摘要：四種酵母培養(yǎng)基的配制方法與原理，主要包括麥芽汁培養(yǎng)基,、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的制備原理和方法。

      本文主要介紹了四種酵母培養(yǎng)基的配制方法與原理,，主要包括麥芽汁培養(yǎng)基,、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的制備原理和方法,。具體如下：

一,、基本原理

      麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌,。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基,。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基,，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基,，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸,、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH,。

二、實驗材料

(1)藥品

      葡萄搪,、蔗糖,、NaN03、K2HP04,、KCl,、MgSO4·7H2O,，F(xiàn)eS04、瓊脂,。

(2)儀器

      天平,、高壓蒸汽滅菌鍋。

(3)玻璃器皿

移液管,、試管,、錐形瓶、燒杯,、量筒,、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等,。

(4)其他物品

      藥匙,、pH試紙、稱量紙,、記號筆,、棉花、紗布,、線繩,、塑料試管蓋、牛皮紙,、報紙,、新鮮麥芽汁、黃豆芽,、馬鈴薯等,。

三、實驗內(nèi)容

(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分：新鮮麥芽汁一般為10-15波林,。

2.配制方法

(1)用水將大麥或小麥洗凈,，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽,，上蓋紗布,，每日早,、中,、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,，讓其停止發(fā)芽,，曬干或烘干，研磨成麥芽粉,，貯存?zhèn)溆谩?/p>

(2)取一份麥芽粉加四份水,，在65℃水浴鍋中保溫3-4h,，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,，加2滴碘液,，如無藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化完全),。

(3)糖化液用4-6層紗布過濾,，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,，加水20ml,，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中,，攪拌煮沸,，再過濾)。

(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,，將濾液用水稀釋到10-15波林,，調(diào)pH至6.4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S,，可用未經(jīng)發(fā)酵,，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用,。

(5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時,，加入2%瓊脂，加熱融化,，補(bǔ)充失水,。

(6)分裝、加塞,、包扎,。

(7)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

(二)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分：馬鈴薯20g,、葡萄糖2g,、瓊脂1.5-2g、水100ml,、自然pH

2.配制方法

(1)配制20%馬鈴薯浸汁取去皮馬鈴薯200g,，切成小塊，加水1000ml,。80℃浸泡lh,，用紗布過濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積,。100Pa滅菌20min,。即成20%馬鈴薯浸汁,，貯存?zhèn)溆谩?/p>

(2)配制時，按每100ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,，加熱煮沸后加入2g瓊脂,，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。

(3)分裝,、加塞,、包扎。

(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min,。

(三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分：黃豆芽10g,、葡萄糖5g、瓊脂1.5-2g,、水100ml,、自然pH

2.配制方法

(1)稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中,，再加入100ml水,，小火煮沸30min，用紗布過濾,，補(bǔ)足失水,，即制成10%豆芽汁。

(2)配制時,，按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,，煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化,，補(bǔ)足失水,。

(3)分裝、加塞,、包扎,。

(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

(四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分：蔗糖3g,、NaN030.3g,、K2HP040.1g、KCl0.05g,、MgSO4·7H2O0.05g,、FeS040.001g、瓊脂1.5-2g,、蒸餾水100ml,、自然pH

2.配制方法

(1)稱量及溶化量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,，分別稱取蔗糖,、NaNO3,、K2HP04、KCl,、MgSO4,。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培養(yǎng)基加入1ml0.1%的FeS04溶液,。

(2)定容候藥品全部溶解后,，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積,。

(3)加瓊脂加入所需量瓊脂,，加熱融化，補(bǔ)足失水,。

(4)分裝,、加塞、包扎,。

(5)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min,。

注意事項：這四種培養(yǎng)基的配制無需用酸或者堿調(diào)節(jié)pH，滅菌20分鐘足夠了,，時間過長容易把培養(yǎng)基成分破壞掉,，太短了容易造成污染。