你是不是以前只知道tTreg、pTreg,、iTreg等分類,？

分類

你是不是以前只知道tTreg、pTreg,、iTreg等分類,？確實(shí)，定義Tregs的命名和分類多年來一直不一致,，但最近已經(jīng)在慢慢向標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展了,。目前建議將Foxp3 + Tregs明確分為：胸腺來源的tTregs、外周體內(nèi)誘導(dǎo)的pTregs,、體外誘導(dǎo)的iTregs,。 在過去,，tTregs經(jīng)常被稱為天然Tregs（nTregs），而pTregs和iTregs被歸為誘導(dǎo)或適應(yīng)性Tregs,。 由于沒有特異性方法可以區(qū)分tTregs或pTregs,，所以可以直接使用Tregs來指代Foxp3 + Tregs。后面提到的Treg,，無特殊指出,，默認(rèn)都是指Foxp3＋ Tregs。

除了FoxP3＋ Tregs,，還有大家可能不太了解的Foxp3-Treg群體,，如Tr1（分泌IL-10的1型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）和Th3（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）分泌型T輔助細(xì)胞-3）等，統(tǒng)稱為Foxp3-Tregs,，這個(gè)群體之前也被描述為誘導(dǎo)或適應(yīng)性Tregs,。雖然Foxp3 + Tregs和Foxp3-Tregs都具有抑制性，但它們的發(fā)育,、表型和功能不同,，因此它們被認(rèn)為是獨(dú)立的譜系。

下面用一張表來總結(jié)上面的分類：

上表中的Foxp3＋Treg抑制機(jī)制再詳細(xì)補(bǔ)充一下,，F(xiàn)oxp3 + Tregs可以抑制許多不同類型的效應(yīng)細(xì)胞,，并且還可以在多個(gè)階段抑制免疫應(yīng)答，包括淋巴結(jié)中的初始細(xì)胞和炎癥部位的效應(yīng)細(xì)胞,。 確切的機(jī)制尚不清楚,，但已經(jīng)提出了許多理論,，F(xiàn)oxp3 + Tregs很可能通過細(xì)胞接觸的方式,，競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合抗原遞呈細(xì)胞（APC）上的刺激配體、結(jié)合必需的生長(zhǎng)因子（如IL-2）,、或?qū)⑸形疵鞔_的負(fù)調(diào)控信號(hào)直接傳遞到T細(xì)胞或APC,。此外，Tregs也可以通過細(xì)胞因子IL-10,、IL-35和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)程抑制,。

Treg的發(fā)育

正常免疫系統(tǒng)中具有預(yù)防自身免疫作用的胸腺來源T細(xì)胞，首次報(bào)道于大約40年前,，當(dāng)時(shí)對(duì)小鼠出生第3天進(jìn)行胸腺切除術(shù),，發(fā)現(xiàn)可引起器官特異性自身免疫性疾病，如卵巢炎,；而不切除,，則小鼠一直健康。之后的研究表明,，如果胸腺切除的動(dòng)物用CD4 + CD8-胸腺細(xì)胞或CD4 +脾細(xì)胞重建,，可以抑制自身免疫性疾病的發(fā)展。

↑上圖是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）的發(fā)育途徑。 Treg細(xì)胞可以在胸腺或外周發(fā)育,，并且對(duì)于維持作為效應(yīng)T細(xì)胞的平衡的耐受性是至關(guān)重要的,。 胸腺生成的Tregs表達(dá)Foxp3，并在T細(xì)胞受體（TCR）和共刺激信號(hào)作用下在胸腺內(nèi)發(fā)育,。 CD4 + Tregs和CD8 + Tregs的外周發(fā)育由不同的宿主環(huán)境引起,，例如高濃度的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）或特殊抗原引發(fā),。 而控制γδT細(xì)胞和NKT細(xì)胞向具有調(diào)節(jié)特性的亞群分化機(jī)制（上圖虛線）,，目前還沒有明確。

Treg這樣分析可能更簡(jiǎn)單,、更有意義

在CD3＋CD4＋細(xì)胞群選擇之后,，分析CD25＋Foxp3＋的Treg，這是很經(jīng)典的設(shè)門,。在小鼠中,，5％至10％的CD4 + T細(xì)胞表達(dá)CD25，其中幾乎全部是Foxp3 +,，不過還是有少量表達(dá)Foxp3的細(xì)胞存在于CD4 + CD25-T細(xì)胞中,。在人的外周血中，表面標(biāo)志物CD25的表達(dá)與細(xì)胞內(nèi)FOXP3很好地相關(guān),，特別是當(dāng)CD25和FOXP3的水平高時(shí),。

因此，盡量利用CD25/Foxp3散點(diǎn)圖進(jìn)行設(shè)門：

選中Treg之后,，不能就這么結(jié)束了,。利用CD45RA和FOXP3的細(xì)胞內(nèi)表達(dá)可將FOXP3 + Tregs分為三個(gè)不同亞群：（1）高表達(dá)FOXP3、CD45RA-的效應(yīng)Treg細(xì)胞（藍(lán)色框）,；（2）低表達(dá)FOXP3,、CD45RA +的初始Treg細(xì)胞（紅色框）；（3）低表達(dá)FOXP3,、CD45RA-的非Treg細(xì)胞（紫色框）,。見下圖：

↑上面這個(gè)模式圖，我們可以更清楚地看出,，胸腺產(chǎn)生的Treg一開始是表現(xiàn)為CD45RA + FOXP3low初始Treg以及CD45RA +非Treg細(xì)胞兩種形式,，在抗原刺激后，初始Tregs分化成CD45RA + FOXP3高表達(dá)的效應(yīng)Tregs,，它們有效抑制并且能夠在體外抑制其他Tregs以及非Tregs的增殖,。

效應(yīng)Treg細(xì)胞在體內(nèi)對(duì)應(yīng)于增殖活躍的Treg細(xì)胞，因?yàn)樗鼈儽磉_(dá)Ki-67,，見下圖紫框：

臨床疾病與Treg

1,、自身免疫性疾病

天然Foxp3 + Tregs參與自身免疫疾病的主動(dòng)抑制,，減少就可導(dǎo)致嚙齒動(dòng)物中自身免疫疾病的自發(fā)發(fā)展。此外,，F(xiàn)oxp3功能的遺傳異?？赡苁侨祟惸承┳陨砻庖咝约膊〉闹苯釉颍鏘PEX綜合征的Foxp3/FOXP3基因具有功能喪失突變時(shí),，F(xiàn)OXP3 +調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）不能發(fā)育,，或Foxp3蛋白功能失調(diào)，可發(fā)展為致命的自身免疫/自身炎癥疾病,。 這種單基因X連鎖疾病直接證明了FOXP3 + Treg對(duì)維持自身耐受和免疫穩(wěn)態(tài)的重要性,。IPEX的基本特征是：·自身免疫性疾病（1型糖尿病,、甲狀腺炎,、溶血性貧血）·過敏（皮炎、高免疫球蛋白E血癥,、食物過敏）·炎癥性腸病

在其它系統(tǒng)性自身免疫性疾病中,，例如SLE、Sj?gren綜合征,、ANCA相關(guān)血管炎,、川崎病、系統(tǒng)性硬化癥,、牛皮癬,、自身免疫性肝炎、重癥肌無力和IBD中,，均已報(bào)道Foxp3 + Treg的數(shù)量或功能減少,。

Treg功能缺陷也需要引起關(guān)注。在對(duì)MS和1型糖尿病的研究中,，沒有發(fā)現(xiàn)患者和對(duì)照之間的任何差異,，并且在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）中也報(bào)道了關(guān)于CD25high Tregs的功能和數(shù)量的相互矛盾的數(shù)據(jù)。所以Tregs鑒定的準(zhǔn)確性,，在這些人體研究中必須考慮到這一點(diǎn)，用前述的評(píng)估Treg亞群,，結(jié)合其分泌細(xì)胞因子功能,，可能能帶來新的發(fā)現(xiàn)。

2,、過敏性疾病

CD25 +天然Tregs在抑制對(duì)無害環(huán)境物質(zhì)的過敏反應(yīng)中起重要作用,。 IPEX綜合征最能說明這一點(diǎn)，它不僅伴有器官特異性自身免疫性疾病,，還伴有嚴(yán)重的濕疹性皮炎,、高水平的血清免疫球蛋白E（IgE）,，有時(shí)還伴有嗜酸性粒細(xì)胞增多癥。在健康供者體外實(shí)驗(yàn)中,，用特異性過敏原刺激時(shí),，血液中的Tregs能抑制Th2細(xì)胞因子的增殖和產(chǎn)生。 如果使用來自患有過敏癥的個(gè)體的Tregs進(jìn)行相同的實(shí)驗(yàn),，則可以看到顯著的差異,，因?yàn)檫@些Tregs不能下調(diào)與過敏原的Th2相關(guān)反應(yīng)。 FOXP3 + Tregs,、Tr1和Breg的IL-10產(chǎn)生,，均與過敏反應(yīng)的控制有關(guān)。

3,、移植

器官移植的最終目標(biāo)是盡可能有效和穩(wěn)定地建立對(duì)同種異體器官移植物的耐受性,，并且不需要持續(xù)的免疫抑制。毋庸置疑,，Tregs在這個(gè)領(lǐng)域引起了很多關(guān)注,。首先，有研究顯示CD25 + Tregs在同種異體骨髓移植的鼠模型中抑制GvHD,。類似地,，移植有同種異體皮膚的裸鼠在用CD4 + CD25-T細(xì)胞單獨(dú)重建時(shí)發(fā)生移植物排斥，但是當(dāng)有足夠數(shù)量的CD25 + Treg時(shí),，移植物成功移植,。在人類中，已經(jīng)嘗試通過使用純化的CD25 + Tregs來預(yù)防骨髓移植中的GvHD并在器官移植中誘導(dǎo)移植物耐受性,。另一種評(píng)估各類免疫抑制劑在誘導(dǎo)Treg中的作用,，通過調(diào)整給藥的劑量和時(shí)間以及特定的藥物組合，誘導(dǎo)Treg遷移到移植物內(nèi),，誘導(dǎo)移植物耐受性和防止移植物排斥,。

4、癌癥

現(xiàn)在眾所周知,，患者T細(xì)胞識(shí)別的許多腫瘤相關(guān)抗原是正常的自身成分,，表明抗腫瘤免疫應(yīng)答也是在FOXP3 + Treg調(diào)控的范圍之內(nèi)。 因此,，正常免疫系統(tǒng)中天然Tregs的存在不僅可能阻止自身免疫,，還可能阻礙癌癥的免疫監(jiān)視。事實(shí)上,，F(xiàn)OXP3 + Tregs,，特別是高抑制性FOXP3高表達(dá)效應(yīng)Treg，在腫瘤塊中含量豐富,，可能會(huì)阻斷任何針對(duì)惡性細(xì)胞的免疫反應(yīng),。

Tregs參與腫瘤免疫表明,，抗腫瘤免疫應(yīng)答可以通過消除宿主中的Treg來激發(fā)或增強(qiáng)，否則其反應(yīng)很差,。不過,，基于Treg的癌癥療法可能會(huì)導(dǎo)致自身免疫性疾病，這取決于體內(nèi)全身性Tregs耗竭的程度和時(shí)間,，以及基因構(gòu)成,。除了表達(dá)Foxp3的Tregs外，MSDCs被認(rèn)為在腫瘤免疫抑制環(huán)境的建立和維持中起重要作用,，主要是通過產(chǎn)生免疫抑制細(xì)胞因子,，如IL-10和TGF-β、活性氧等,。

5,、感染性疾病

對(duì)感染因子（如細(xì)菌和病毒）的免疫反應(yīng)通常會(huì)導(dǎo)致組織損傷，如果不是Tregs的參與,，可能會(huì)更嚴(yán)重,。不過，在很多情況下,，Tregs可以促進(jìn)慢性感染的發(fā)展,。所以，Tregs對(duì)感染性反應(yīng)的調(diào)節(jié)可以限制組織損傷,，但可以增強(qiáng)病原體存活,。這種妥協(xié)不一定都是對(duì)機(jī)體不利的，例如,，在小鼠利什曼原蟲主要感染中,，Tregs阻止了免疫系統(tǒng)完全根除寄生蟲，這使得少量微生物持續(xù)存在,，這些微生物已被證明對(duì)于T細(xì)胞記憶的發(fā)育和預(yù)防再感染是必需的,。然而，這種微妙的平衡也可以對(duì)病原體有利,，例如在瘧疾和各種病毒感染例如人免疫缺陷病毒（HIV）等,。

參考：Clinical Immunology_ Principles and Practice-Elsevier (2018)