright 和CD56^dimNK細(xì)胞）都顯示PD-1表達(dá)增加,。此外，新發(fā)現(xiàn)的肝癌組織中浸潤(rùn)的CD3?CD49a+CD56+NK細(xì)胞也顯示其表面有大量PD-1表達(dá),，這與肝細(xì)胞癌患者的生存率降低有關(guān),。

在一些癌癥中，NK細(xì)胞PD-1表達(dá)上調(diào)表明NK細(xì)胞處于功能失調(diào)狀態(tài),，可能是由于缺乏MHC-I的腫瘤細(xì)胞過度刺激所致,。比較PD-1+NK細(xì)胞和PD-1-NK細(xì)胞發(fā)現(xiàn)PD-1+NK細(xì)胞功能衰竭，細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子生成受損,，增殖能力降低,。抗PD-1單抗的阻斷已被證明能恢復(fù)NK細(xì)胞的功能,。小鼠腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-1,，抗PD-1阻斷劑誘導(dǎo)NK細(xì)胞產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答。在體外,，抗PD-1抗體增強(qiáng)了NK細(xì)胞介導(dǎo)的對(duì)自體MM細(xì)胞的殺傷作用,。PD-1阻斷劑也促進(jìn)了小鼠NK細(xì)胞對(duì)小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的殺傷作用。

B7同源物3蛋白（B7-H3）是B7-CD28家族的配體分子,，其受體可能存在于T細(xì)胞和NK細(xì)胞上,，它似乎可以同時(shí)抑制T細(xì)胞和NK細(xì)胞的功能,，但尚未被證實(shí)。B7-H3被認(rèn)為可以同時(shí)共刺激和共抑制來調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能,。B7-H3通過與TLT-2結(jié)合來刺激T細(xì)胞活化,，而與未知受體的結(jié)合導(dǎo)致T細(xì)胞的共同抑制。同時(shí),，通過激活未知受體,，它可以抑制NK細(xì)胞和成骨細(xì)胞。

B7-H3在胰腺,、肝臟,、小腸、結(jié)腸,、心臟,、胸腺、脾臟,、胎盤和睪丸等各種正常組織上的表達(dá)有限,。然而，B7-H3的異常表達(dá)可見于各種與預(yù)后不良相關(guān)的惡性腫瘤,，包括腎細(xì)胞癌,、乳腺癌、肺癌,、食管鱗癌,、胃癌、胰腺癌,、膽囊癌,、結(jié)直腸癌,、前列腺癌,、卵巢癌、宮頸癌,、子宮內(nèi)膜癌,、骨肉瘤，神經(jīng)母細(xì)胞瘤,。肺癌,、腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞癌,、結(jié)直腸癌和膠質(zhì)瘤患者的循環(huán)血清B7-H3水平顯著高于健康志愿者,。抑制NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性是B7-H3表達(dá)細(xì)胞逃避腫瘤的多種機(jī)制之一。膠質(zhì)瘤的惡性程度和生存率降低與腫瘤和內(nèi)皮細(xì)胞中B7-H3的表達(dá)有關(guān),。膠質(zhì)瘤細(xì)胞上清液中可溶性B7-H3和細(xì)胞結(jié)合B7-H3均能抑制自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞溶解,。在B7-H3沉默的膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的體內(nèi)模型中證實(shí)了對(duì)殺傷的敏感性,。單克隆抗體介導(dǎo)的4Ig-B7-H3分子被鑒定為神經(jīng)母細(xì)胞瘤相關(guān)分子，對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)染物或新分離的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞進(jìn)行掩蔽,，保護(hù)其不被NK細(xì)胞殺死,。類似地，在卵巢囊性畸胎瘤中的神經(jīng)母細(xì)胞瘤中,，除了大量的HLA-I類分子外還表達(dá)B7-H3,，這表明神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞介導(dǎo)的溶解具有保護(hù)性的免疫逃避機(jī)制。此外,，與來自外周血的NK細(xì)胞相比,，這些患者腹腔液分離的NK細(xì)胞上DNAM-1（CD226）和CD16等受體的表達(dá)強(qiáng)度較低。以B7-H3作為靶點(diǎn)的BiKE雙特異性抗體在治療NSCLC時(shí),，可以通過誘導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞顯著抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),。

B7-H3結(jié)合Fc優(yōu)化的人源化IgG1單克隆抗體，Enoblituzumab,，目前正在探索中,。它已經(jīng)被證明可以抑制B7-H3陽性的腎和膀胱癌移植物的腫瘤生長(zhǎng)。MGA271是一種Fc優(yōu)化的靶向B7-H3的人源化單克隆抗體,，已在幾種腫瘤類型中顯示出安全性和抗腫瘤療效,。這種抗腫瘤活性歸因于患者T細(xì)胞克隆性的增加。Enoblituzumab的進(jìn)一步鑒定,，包括其藥理學(xué)動(dòng)力學(xué)和動(dòng)力學(xué),，以及其安全性、劑量耐受性和抗腫瘤活性,，以對(duì)抗年輕患者中B7-H3受體陽性表達(dá)的復(fù)發(fā)或難治性實(shí)體惡性腫瘤,，正在一項(xiàng)開放標(biāo)簽I期研究（NCT02982941）中進(jìn)行評(píng)估。Orlotamab（MGD009,，一種人源化B7-H3 x CD3 DART?蛋白）,，是一種除B7-H3外靶向CD3的雙特異性抗體，由Macrgenenics開發(fā),，目前正在進(jìn)行臨床研究（NCT03406949）,，評(píng)估該抗體與抗PD-1抗體（MGA012）聯(lián)合治療B7-H3表達(dá)的復(fù)發(fā)或難治性腫瘤的安全性和有效性?？偠灾?，B7-H3是一種潛在的基于檢查點(diǎn)的針對(duì)T細(xì)胞和NK細(xì)胞的免疫治療的候選物。

自然殺傷細(xì)胞是一組獨(dú)特的抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞,，具有不受MHC限制的細(xì)胞毒性,、產(chǎn)生細(xì)胞因子和免疫記憶等功能，使其成為先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)系統(tǒng)中的關(guān)鍵角色,。一些癌癥的發(fā)生與功能失調(diào)的NK細(xì)胞有關(guān),。因此,，修復(fù)這種NK細(xì)胞可能是抗腫瘤免疫治療的一個(gè)潛在選擇。這種修復(fù)的一種方法是抑制免疫檢查點(diǎn),，即癌細(xì)胞通過控制免疫細(xì)胞表面的抑制受體進(jìn)行免疫逃逸,。免疫檢查點(diǎn)抑制在T細(xì)胞的情況下是成功的。NK細(xì)胞最近也被用于同樣的目的,。針對(duì)NK細(xì)胞表面的這些抑制受體的免疫檢查點(diǎn)抑制劑,，如monalizumab和lirilumab，已作為單藥治療進(jìn)行,，并顯示出良好的安全性,，但僅在延長(zhǎng)無進(jìn)展生存期方面取得了輕微成功。因此,，免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如CTLA-4和PD-1抑制劑）的組合也可以在NK細(xì)胞的背景下嘗試,，因?yàn)榭筆D-1和抗PD-L1抑制劑也被證明可以增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性。同樣,，NKG2A增強(qiáng)腫瘤疫苗誘導(dǎo)的CD8 T細(xì)胞免疫也強(qiáng)調(diào)了聯(lián)合治療的潛力,。因此，結(jié)合抗PD-1或抗PD-L1抑制劑和NK細(xì)胞特異性檢查點(diǎn)抑制劑（如抗KIR或抗NKG2A抑制劑）可用于基于檢查點(diǎn)抑制的聯(lián)合免疫治療,。隨著B7-H3,、CD200R、CD47和Siglecs7/9等新的檢查點(diǎn)的加入,，將這些檢查點(diǎn)結(jié)合起來進(jìn)行協(xié)同抗腫瘤反應(yīng)是未來充分發(fā)揮NK細(xì)胞殺傷腫瘤作用的方向,。

參考文獻(xiàn)：

1.NK Cell-Based Immune Checkpoint Inhibition. Front. Immunol., 13 February 2020