新冠中和抗體 ELISA 檢測試劑盒

（實驗前請仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書）

聲明：尊敬的客戶，感謝您選用本公司的產(chǎn)品,。本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!

產(chǎn)品介紹：

嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥冠狀病毒 2（SARS-CoV-2）是一種線性單股正鏈 RNA 病毒,。該病毒可引發(fā)新型冠狀病毒（COVID-19）肺炎,，在人群中傳播。SARS-CoV-2 病毒結(jié)構(gòu)蛋白,，包括刺突蛋白（S）,，包膜蛋白（E）,，膜蛋白（M）和核衣殼蛋白（N）,。刺突蛋白（S）包含受體結(jié)合域（RBD），負(fù)責(zé)識別細(xì)胞表面受體血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 2（ACE2）,。研究發(fā)現(xiàn),， S 蛋白的 RBD 與人 ACE2 受體相互作用，從而引起內(nèi)吞作用進入人的肺部深處,。

SARS-CoV-2 感染會引發(fā)機體的免疫反應(yīng),，其中包括在血液中產(chǎn)生抗體。這些抗體可防止病毒感染,，它們在感染后會保留在循環(huán)系統(tǒng)中數(shù)月乃至數(shù)年,，并且會與病原體迅速結(jié)合，從而阻止細(xì)胞浸潤和復(fù)制,。 這些抗體被稱為中和抗體,。

福因德生物研發(fā)的新冠中和抗體 ELISA 檢測試劑盒可以檢測樣品中針對 SARS-CoV-2 的中和抗體，該抗體可阻斷 RBD 蛋白的受體結(jié)合域與 ACE2 細(xì)胞表面受體之間的相互作用,。其可檢測血清和血漿中 中和 RBD 與 ACE2 相互作用的任何抗體,，不受種屬和亞型的限制。

儲存方法：

請按各個組分對應(yīng)的溫度存儲,，該試劑盒在各組分未拆封的情況下,，自生產(chǎn)之日起可存放6個月以上,。

試劑準(zhǔn)備

1.從冰箱中取出所有試劑，在使用前解凍至室溫（20℃至 25℃）,。 使用后應(yīng)立即將所有試劑保存在冰箱中,。

2.使用前應(yīng)將所有樣品和對照品進行離心。

3.Biotin-ACE2 制備：將 Biotin-ACE2 用 Reagent Dilution Buffer 以體積比 1：600 進行稀釋,。

例：10μL Biotin-ACE2 加入 5,990μL Reagent Dilution Buffer 制備成 6,000μL 的 Biotin-ACE2 溶液,。

4.Streptavidin-HRP溶液制備：Streptavidin-HRP 用 Reagent Dilution Buffer 以體積比 1：100 進行稀釋。

例：100μL Streptavidin-HRP加入9,900μL Reagent Dilution Buffer制備成10mL Streptavidin-HRP 溶液,。

5.1×Wash Solution 制備：將 20×Wash Solution 用 ddH2O 以體積比 1:20 進行稀釋,。

例如，380mL ddH2O 加入 20mL 20×Wash Solution 制備成 400mL 1×Wash Solution,。 儲存于 2℃-8℃,。

注意：如 20×Wash Solution 中有沉淀，請在水?。ㄗ罡?/span> 50℃）中溫育,、混合至沉淀溶解。

樣品和對照品稀釋

1.將陽性和陰性對照品用 Sample Dilution Buffer 以體積比 1:50 進行稀釋,。

例如,，10μL 樣品加入490μL Sample Dilution Buffer。

2.將測試樣品用 Sample Dilution Buffer 以體積比 1:10 進行稀釋,。

例如,，10μL 測試樣品加入90μL Sample Dilution Buffer。 

準(zhǔn)備捕獲板

1.所有陽性對照和陰性對照建議準(zhǔn)備兩份,。

2.根據(jù)測試樣品的數(shù)量對試紙條進行計數(shù)并安裝試紙條,。 確保條帶牢固地卡入板框。

3.將未使用的膠條留在鋁箔袋中,，-20°C 保存,。 條帶必須保存在密閉的鋁箔袋中，以防止水分損壞捕獲板,。

檢測步驟

中和反應(yīng)

1.在不同的管子里,，將稀釋后的陽性對照品、稀釋后的陰性對照品,、待測樣品分別與稀釋后的 Biotin- ACE2

溶液按 1:1 的體積比混合,。例如，將 60μL 的陽性對照與 60μL 的生物素- ACE2 溶液混合,。

2.將陽性對照混合物,，陰性對照混合物和樣品混合物各 100μL 加入相應(yīng)的孔中。

3.用平板密封膜覆蓋平板,，在 37℃ 下孵育 60 分鐘,。

4.取下平板密封膜,，用 300μL 的 1× Wash Solution 洗滌平板 3 次。

5.加入 100μL 稀釋的 SA-HRP 溶液到每個孔中,，用膜封閉平板并在 37℃下孵育 30 分鐘,。

6.取下平板密封膜，用 300μL 1× Wash Solution 洗滌平板 5 次,。

7.洗滌后將板子倒扣在紙巾上去除殘余液體,。

吸光值測量

1.每孔加入 100μL TMB溶液，在 37℃ 避光孵育 5 分鐘（在第一孔加入 TMB 溶液后開始計時）

2.每孔加入 50μL 終止液 Stop Solution 淬滅反應(yīng),。

3.讀數(shù)：讀取平板的OD 450 吸光值,。

注意：底物反應(yīng)時間與溫度有關(guān)，理想反應(yīng)溫度為 37℃,。如果溫度低于 37℃,，則應(yīng)適當(dāng)延長反應(yīng)時間。

*本試劑僅供實驗室研究使用