1.工作人員加強有菌觀念,，無菌操作。

2.每日工作前用紫外線照射實驗室半小時以上,。

3.入室前應穿工作服,，并做好實驗前的各項準備工作。

4.實驗室內應保持肅靜,，不準吸煙,、吃東西及用手觸摸面部。盡量減少室內活動,，以免引起風動,，無關人員禁入。

5.非必要物品禁止帶入實驗室,，必要資料和書籍帶入后,，應遠離操作臺。

6.做好標本的登記,、編號及試驗記錄,。未發(fā)出報告前，請勿丟棄標本,。

7.標本處理及各項試驗應在操作間進行,，接種環(huán)用完后應立即火焰滅菌，沾菌吸管,、玻片等用后應浸泡在消毒液內,。

8.實驗時手部污染，應立即用過氧乙酸消毒或浸于 3%來蘇兒溶液中 5-10分,，再用肥皂洗手并沖洗干凈,；如誤入口內，應立即吐出,，并用 1:1000高錳酸鉀溶液或 3%雙氧水漱口,，根據(jù)實際情況服用有關藥物。

9.實驗過程中，如污染了實驗臺或地面,，應用 3%來蘇兒覆蓋其上半小時，然后清洗,；如污染工作服,，應立即脫下，高壓滅菌,。

10.使用后的載玻片,、蓋片、平皿,、試管等用消毒液浸泡,，經(jīng)煮沸后清洗或丟棄。

11.所有微生物培養(yǎng)物,，不管標本陽性或陰性均用消毒液浸泡后,，經(jīng)煮沸消毒，才能清洗或丟棄,。

12.取材,、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者,，每次取材前均應徹底消毒,。

13.若出現(xiàn)著火情況，應沉著處理,，切勿慌張,，立即關閉電閘，積極滅火,。易燃物品（如酒精,、二甲苯、乙醚和丙酮等）必須遠離火源,，妥善保存,。

14.工作結束時檢查電器、酒精燈等是否關閉,，觀察記錄培養(yǎng)箱,、冰箱溫度及工作情況，用浸有消毒液的抹布將操作臺擦拭干凈,，并將試劑,、用具等放回原處，清理臺面,，未污染的廢棄物扔進污物桶,，有菌廢棄物應送高壓滅菌后處理。

15.離室前工作人員應將雙手用消毒液消毒,，并用肥皂和清水洗凈,。

16.愛護儀器設備,，遵守儀器使用規(guī)范，經(jīng)常清潔,，注意防塵和防潮,。每天觀察培養(yǎng)箱、冰箱,、干燥箱的溫度,，并做好記錄。

17.發(fā)出的微生物報告應認真復審,，分析報告,、評價報告。

1  目的  建立無菌室管理使用規(guī)程,，保證操作者正確使用,。

2  范圍  適用于無菌室操作。

3  責任者  操作人員,、無菌室管理人員,。

4  內容

4．1無菌室應嚴禁放置雜物，無關人員嚴禁入內,。

4．2 無菌室應嚴格保持整潔,，防止污染，定期用甲醛熏蒸消毒（每月一次）,，使用前用0.1%新潔爾滅控式消毒凈化工作臺,。

4．3 實驗人員進入無菌室，必須更換無菌衣,、帽,、鞋等，操作前用0.1%新潔爾滅菌或75%酒精進行手消毒,。

4．4 使用前開啟紫外燈照射60分鐘,，同時打開吹風凈化工作臺，操作完畢及時清理,，再開紫外燈照射30分鐘,。

4．5 檢驗過程嚴格按照無菌操作規(guī)程操作，愛惜室內用具,，使用完畢,，整理檢品及各種用具并清潔工作臺面。

4．6 接種環(huán)在每次使用前后,，必須通過火焰滅菌冷卻后方可接種培養(yǎng)物,。

4．7 所有帶菌實驗用品，須經(jīng)有效的消毒滅菌處理后再洗刷。嚴禁污染下水道,。

4．8 無菌室定期進行潔凈度測試檢查沉降菌（在室內打開肉湯瓊脂平皿30分鐘,，經(jīng)37℃培養(yǎng)48h），100級平均菌落數(shù)不得過1個/皿,，如超過應進行清潔消毒,。

1.準備：首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的去離子水或蒸餾水,，使水面與三角擱架相平為宜。

2.放回滅菌桶,，并裝入待滅菌物品,。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果,。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

3.加蓋,，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內,。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致,，勿使漏氣,。
4.加熱，并同時打開排氣閥,，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣,。待冷空氣完全排盡后，關上排氣閥,，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升,。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源,，維持壓力至所需時間（在溫度或者壓力達到所需時（一般為121°0.1MPa）,，需要切斷電源，停止加熱,。當溫度下降時,，再開啟電源開始加熱，使溫度維持在恒定的范圍之內,。

5.滅菌所需時間到后,，切斷電源，讓滅菌鍋內溫度自然下降,，當壓力表的壓力降至0時,，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子,，取出滅菌物品,。

注意事項：

1.滅菌物品不能堆得太滿、太緊,，以免影響溫度均勻上升,。

2.降溫時待溫度自然降至60℃以下再打開箱門取出物品，以免因溫度過高而驟然降溫導致玻璃器皿炸裂,。

3. 在滅菌過程中,，應注意排凈鍋內冷空氣。

4.由于高壓蒸汽滅菌時,，要使用溫度高達120℃,、兩個大氣壓的過熱蒸汽，操作時,，必須嚴格按照操作規(guī)程操作,，否則容易發(fā)生意外事故。

5.不同類型的物品不應放在一起進行滅菌,。

6.在未放氣,，器內壓力尚未降到“0”位以前，絕對不允許打開器蓋,。

1.在設備使用中,，應對安全閥加以維護和檢查，當設備閑置較長時間重新使用時,，應扳動安全閥上小扳手,，檢查閥芯是否靈活，防止因彈簧銹蝕影響安全閥起跳,。

2.設備工作時,，當壓力表指示超過0．165Mpa時，安全閥不開啟,，應立即關閉電源,，打開放氣閥旋鈕，當壓力表指針回零時,，稍等1-2分鐘,，再打開容器蓋并及時更換安全閥。

3.堆放滅菌物品時,，嚴禁堵塞安全閥的出氣孔,，必須留出空間保證其暢通放氣。

4.每次使用前必須檢查外桶內水量是否保持在滅菌桶擱腳處,。

5.當滅菌器持續(xù)工作,，在進行新的滅菌作業(yè)時,，應留有5分鐘的時間，并打開上蓋讓設備有時間冷卻,。

6.滅菌液體時,，應將液體罐裝在硬質的耐熱玻璃瓶中，以不超過3／4體積為好,，瓶口選用棉花紗塞,，切勿使用未開孔的橡膠或軟木塞。特別注意：在滅菌液體結束時不準立即釋放蒸汽,，必須待壓力表指針回復到零位后方可排放余汽,。

7.對不同類型，不同滅菌要求的物品,，如敷料和液體等,，切勿放在一起滅菌，以免顧此失彼,，造成損失。

8.取放物品時注意不要被蒸氣燙傷(可戴上線手套),。

1 操作程序

1.1開機：冰箱、冰柜按說明書要求放好后,，插上電源線,，確定其在正常供電狀態(tài)下。

1.2物品的放置

1.2.1將冰箱,、冰柜調節(jié)到所需功能,。

1.2.2打開冰箱、冰柜相應功能的箱門,，將所需放置/取出的物品,，放置/取出在冰箱、冰柜內,。

1.2.3物品放置好/取出后,，將箱門關嚴，通過屏幕顯示確定其在正常供電情況,。

1.3 做好相應登記后方可離開,。

2 安全使用注意事項

2.1嚴禁貯存或靠近易燃、易爆,、有腐蝕性物品及易揮發(fā)的氣體,、液體，不得在有可燃氣體的環(huán)境中存放或使用,。

2.2實驗室使用冰箱,、冰柜內禁止存放與實驗無關的物品,。儲存在冰箱內的所有容器應當清楚地標明內裝物品的科學名稱、儲存日期和儲存者的姓名,。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄,。

2.3放入冰箱、冰柜內的所有試劑,、樣品,、質控品等必須密封保存。

2.4箱體表面請勿放置較重或較熱的物體,，以免變形,。

2.5保持冰箱、冰柜出水口通暢,。

2.6在清潔/除霜時,，切不可用有機溶劑、開水及洗衣粉等對冰箱有害的物質,。

2.7每日觀察冰箱,、冰柜溫度并記錄。

1,、使用天平前應先觀察水準器中氣泡是否在圓形水準器正中,，如偏離中心，應調節(jié)地腳螺栓使氣泡保持在水準器正中央,，單盤天平（機械式）調整前面的地腳螺栓,，電子天平調整后面的地腳螺栓。
2,、天平內須放置變色硅膠等干燥劑,，使用前應觀察變色硅膠顏色，如硅膠變色必須及時更換干燥硅膠,，將吸水失效的硅膠放入烘箱內烘干恢復顏色以備以后使用,。
3、天平使用前應首先調零,，電子天平使用前還應用標準砝碼校準,。
4、天平門開關時動作要輕,，防止震動影響天平精度和準確讀數(shù),。
5、天平稱量時要將天平門關好,，嚴禁開著天平門時讀數(shù),，防止空氣流動對稱量結果造成影響。
6,、電子天平的去皮鍵使用要慎重,，嚴禁用去皮鍵使天平回零,。
7、如發(fā)現(xiàn)天平的托盤上有污物要立即擦拭干凈,。天平要經(jīng)常擦拭,，保持潔凈，擦拭天平內部時要用潔凈的干布或軟毛刷,，如干布擦不干凈可用95%乙醇擦拭,，嚴禁用水擦拭天平內部。
8,、同一次分析應用同一臺天平,，避免系統(tǒng)誤差。
9,、天平載重不得超過最大負荷,。
10、被稱物應放在干燥清潔的器皿中稱量,，揮發(fā)性,、腐蝕性物體必須放在密封加蓋的容器中稱量。
19,、電子天平接通電源后應預熱2小時才能使用,。
20、搬動或拆裝天平后要檢查天平性能,。
22,、稱量完畢后將所用稱量紙帶走,。
23,、稱量完畢，保持天平清潔,， 物品按原樣擺放整齊

1.目的：保證待處理樣品的可靠性傳遞,，盡量避免各區(qū)間的空氣污染

2.適用范圍：每個區(qū)的傳遞窗。

3.職責：所有工作人員在工作中必須嚴格遵守,。

4．步驟：

4.1標準操作：實驗人員在所在實驗區(qū)處理好樣品后,，欲將樣品傳遞到下一區(qū)域時，打開傳遞窗門,，放入欲傳遞的樣品,，關閉傳遞窗門。

4.2 維護

每次實驗結束后用1﹪的施康溶液對傳遞窗內部進行清潔,，然后打開傳遞窗內的紫外燈消毒30分鐘,，并記錄紫外燈照射時間，累計10000小時后報廢,，更換新的紫外燈,。

1．取鏡和放置：右手緊握鏡臂,，左一手托住鏡座取出。（特別禁止單手提顯微鏡,，防止目鏡從鏡筒中滑脫）,。放置桌邊時動作要輕。一般應在身體的前面,，略偏左,，鏡筒向前，鏡臂向后,，距桌邊7～10 ㎝處,，以便觀察和防止掉落。然后安放目鏡和物鏡,。

2．對光：用拇指和中指移動旋轉器,，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔。打開光圈,，上升集光器,，并將反光鏡轉向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),，同時調節(jié)反光鏡方向,，直到視野內的光線均勻明亮為止。

3．低倍鏡的使用方法

（1）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上,，一定使有蓋玻片的一面朝上,，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住,，然后旋轉推片器螺旋,，將所要觀察的部位調到通光孔的正中。

（2）調節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉動粗調節(jié)器,，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處,，要從右側看著鏡臺上升，以免上升過多,，造成鏡頭或標本片的損壞,。然后，兩眼同時睜開,，用左眼在目鏡上觀察,，左手順時針方向緩慢轉動粗調節(jié)器，使鏡臺緩慢下降,，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止,。

4．高倍鏡的使用方法

（1）選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調到中心，同時把物象調節(jié)到最清晰的程度,，才能進行高倍鏡的觀察,。

（2）轉動轉換器,，調換上高倍鏡頭，轉換高倍鏡時轉動速度要慢,，并從側面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片),，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調好,，應重新操作,。

（3）調節(jié)焦距：轉換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察,，此時一般能見到一個不太清楚的物象,，可將細調節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調節(jié)器!)

1,、目的

建立恒溫干燥箱的操作規(guī)程,，保證操作人員正確操作。

2,、范圍

適用于樣品的干燥,、玻璃儀器的烘干。

3,、職責

操作人員對本規(guī)程的實施負責,。

4、操作程序

4.1 接通電源,，打開電源開關,。

4.2 設置加熱溫度

4.3 待溫度達到設置溫度并無異常情況，穩(wěn)定后放入樣品,，開始記時至所需干燥程度,。

5、注意事項

5.1設置溫度時,，通常將溫度設置稍低于實驗溫度,，待溫度達到設置溫度后,，再設置到實驗溫度,。

5.2新購電熱恒溫干燥箱應校檢合格方能使用，所有電熱恒溫干燥箱每年由計量所校檢一次,。
   5.3干燥箱安裝在室內干燥和水平處,，禁止震動和腐蝕。
   5.4使用時注意安全用電,，電源刀閘容量和電源導線容量要足夠,，并要有良好的接地線。

5.5箱內放入試品時不能太密,，散熱板上不能放試品,，以免影響熱氣向上流動,。

1.目的：建立恒溫培養(yǎng)箱標準操作及維修保養(yǎng)規(guī)程，用以保證實驗儀器操作的一致性,。

2.操作前準備

對箱體內清潔,，消毒合格后，執(zhí)行如下程序,。

3.操作過程

3.1接通電源,，開啟電源開關。

3.2調節(jié)調節(jié)器按鈕,，至調節(jié)溫度檔,，并調節(jié)至所需溫度，點擊確認按鈕,，加熱指示燈亮,，培養(yǎng)箱進入升溫狀態(tài)。

3.3如溫度已超過所需溫度時,，可將節(jié)器按鈕調至調節(jié)溫度檔,，并調節(jié)至所需溫度，待溫度降至所需溫度時,，即將調整至紅燈指示燈自動熄滅點,，好能自動控制所需溫度。

3.4箱內之溫度應按照溫度表指示為準,。

4.維修保養(yǎng)及注意事項

4.1恒溫培養(yǎng)箱必須有效接地,， 以保證使用安全。

4.2在通電使用時忌用手觸及箱左側空間內的電器部分,，或用濕布揩抹及用水沖洗,。

4.3電源線不可纏繞在金屬物上或放置在潮濕的地方。必須防止橡皮老化以及漏電,。

4.4實驗物放置在箱內不宜過擠,，使空氣流動暢通，保持箱內平均受熱,，在實驗時,，應將頂部適當旋開，使?jié)窨諝馔庖菀岳谡{節(jié)箱內溫度,。

4.5箱內外應每日保持清潔,，每次使用完畢應當進行清潔。

4.6若長時間停用,，應將電源切斷,。

一、目的

規(guī)范凈化工作臺操作與維護工作，確保儀器正常運作,。

二,、適用范圍

本實驗方法適用于凈化工作臺操作與維護管理。

三,、操作及維護規(guī)程

1,、操作規(guī)程

（1）使用工作臺時，應提前50分鐘開機,，同時開啟紫外殺菌燈,，處理操作區(qū)內表面積累的微生物，30分鐘后關閉殺菌燈（此時日光燈即開啟）,，啟動風機,。

（2）對新安裝的或長期未使用的工作臺，使用前必需對工作臺和周圍環(huán)鏡先用超靜真空吸塵器或用不產(chǎn)生纖維的工具進行清潔工作,，再采用藥物滅菌法或紫外線滅菌法進行滅菌處理,。

（3）操作區(qū)內不允許存放不必要的物品，保持工作區(qū)的潔凈氣流流型不受干擾,。

（4） 操作區(qū)內盡量避免作用明顯擾亂氣流流型的動作,。

（5） 操作區(qū)的使用溫度不可以超過60℃。

2,、維護規(guī)程及維護方法

（1）根據(jù)環(huán)境的潔凈程度,，可定期（一般2～3個月）將粗濾布（滌綸無紡布）拆下清洗或給予更換。

（2）定期（一般為一周）對環(huán)境周圍進行滅菌工作,，同時經(jīng)常用紗布沾酒精或丙酮等有機溶劑將紫外線殺菌燈表面擦干凈,，保持表面清潔，否則會影響殺菌效果,。

（3）操作區(qū)平均風速保持在0.32-0.48m/s范圍內,。

1、操作前應將本次操作所需的全部物品移入安全柜,，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流,；并且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒，以去除污染,。

2,、打開風機5～10分鐘，待柜內空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進行實驗操作,。將雙臂緩緩伸入安全柜內,，至少靜止1分鐘,，使柜內氣流穩(wěn)定后再進行操作,。

3、安全柜內不放與本次實驗無關的物品,。柜內物品擺放應做到清潔區(qū),、半污染區(qū)與污染區(qū)基本分開,，操作過程中物品取用方便，且三區(qū)之間無交叉,。物品應盡量靠后放置,，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動,。

4,、操作時應按照從清潔區(qū)到污染區(qū)進行，以避免交叉污染,。為防可能濺出的液滴,，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵,。

5,、柜內操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火,，以避免產(chǎn)生的熱量產(chǎn)生氣流,，干擾柜內氣流穩(wěn)定；且明火可能損壞HEPA濾器,。

6,、工作時盡量減少身后人員走動以及開關房門，以防止安全柜內氣流不穩(wěn)定,。

7,、在實驗操作時，不可打開玻璃視窗,，應保證操作者臉部在工作窗口之上,。在柜內操作時動作應輕柔、舒緩,，防止影響柜內氣流,。

8、安全柜應定期進行檢測與保養(yǎng),，以保證其正常工作,。工作中一旦發(fā)現(xiàn)安全柜工作異常，應立即停止工作,，采取相應處理措施,，并通知相關人員。

9,、工作完全后,，關閉玻璃窗，保持風機繼續(xù)運轉10～15分鐘，同時打開紫外燈,，照射30分鐘,。

10、安全柜應定期進行清潔消毒,，柜內臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭,。柜體外表面則應每天用1%的84消毒液擦拭。

11,、柜內使用的物品應在消毒后再取出,，以防止將病原微生物帶出而污染環(huán)境。