摘要：以地熊蜂工蜂為試材,，參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則》，測定7種溫室設(shè)施常用殺蟲劑對地熊蜂的毒力,，并對其進(jìn)行風(fēng)險性評價,。結(jié)果表明，烯啶蟲胺和吡蟲啉對地熊蜂的LD50值分別為0.030mg/L和0.223mg/L,，均為高毒,；苦參堿和吡蚜酮對地熊蜂的LDso分別為7.721mg/L和8.376mg/L,，均為中毒；啶蟲脒,、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對地熊蜂的LDso≥31.371mg/L,，均表現(xiàn)為低毒，其中氟苯蟲酰胺的毒性最低,。因此,，在設(shè)施作物上使用地熊蜂授粉時，建議禁用烯啶蟲胺和吡蟲啉,，且在施用苦參堿和吡蚜酮或啶蟲脒,、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺時，可將地熊蜂分別搬出溫室3天或l天,，來減少農(nóng)藥對地熊蜂的危害,。

　　關(guān)鍵詞：地熊蜂；溫室設(shè)施,；殺蟲劑,；毒力；安全評價

　　中圖分類號：S894.2

　　文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942（2016）02-0098-03

　　熊蜂為膜翅目（Hymenoptera）蜜蜂總科（Apoidea）熊蜂屬（Bombus）昆蟲,。相比較蜜蜂而言,，熊蜂具有吻長、飛行聲震大,、花粉采集能力強,、耐低溫和高濕環(huán)境和趨光性差等優(yōu)點，是公認(rèn)的溫室授粉最理想的昆蟲,。熊蜂在歐美等農(nóng)業(yè)發(fā)達(dá)國家已經(jīng)被廣泛應(yīng)用,，并取得了良好的生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益。我國熊蜂研究與應(yīng)用起步較晚,，地熊蜂（Bombus terrestris Linnaeus）為我國從荷蘭等國引進(jìn)的品種,，也是在全球范圍內(nèi)研究和商業(yè)化應(yīng)用最為成熟的熊蜂種類，應(yīng)用范圍廣,，在歐洲,、非洲北部、亞洲,、澳洲均有應(yīng)用,。隨著我國熊蜂研究的深入和相關(guān)條件的成熟，熊蜂在溫室設(shè)施內(nèi)的應(yīng)用越來越普遍,。

　　溫室設(shè)施內(nèi)高溫,、密閉小氣候環(huán)境和重茬種植使病蟲害的發(fā)生較為嚴(yán)重，其病蟲害防治主要以化學(xué)防治為主,，種類繁多的化學(xué)藥劑雖然防治了病蟲害,，保證了作物產(chǎn)量,，卻不可避免地對溫室熊蜂的使用產(chǎn)生了一定影響。本研究選取了7種近年來溫室設(shè)施常用殺蟲劑作為研究對象,，測定其對地熊蜂的毒力,，以期提出合理的農(nóng)藥使用方案，為地熊蜂授粉技術(shù)在溫室設(shè)施內(nèi)的推廣提供技術(shù)指導(dǎo),。

　　1 材料與方法

　　1.1 供試蜂種

　　供試蜂種為地熊蜂工蜂,，于溫度（25±2）℃、相對濕度（60±10）%,、黑暗條件下進(jìn)行飼養(yǎng),，飼養(yǎng)過程未接觸化學(xué)農(nóng)藥和試劑。試驗所用地熊蜂均為個體大小基本一致的健康成年工蜂,。

　　1.2 供試藥劑

　　供試藥劑為20%烯啶蟲胺水分散粒劑（北京華戎生物激素廠）,、10%吡蟲啉可濕性粉劑（浙江海正化工股份有限公司）、0.5%苦參堿水劑（日本農(nóng)藥株式會社）,、60%吡蚜酮水分散粒劑（北京華戎生物激素廠）、3%啶蟲脒微乳劑（昆明云大科技農(nóng)化有限公司）,、22.4%螺蟲乙脂懸浮劑（拜耳作物科學(xué)公司）和20%氟苯蟲酰胺水分散粒劑（日本農(nóng)藥株式會社）,。

　　1.3 試驗操作

　　依照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則》（GB/T 31270.10-2014）提出的蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗進(jìn)行。

　　1.3.1 試驗方法將各供試殺蟲劑母液用50%（質(zhì)量濃度,，蔗糖：水）蔗糖水溶液稀釋,，設(shè)置成等比的5個試驗濃度組（見表1），每組至少10只工蜂,，并設(shè)不加藥劑的蔗糖水為空白對照,。將挑選的工蜂引入試驗籠中，在飼喂器中加入100μL各試驗濃度藥液,。含藥蔗糖水消耗完后,，將飼喂器取出，換不含藥液的蔗糖水進(jìn)行飼喂（不限量）,。各處理均設(shè)3次重復(fù),。觀察記錄處理48 h后地熊蜂死亡數(shù)。

　　1.4 數(shù)據(jù)處理

　　用Spss 19.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和計算,，求出相應(yīng)的半致死劑量LDso,。依照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則》（GB/T 31270.10-2014）附錄《農(nóng)藥對蜜蜂毒性等級劃分》的劃分標(biāo)準(zhǔn)，按照蜜蜂急性經(jīng)口毒性半致死劑量LD50（48h）,，將農(nóng)藥對地熊蜂的毒性分為四個等級（劇毒LD50<0.001,，高毒0.001

11.0）。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 7種殺蟲劑對地熊蜂的毒力

　　7種殺蟲劑對地熊蜂的毒力測定結(jié)果見表2,。在供試的7種殺蟲劑中,，烯啶蟲胺對地熊蜂工蜂的毒力最高,，其次為吡蟲啉，毒力指數(shù)分別為9835.067和1323.103,；苦參堿和吡蚜酮對地熊蜂工蜂的毒力較高,，毒力指數(shù)分別為38.214和35.226；而啶蟲脒,、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對地熊蜂工蜂的毒力較低,，毒力指數(shù)<10，其中氟苯蟲酰胺的毒力最低,，毒力指數(shù)僅為1.000,。

　　2.2 風(fēng)險性評價

　　由表2可見，參照農(nóng)藥對蜜蜂的毒性分級,，烯啶蟲胺和吡蟲啉對地熊蜂48h的LDso值分別為0.030mg/L和0.223mg/L,，其毒性均為高毒，對地熊蜂具有較高風(fēng)險,；苦參堿和吡蚜酮對地熊蜂48h的LD50分別為7.721mg/L和8.376mg/L,，其毒性均為中毒，具有一定風(fēng)險,；啶蟲脒,、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對地熊蜂48h的LD50≥31.371mg/L，其毒性均為低毒,，風(fēng)險性較低,，其中氟苯蟲酰胺對地熊蜂的毒性最低。

　　3 討論與結(jié)論

　　烯啶蟲胺,、吡蟲啉和啶蟲脒屬于新煙堿類殺蟲劑,，具有較好的內(nèi)吸作用。本試驗結(jié)果表明,，烯啶蟲胺對地熊蜂的毒力最高,，其次為吡蟲啉，兩者對地熊蜂均表現(xiàn)為高毒,，而啶蟲脒表現(xiàn)為低毒,。季守民等通過急性接觸和急性經(jīng)口試驗表明烯啶蟲胺和吡蟲啉對意大利蜜蜂的毒性均為高毒，啶蟲脒對意大利蜜蜂的毒性為中毒,。于偉麗等通過攝人試驗以及間接接觸試驗表明,，100mg/L啶蟲脒72h內(nèi)對蜜蜂的致死率為O，對蜜蜂表現(xiàn)為低毒,。啶蟲脒是一種對人類低毒的殺蟲劑,，目前還沒有關(guān)于該藥“三致”和導(dǎo)致人類代謝紊亂及神經(jīng)失調(diào)方面的報道，其在土壤中的半衰期僅為0.14～2.6d,，正常田間使用濃度的啶蟲脒對土壤微生物群落無明顯影響,。

　　苦參堿為天然植物性農(nóng)藥,，屬于殺蟲殺菌劑，通過麻痹害蟲中樞神經(jīng)起作用,。韓志華等研究表明,，苦參堿對意大利蜜蜂的毒性表現(xiàn)為中毒。本試驗結(jié)果表明,，苦參堿對地熊蜂工蜂也表現(xiàn)為中毒,。

　　吡蚜酮屬于吡啶雜環(huán)類新型內(nèi)吸性殺蟲劑，通過拒食作用專一作用于刺吸式害蟲,，對地熊蜂表現(xiàn)為中毒,，國內(nèi)未見吡蚜酮對熊蜂毒性的報道。徐華強報道了吡蚜酮大田推薦劑量下處理赤眼蜂后,，赤眼蜂寄生率和壽命均顯著低于空白對照,。

　　螺蟲乙酯屬于季酮酸類化合物，具有雙向內(nèi)吸作用,，干擾昆蟲的脂肪生物合成導(dǎo)致幼蟲死亡,，并可降低成蟲的繁育能力，能有效防治多種刺吸式害蟲,，對設(shè)施蔬菜上常見害蟲如蚜蟲,、粉虱、薊馬等有較好防效,，且其與其他殺蟲劑無交互抗性,。氟苯蟲酰胺屬新型鄰苯二甲酰胺類殺蟲劑,，通過激活蘭尼堿受體細(xì)胞內(nèi)鈣釋放通道,，導(dǎo)致貯存鈣離子的失控性釋放起作用。鄰苯二甲酰胺類殺蟲劑為近幾年新開發(fā)的一類新型殺蟲劑,，自開發(fā)以來,，該類農(nóng)藥引起了農(nóng)藥界的廣泛關(guān)注，在設(shè)施作物上的使用也更頻繁,。氟苯蟲酰胺為人工合成的第一個魚尼丁受體殺蟲劑,，對絕大多數(shù)鱗翅目害蟲有良好的毒性。本研究表明啶蟲脒,、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對地熊蜂表現(xiàn)為低毒,，可代替其他高毒農(nóng)藥與地熊蜂一起在設(shè)施蔬菜上使用。

　　在溫室設(shè)施果蔬上使用授粉熊蜂時,，根據(jù)本試驗結(jié)果和各藥劑的安全間隔期,，提出以下用藥建議：禁止使用吡蟲啉和烯啶蟲胺2種高毒農(nóng)藥；在使用苦參堿和吡蚜酮2種中毒農(nóng)藥時,，將地熊蜂授粉群搬出溫室3天,；在使用啶蟲脒,、螺蟲乙脂和氟苯蟲酰胺3種低毒農(nóng)藥時，將地熊蜂授粉群搬出溫室1天,。

　　本試驗僅研究了室內(nèi)條件下7種殺蟲劑對地熊蜂的毒力,，對于溫室設(shè)施內(nèi)實際使用條件下7種殺蟲劑對地熊蜂的影響還有待進(jìn)一步觀察和研究。