2003年，在高希希執(zhí)導(dǎo)的電視劇《歷史的天空》中飾演反一號“萬古碑”,，為人所熟知,。

2004年，參演電視劇《搭錯(cuò)車》,，飾演反一號蘇民生,。

2007年，出演高希希執(zhí)導(dǎo)的倫理情感劇《男人底線》,，飾演陰冷頑固的趙通達(dá),。

2007年，參演導(dǎo)演高希希執(zhí)導(dǎo)的電視劇《紙醉金迷》,，飾演一個(gè)投機(jī)倒把的奸商,。

2009年，在古裝劇《三國》中成功飾演劉備,。

2010年,，于和偉,、羅海瓊領(lǐng)銜主演親情劇《幸福在路上》。

2010年,，蘇巖,、于和偉、王麗坤,、沙溢等聯(lián)袂主演心理諜戰(zhàn)劇《青盲》,，飾演張海峰。

2010年10月18日,，林永健,、何賽飛、辛柏青,、于和偉主演的47集電視連續(xù)劇《老馬家的幸福往事》舉行北京電視臺(tái)首播發(fā)布會(huì),。

2011年，與楊童舒,、李依曉,、霍青等主演都市親情大戲《天下人家》，劇中,，李依曉和于和偉飾演兄妹,。

2011年，獲南方盛典最佳男演員獎(jiǎng)《幸福在路上》,。

2011年,，與劉威葳、劉鈞,、呂中,、趙亮等演員聯(lián)合出演家庭情感電視連續(xù)劇《大家庭》。

2012年5月22日獲得MSN星月年度最具價(jià)值男演員獎(jiǎng),。

2013年,，于和偉、王麗坤領(lǐng)銜主演抗日諜戰(zhàn)劇《零下三十八度》,，劇中飾演的“非典型”特工,。

2013年，由劉雪松導(dǎo)演,，于和偉,、王麗坤、宋春麗等演員領(lǐng)銜主演都市時(shí)尚情感劇《愛的多米諾》,，在劇中飾演玩具設(shè)計(jì)師戴骨順,。

2013年，于和偉,、劉濤領(lǐng)銜主演的都市情感勵(lì)志大劇《下一站婚姻》,，劇中于和偉變身“恐婚族”,，對有著同樣離異經(jīng)歷的單身母親“鄧草草”（劉濤飾）暗生情愫。

2014年,，于和偉主演《刑警隊(duì)長》,。于和偉在劇中飾演男主角刑警隊(duì)長顧銘，率領(lǐng)隊(duì)友屢破大案保衛(wèi)城市安全,，還是一位愛妻兒孝順父母的好男人,。

2015年，于和偉飾演《搜索連》中鐵血師長吳休葆,，被贊演的尸體都有不一樣的味道,。^[5]

2015年，于和偉主演《追擊者》中反一號曹若飛,。^[6]

2015年,，于和偉在大型古裝神話劇《封神》中飾演姜子牙一角^[7]。

2015年8月9日,，于和偉憑借《下一站婚姻》獲第十七屆華鼎獎(jiǎng)當(dāng)代劇最佳男演員獎(jiǎng),。^[8]9月8日，于和偉紅色西裝亮相時(shí)尚星秀盛典,，并獲得年度最具實(shí)力男演員獎(jiǎng),。同年,，主演的《警花與警犬》開機(jī),，他在劇中飾演女子訓(xùn)犬隊(duì)隊(duì)長杜飛。^[9]

2016年3月2日,，于和偉出演的古裝大劇《軍師聯(lián)盟》在橫店舉行開機(jī)儀式后立馬投入緊張的拍攝,。^[10]

2017年，在電影《建軍大業(yè)》中飾演陳獨(dú)秀^[11],。

2017年10月,，于和偉領(lǐng)銜出演的電視劇《絕不放手》在江蘇常州舉行了開機(jī)儀式。^[12]