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不容錯(cuò)過(guò)的外泌體(Exosome)研究方法外泌體

 梅子熟了00 2018-04-26

 本文首發(fā)公眾號(hào):德國(guó)美天旎生物


外泌體是由多種類型的細(xì)胞(如T細(xì)胞,、B細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞、血小板,、神經(jīng)元細(xì)胞和上皮細(xì)胞)分泌的一種囊泡狀結(jié)構(gòu),。它參與多種生物學(xué)過(guò)程,包括免疫監(jiān)控,、血液凝固,、神經(jīng)傳遞、干細(xì)胞維護(hù)和組織修復(fù)等,。
調(diào)查發(fā)現(xiàn),,在分離exosome時(shí),,約有56%的人采用超速離心法,該方法:
   ● 耗時(shí)耗力:需8-30個(gè)小時(shí)
   ● 處理樣本少:每次最多處理6個(gè)樣品
   ● 需要大量的起始材料
   ● 產(chǎn)量不高
另外,,由于外泌體體積小,,檢測(cè)也是一大難題。
總之,,外泌體的純化和檢測(cè)都給這一領(lǐng)域的研究帶來(lái)了不小的技術(shù)局限性

為解決上述難題,,美天旎研發(fā)了Exosome Isolation Kit,與傳統(tǒng)分離外泌體的方法(超速離心)相比,,磁珠分選有著明顯的技術(shù)優(yōu)勢(shì):
   ● 操作簡(jiǎn)單,,省時(shí)省力(無(wú)需超速離心)
   ● 樣本最小體積可低至0.5 mL
   ● 可同時(shí)快速篩選并檢測(cè)外泌體表面蛋白

目前有39種連接不同類型抗體的外泌體捕獲微球,利用流式細(xì)胞術(shù)可以檢測(cè)37種不同類型的外泌體和2種同型對(duì)照,。像人血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清中或者尿液、腹水中的外泌體,,我們建議使用Exosome Isolation Kit CD9, human, Exosome Isolation Kit CD63, human,,或者 Exosome Isolation Kit CD81,先進(jìn)行預(yù)富集,,然后再進(jìn)行后續(xù)的檢測(cè),。

簡(jiǎn)單五步,完成外泌體的純化和分析(以血漿為例):
    1,、將全血進(jìn)行離心處理,收集血漿,;
   2,、用Exosome Isolation MicroBeads CD9, human, Exosome Isolation MicroBeads CD63, human, 或 Exosome Isolation MicroBeads CD81, human與血漿共孵育1小時(shí);
   3,、將磁性包被的產(chǎn)物加到放置于μMACS分離器的μMACS分選柱中,;
   4、未結(jié)合磁珠的血漿成分順利流出分選柱,;
   5,、將μMACS分選柱移出磁場(chǎng),洗脫即可得到純化的外泌體,。


相關(guān)產(chǎn)品推薦:

貨號(hào) 產(chǎn)品 規(guī)格
130-110-913 Exosome Isolation Kit CD9,,human for 20 isolations
130-110-918 Exosome Isolation Kit CD63,human for 20 isolations
130-110-914 Exosome Isolation Kit CD81,,human for 20 isolations
130-110-912 Exosome Isolation Kit Pan,,human for 20 isolations
注:內(nèi)含磁珠試劑、分選柱及分選buffer


流式檢測(cè)原理示意圖:

外泌體流式分析產(chǎn)品:MACSPlex Exosome Kit, human (# 130-108-813),。

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