知道40%的lncRNA、circRNA有潛在的編碼多肽(peptide)的能力嗎,? 前面咱們也講到過(guò)一些lncRNA,、circRNA,文章的質(zhì)量高至CNS級(jí)別,,大都和某些疾病息息相關(guān),,尤其近幾個(gè)月非編碼RNA的翻譯話題越來(lái)越熱,文章也多了起來(lái),,慢慢地成為了又一大研究熱點(diǎn),,心動(dòng)了沒? a.人體組織中特異性circRNA的分布,; b.circRNA翻譯元件的分布,; c.細(xì)胞特異性的circRNA很豐富
在RNA-seq的結(jié)果中,習(xí)慣上我們將編碼蛋白太短不足100個(gè)AA的RNA視為非編碼RNA(ncRNA),,但這一界定顯然“錯(cuò)判”了很多RNA,,比竇娥冤。 那如果我們要做lncRNA,、circRNA的多肽研究的時(shí)候,,如何下手呢? (1)預(yù)測(cè)ncRNA是否存在sORF 咦,,什么是sORF,?就是small open reading frames (sORFs),就是短開放閱讀框,,即編碼蛋白質(zhì)的序列,,以ATG開始--終止密碼子結(jié)束。 (2)核糖體RNA測(cè)序技術(shù)(Ribosome Profiling) 判斷一個(gè)lncRNA,、circRNA是否編碼多肽(peptide),,最直接的方式就是定位其是否與核糖體相互結(jié)合,使用核酸酶消化RNA時(shí),,在翻譯進(jìn)行時(shí)的核糖體保護(hù)了大約30bp的RNA片段,,將細(xì)胞中這些被保護(hù)的RNA片段構(gòu)建成cDNA文庫(kù),再使用RNA-seq技術(shù)對(duì)文庫(kù)中所有的片段進(jìn)行測(cè)序,,這樣的數(shù)據(jù)庫(kù)就可以查看ncRNA是否編碼多肽了,。 核糖體RNA測(cè)序可定量探測(cè)翻譯中的RNA數(shù)量 (3)預(yù)測(cè)lncRNA、circRNA編碼的網(wǎng)站 CPC?最近上不去,,咱們介紹兩個(gè)新的 ①lncRNAtor:lncRNA編碼預(yù)測(cè) http://lncrnator./
②circRNADb:circRNA的編碼能力預(yù)測(cè) http://reprod./circrnadb/ 登錄網(wǎng)站,,用circRNA的“NCBI轉(zhuǎn)錄本”號(hào)進(jìn)行搜索,然后點(diǎn)擊查看 會(huì)看到circRNA的DNA序列,,以及編碼的蛋白序列,,然后去NCBI的蛋白BLAST一下,看看是什么功能的蛋白或者多肽,。 發(fā)現(xiàn)其表達(dá)的蛋白是泛素特異性蛋白酶,,提示了其多肽功能。 如果lncRNA和circRNA可以編碼這么多多肽,,那么這些多肽到底起著什么作用呢,?等待咱們?nèi)ミM(jìn)一步挖掘吧。
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