1. En bloc release of MVB-like small extracellular vesicle clusters by colorectal carcinoma cells.

通過結(jié)腸直腸癌細(xì)胞整體釋放MVB樣小細(xì)胞外囊泡簇,。

[J Extracell Vesicles ]  PMID：31007874

摘要：小細(xì)胞外囊泡（sEV）是膜封閉的結(jié)構(gòu)，其通常在多泡體（MVB）的胞吐作用下從細(xì)胞釋放,，作為單獨的游離的細(xì)胞外囊泡的集合,。在這項研究中，我們分析了人類結(jié)直腸癌石蠟包埋樣本,。我們研究了共聚焦顯微圖像的三維重建,，輔以HyVolution和STED成像。出乎意料的是,，我們發(fā)現(xiàn)有證據(jù)表明ALIX / CD63陽性EV簇的大型MVB樣聚集體從遷移腫瘤細(xì)胞整體釋放出來,。這些結(jié)構(gòu)通常在腫瘤細(xì)胞的質(zhì)膜和基質(zhì)的界面處以部分或完全的細(xì)胞外定位捕獲,。它們的直徑范圍在0.62和1.94μm之間（平均值±S.D：1.17±0.34μm）,。高分辨率3D重建顯示這些細(xì)胞外MVB樣EV簇由可區(qū)分的小EV尺寸的內(nèi)部顆粒組成（平均值±S.D：128.96±16.73nm）。在體外,，HT29結(jié)腸直腸癌細(xì)胞在免疫組織化學(xué)和免疫電子顯微鏡下顯現(xiàn)出相似結(jié)構(gòu)的釋放,。我們的結(jié)果提供了通過質(zhì)膜整體傳播MVB樣EV簇的證據(jù)?；诿庖邿晒獾腗VB（如病理樣本中的小EV群集）的檢測可以代表一種新穎且獨特的可能性,，其能夠分析人體組織中的原位EV釋放。

PS：文章介紹了一個新的發(fā)現(xiàn),，即在遷移的細(xì)胞可以通過MVB方式釋放小細(xì)胞外囊泡集合體,。這個發(fā)現(xiàn)很有意思，這可能暗示著新的細(xì)胞外囊泡釋放方式,，同時也提示我們可能一些大的囊泡中也存在著小細(xì)胞外囊泡,。這篇文章是hzangs第一時間想起了之前清華大學(xué)發(fā)表在cell research上的一篇論文：Discovery of the migrasome, an organelle mediating release of cytoplasmic contents during cell migration。兩篇文章有很多相似點,，例如都是觀察到遷移細(xì)胞在釋放一些囊泡結(jié)構(gòu),。感興趣的朋友可以好好研究一下這兩篇文章。

2.  Metabolic signature of extracellular vesicles depends on the cell culture conditions.

細(xì)胞外囊泡的代謝特征取決于細(xì)胞培養(yǎng)條件,。

[J Extracell Vesicles ] PMID：31007875

摘要：細(xì)胞外囊泡（EV）研究中最大的瓶頸之一是使用體外細(xì)胞模型以一致和有效的方式產(chǎn)生足夠的材料。盡管與傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)物相比,，生物反應(yīng)器中EV的生產(chǎn)使EV產(chǎn)量最大化,，但其細(xì)胞生長條件對EV的影響尚未確定。在這項研究中,，我們在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)皿和雙室生物反應(yīng)器中培養(yǎng)了兩種前列腺癌細(xì)胞系PC-3和VCaP,，以闡明生長環(huán)境如何影響EV特征。具體而言，我們希望通過使用液相色譜 - 質(zhì)譜（LC-MS）分析的非靶向代謝物分析來研究生長條件依賴性差異,。EV還通過其形態(tài),，大小分布和EV蛋白標(biāo)記物表達(dá)來表征，并且通過NTA定量EV產(chǎn)量,。與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)相比,，使用生物反應(yīng)器使EV產(chǎn)量增加> 100倍。關(guān)于形態(tài),，尺寸分布和表面標(biāo)志物,，在生物反應(yīng)器衍生的EV（BR-EV）和從常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)物（C-EV）中生長的細(xì)胞獲得的EV之間僅觀察到微小差異。相比之下,，當(dāng)BR-EV與C-EV進(jìn)行比較時,，代謝組學(xué)分析顯示極性和非極性代謝物的統(tǒng)計學(xué)顯著差異。結(jié)果表明,，生長條件顯著影響EV代謝物譜,，代謝組學(xué)是研究EV分子差異的敏感工具。我們得出結(jié)論,，細(xì)胞外囊泡生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)條件應(yīng)該在論文中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化并仔細(xì)詳細(xì)說明,，并且當(dāng)來自不同生產(chǎn)平臺的細(xì)胞外囊泡相互比較以獲得系統(tǒng)效應(yīng)時應(yīng)該進(jìn)行謹(jǐn)慎的分析驗證。

PS：不同培養(yǎng)條件對細(xì)胞外囊泡成分的影響是目前研究比較少的,。這篇文章分析了在常規(guī)培養(yǎng)和生物反應(yīng)器培養(yǎng)條件下細(xì)胞外囊泡的產(chǎn)量和性質(zhì),。文章發(fā)現(xiàn)生物反應(yīng)器培養(yǎng)的細(xì)胞外囊泡釋放量要更高，同時也發(fā)現(xiàn)不同培養(yǎng)方式會明顯影響細(xì)胞外囊泡中代謝產(chǎn)物的組成和比例,。這篇文章還是很有指導(dǎo)意義的,，它表明當(dāng)我們將實驗室發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用時需要考慮不同細(xì)胞外囊泡生產(chǎn)方式可能對細(xì)胞外囊泡成分的影響。另外,，這篇文章表明我們需要謹(jǐn)慎并詳細(xì)的在論文發(fā)表時注明細(xì)胞外囊泡的生產(chǎn)方式,。再多說幾句，針對這篇文章,，大家不必糾結(jié)于使用什么方法培養(yǎng)細(xì)胞和收集細(xì)胞外囊泡,。這篇文章主要介紹了培養(yǎng)方式對細(xì)胞外囊泡內(nèi)容物的影響，并不存在說某種方法不好,。

3. Exosomes from N-Myc amplified neuroblastoma cells induce migration and confer chemoresistance to non-N-Myc amplified cells: implications of intra-tumour heterogeneity.

來自N-Myc擴增的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的外泌體誘導(dǎo)遷移并賦予非N-Myc擴增細(xì)胞化學(xué)抗性：腫瘤內(nèi)異質(zhì)性的影響,。

[J Extracell Vesicles ] PMID：31007876

摘要：神經(jīng)母細(xì)胞瘤占兒童癌癥死亡率的15％。致癌基因N-Myc的擴增是神經(jīng)母細(xì)胞瘤中研究成熟的不良預(yù)后標(biāo)志物,。雖然N-Myc擴增狀態(tài)與較高的腫瘤惡性和對治療的抗性強烈相關(guān),，但是N-Myc在疾病侵襲性中的作用知之甚少。外泌體由包括癌細(xì)胞在內(nèi)的許多細(xì)胞類型釋放,，并且通過分子貨物的轉(zhuǎn)移參與細(xì)胞 - 細(xì)胞通信,。因此,，表征來自N-Myc擴增和非擴增的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的外泌體蛋白質(zhì)組分將改善我們對它們在神經(jīng)母細(xì)胞瘤進(jìn)展中的作用的理解。在該研究中,，進(jìn)行了從具有不同N-Myc擴增狀態(tài)的細(xì)胞分離的外泌體的比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析,。無標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析顯示968種蛋白質(zhì)在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞釋放的外泌體中存在顯著差異?；贕O分析突出了N-Myc擴增的外泌體中參與細(xì)胞通訊和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白質(zhì)的富集,。用N-Myc擴增的SK-N-BE2細(xì)胞衍生的外泌體處理SH-SY5Y細(xì)胞能夠增加后者的遷移潛力，集落形成能力和賦予對阿霉素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的抗性,。來自N-Myc敲除了SK-N-BE2細(xì)胞的外泌體孵育則能夠消除對對阿霉素的抗性,。這些發(fā)現(xiàn)表明，外泌體可能在N-Myc驅(qū)動的侵襲性神經(jīng)母細(xì)胞瘤和細(xì)胞間化學(xué)抗性的轉(zhuǎn)移中發(fā)揮關(guān)鍵作用,。,。

PS：文章介紹了來自于N-Myc擴增的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的外泌體能夠促進(jìn)非N-Myc擴增的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的化療藥物耐受和遷移轉(zhuǎn)移過程。很多時候JEV上發(fā)表的文章可能并沒有很新穎的觀點,，但是JEV上的文章可靠性還是很好的,，實驗設(shè)計也很合理。文章對N-Myc擴增的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的外泌體進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)分析,，使用了超速離心和密度梯度離心對外泌體進(jìn)行純化,，這樣的數(shù)據(jù)有足夠的可靠性,。

4. Platelet HIF-2α promotes thrombogenicity through PAI-1 synthesis and extracellular vesicle release.

血小板HIF-2α通過PAI-1合成和細(xì)胞外囊泡釋放促進(jìn)血栓形成,。

[Haematologica] IF=9.09  PMID：31004026

摘要：像高海拔這樣的缺少氧氣的環(huán)境與血小板活動過度有關(guān)。血小板被限制在相對不透水的團(tuán)聚物/血栓核心內(nèi)影響了氧氣的獲得,，但它們繼續(xù)進(jìn)行維持血栓的能量密集的促凝活動,。因此，研究缺氧條件下的血小板信號傳導(dǎo)對于我們理解血栓穩(wěn)定性的機制基礎(chǔ)至關(guān)重要,。我們在此報道,，暴露于缺氧條件下會使缺氧誘導(dǎo)因子（HIF）-2α從預(yù)先存在于去核血小板的mRNA翻譯并且免于蛋白水解降解。低氧應(yīng)激也刺激血小板合成纖溶酶原激活物抑制劑（PAI）-1并通過細(xì)胞外囊泡脫落,，這兩者都可能導(dǎo)致與缺氧相關(guān)的促血栓形成表型,。通過向小鼠施用缺氧模擬物來穩(wěn)定HIF-α加速了腸系膜小動脈中的血栓形成。一致而言,，患有慢性阻塞性肺病的患者和具有血栓形成屬性的高海拔居民的血小板具有豐富的HIF-2α和PAI-1表達(dá),。因此，靶向血小板缺氧信號傳導(dǎo)可以是有效的抗血栓形成策略,。

PS：文章介紹了血小板在缺氧刺激下的一些反應(yīng),，例如HIF-α的翻譯和PAI-1通過細(xì)胞外囊泡釋放等，這些反應(yīng)都與血小板參與血栓形成相關(guān),。這些發(fā)現(xiàn)為抗血栓形成提供了潛在的治療靶點和策略,。

5. Direct quantification of cancerous exosomes via surface plasmon resonance with dual gold nanoparticle-assisted signal amplification.

通過雙金納米顆粒輔助信號放大的表面等離子共振直接定量癌外泌體,。

[Biosens Bioelectron] IF=8.173  PMID：31004923

摘要：對癌性外泌體的敏感檢測對早期疾病的診斷和預(yù)后至關(guān)重要。在此,，通過表面等離子體共振（SPR）和雙金納米顆粒（AuNP）輔助信號放大,，證明了靈敏的適體傳感器用于外泌體檢測。通過Au膜和AuNP之間的電子耦合產(chǎn)生的AuNP的受控雜交附著以及等離子體納米結(jié)構(gòu)中的偶聯(lián)效應(yīng)實現(xiàn)雙納米顆粒擴增,。通過用11-巰基-1-十一烷醇（MCU）封閉Au膜表面,，抑制了AuNP在SPR芯片表面上的非特異性吸附，并實現(xiàn)了SPR傳感器的再生,。該方法高度靈敏,，我們已將檢測限（LOD）降至5×10^3外泌體/ mL，與商業(yè)ELISA相比,，LOD提高了10^4倍,。此外，SPR傳感器具有區(qū)分MCF-7乳腺癌細(xì)胞和MCF-10A正常乳腺細(xì)胞分泌的外泌體的能力,。此外,，SPR傳感器可以有效地檢測30％胎牛血清中的外泌體。這項工作提供了一種靈敏有效的量化方法來檢測癌癥外泌體,，并為未來的外泌體診斷和綜合研究提供了一條途徑,。

PS：偏向于納米材料領(lǐng)域的文章。文章介紹了一種細(xì)胞外囊泡檢測方法,，靈敏度還是比較高的,，感興趣的可以了解一下。更多內(nèi)容請關(guān)注：湖南大學(xué)：通過雙金納米顆粒輔助信號放大的表面等離子共振直接定量癌外泌體

6. Neural stem cell-derived small extracellular vesicles attenuate apoptosis and neuroinflammation after traumatic spinal cord injury by activating autophagy.

神經(jīng)干細(xì)胞衍生的小細(xì)胞外囊泡通過激活自噬減輕創(chuàng)傷性脊髓損傷后的細(xì)胞凋亡和神經(jīng)炎癥,。

[Cell Death Dis] IF=5.638  PMID：31000697

摘要：脊髓損傷（SCI）可引起嚴(yán)重的不可逆運動功能障礙甚至死亡,。神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）移植可促進(jìn)實驗動物急性脊髓損傷后的功能恢復(fù)，但在常規(guī)臨床應(yīng)用可行之前,，需要解決許多問題,，包括低移植細(xì)胞存活率，細(xì)胞去分化和腫瘤形成風(fēng)險等,。最近的研究表明,，移植的干細(xì)胞通過釋放旁分泌因子促進(jìn)再生。小細(xì)胞外囊泡（sEV）是已知最小的膜結(jié)合納米囊泡,，參與復(fù)雜的細(xì)胞間通訊,，并且是旁分泌遞送治療劑的重要載體。然而,，尚未報道NSC衍生的小細(xì)胞外囊泡（NSC-sEVs）在SCI治療中的應(yīng)用,。我們證明NSC-sEV可以顯著降低SCI的程度，改善功能恢復(fù),，并減少大鼠的神經(jīng)細(xì)胞凋亡,，小膠質(zhì)細(xì)胞激活和神經(jīng)炎癥,。此外，我們的研究表明,，NSC-sEVs可通過誘導(dǎo)自噬來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和炎癥過程,。簡而言之，NSC-sEVs增加自噬標(biāo)記蛋白LC3B和beclin-1的表達(dá),，并促進(jìn)自噬體形成,。輸注NSC-sEV后，SCI區(qū)域顯著減少,，促凋亡蛋白Bax,，凋亡效應(yīng)細(xì)胞裂解的caspase-3和促炎細(xì)胞因子TNF-α，IL-1β和IL-6的表達(dá)水平均降低,。而抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平上調(diào),。然而，在自噬抑制劑3MA存在下,，NSC-sEVs對細(xì)胞凋亡和神經(jīng)炎癥的這些抑制作用被顯著逆轉(zhuǎn),。我們的研究結(jié)果首次表明，NSC-sEV治療有可能通過促進(jìn)自噬來減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡,，抑制神經(jīng)炎癥,，并促進(jìn)早期SCI模型大鼠的功能恢復(fù)。

PS：干細(xì)胞具有自我更新能力,，而近些年的一些研究表明,，干細(xì)胞的分泌組具有很明顯的損傷修復(fù)功能。隨著細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域研究的興起,，越來越多的文章報道發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞釋放的細(xì)胞外囊泡發(fā)揮著損傷修復(fù)的功能,。這篇文章介紹了神經(jīng)干細(xì)胞來源的細(xì)胞外囊泡對脊髓損傷的保護(hù)和修復(fù)作用,。

7. The roles of extracellular vesicles in gastric cancer development, microenvironment, anti-cancer drug resistance, and therapy.

細(xì)胞外囊泡在胃癌發(fā)展,，微環(huán)境，抗癌藥物耐藥和治療中的作用,。

[Mol Cancer] IF=7.776  PMID：30925929

摘要：由于診斷延遲和轉(zhuǎn)移頻率高,，胃癌（GC）是男性和女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一。細(xì)胞外囊泡（EV）是膜結(jié)合的納米囊泡,，其被細(xì)胞釋放到體液中,，例如血漿，唾液,，母乳,，腦脊液，精液,，尿液,，淋巴液,，羊水，痰液和滑液,。EV提供幾乎所有類型的生物分子,，如蛋白質(zhì)，核酸,，代謝物,，甚至藥理化合物。這些生物活性分子可以被遞送到受體細(xì)胞以影響它們的生物學(xué)特性,，改變周圍的微環(huán)境和遠(yuǎn)處的目標(biāo),。細(xì)胞外囊泡的廣泛探索增強了我們對GC生物學(xué)的理解，涉及腫瘤生長,，轉(zhuǎn)移,，免疫反應(yīng)和逃避，化療耐藥和治療,。在這篇綜述中,，我們將總結(jié)GC衍生的EV對腫瘤微環(huán)境的影響。此外,，我們還將總結(jié)微環(huán)境衍生的EV在GC中的功能,，并討論腫瘤與微環(huán)境之間的雙向通信如何影響GC生長，轉(zhuǎn)移行為,，免疫應(yīng)答和耐藥性,。最后，我們展望了細(xì)胞外囊泡的臨床應(yīng)用,。

PS：胃癌在國內(nèi)算是比較特色的腫瘤了,，國人的胃癌發(fā)病率還是比較高的。這篇綜述文章對目前胃癌領(lǐng)域細(xì)胞外囊泡的研究進(jìn)展進(jìn)行了匯總和展望,。

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