截止2021.6.11，中國疫苗接種數(shù)量已經(jīng)超過8億6千萬劑次,；國內(nèi)企業(yè)也早就推出了各類的抗體檢測產(chǎn)品,，包括總抗體和中和抗體檢測,。對于疫苗效果評估來說，最好的方法還是中和抗體的檢測,。但到目前為止,，并沒有一項研究明確多少濃度的中和抗體對于新冠具有保護(hù)作用，故目前的檢測仍以定性檢測為主,，即判斷抗體的有無,。

世界衛(wèi)生組織（WHO）通過國際實驗室間的協(xié)作標(biāo)定，發(fā)布了新冠抗體的第一代國際標(biāo)準(zhǔn)品（NIBSC code: 20/136 ）,，確定了中和抗體的國際單位濃度,，為后續(xù)定量研究奠定了基礎(chǔ)，下一步可通過研究明確新冠中和抗體的有效保護(hù)濃度,，如乙型肝炎病毒表面抗體以10mIU/mL為臨界一樣,。

除了20/136外，WHO還推出了另外兩個新冠抗體相關(guān)產(chǎn)品,，分別是20/268和20/130,，即國際參考盤和研發(fā)用質(zhì)控品。

今天就來說一下這幾個產(chǎn)品如何使用,。

    兩個基本概念    

1）新冠抗體檢測和新冠抗體中和抗體檢測的區(qū)別,。

如果沒有特殊說明的話,，新冠抗體檢測的是總抗體,，包括IgG，IgM等不同亞型的抗體,、針對不同的抗原表位（根據(jù)產(chǎn)品選擇使用的抗原）,，而中和抗體僅僅是總抗體中的一部分。

中和抗體是由病毒最外層的包膜或衣殼抗原刺激機體產(chǎn)生的一類能與病毒結(jié)合并使之喪失感染力的抗體,。中和抗體作用機制一般包括改變病毒表面構(gòu)型,；與吸附有關(guān)的病毒表位結(jié)合，阻止病毒吸附,，使病毒不能侵入細(xì)胞進(jìn)行增殖,；與病毒形成免疫復(fù)合物，易被巨噬細(xì)胞吞噬清除,；有包膜病毒的表面抗原與中和抗體結(jié)合后,，激活補體，可導(dǎo)致病毒的溶解,。這就為什么中和抗體檢測是疫苗研發(fā)和臨床評價過程中重要的指標(biāo)之一,。

2）中和抗體的檢測方法

中和抗體的金標(biāo)準(zhǔn)方法是中和試驗，即使用活病毒或者合成病毒與樣本反應(yīng),，檢測樣本中中和抗體對病毒的殺傷能力,，現(xiàn)在發(fā)表的疫苗臨床效果評價都是使用這種方法,。但這種方法對檢測的要求很高，不適合普通醫(yī)療檢測機構(gòu)推廣使用,。

另一種中和抗體的檢測是利用免疫反應(yīng)原理,，通過特定的抗原檢測相應(yīng)的中和抗體，通俗來說就是把中和抗體從新冠的總抗體中“識別”出來,，這種方法適合普通醫(yī)療檢測機構(gòu)推廣使用,，關(guān)鍵就在抗原的選擇。

    WHO關(guān)于新冠抗體的三個產(chǎn)品    

1）WHO三種不同的新冠抗體產(chǎn)品,，具體見表1

表1 WHO三種不同的新冠抗體產(chǎn)品

2）20/136和20/268的協(xié)作定標(biāo)過程,。

WHO于2020年7-10月，總共匯總了15個國家的44個試驗室的125種方法的結(jié)果,，進(jìn)行協(xié)作定標(biāo),；因為樣本入境許可的問題，原計劃參加協(xié)作定標(biāo)的3個中國大陸試驗室未能參與,，中國僅香港大學(xué)的一個試驗室參與,。

中和抗體濃度的協(xié)作標(biāo)定匯總了27個中和試驗方法的結(jié)果，其中15個方法使用了天然病毒,，其余是使用合成病毒,；結(jié)合抗體的濃度標(biāo)定匯總了98個方法的結(jié)果，包括78個ELISA方法,，16個流式細(xì)胞檢測,，2個免疫層析法，2個抑制試驗,；其中抗原以RBD,、S1、N和Spike 蛋白四種類型為主,，檢測的亞型主要為總抗體或IgG,，還包括了IgM（3個方法），IgA（5個方法）,。

協(xié)作標(biāo)定組將國際標(biāo)準(zhǔn)品20/136的中和抗體濃度和結(jié)合抗體濃度都設(shè)定在1000,，單位分別是IU/mL（國際單位，International Units）和BAU/mL（結(jié)合抗體單位,，Binding Antibody Units）;要注意,，雖然都是1000，但是中和抗體和結(jié)合抗體單位不同,，實際濃度也不同,；結(jié)合抗體中針對不同抗原類別的反應(yīng)性也不相同，只是都賦值為1000。

用20/136為1000的濃度單位對國際參考盤20/268中的四個樣本進(jìn)行賦值,，確定各樣本的不同抗體濃度,，包括中和抗體以及針對四個不同的抗原（RBD、S1,、N和Spike）的IgG的濃度（IgA和IgM由于得到數(shù)據(jù)過少,，無法統(tǒng)計分析），四個樣本覆蓋了高中低不同濃度,。

對于診斷試劑廠家來說,，開發(fā)定量產(chǎn)品，應(yīng)先用20/136對產(chǎn)品進(jìn)行量值溯源,，然后使用20/268對試劑進(jìn)行評估,，根據(jù)產(chǎn)品檢測抗體的類型對應(yīng)相應(yīng)濃度，評價產(chǎn)品的準(zhǔn)確度,。而20/130可以在研發(fā)過程中使用,，但是不能用來評估定量準(zhǔn)確度。