規(guī)模化豬場豬瘟,、豬藍耳病抗體檢測結果分析

    摘要：為了解豬瘟、豬藍耳病的免疫狀況,、評價免疫效果,、制定合理免疫程序與防控措施。筆者于 2014 年分4 次對某規(guī)?；i場采血進行豬瘟,、豬藍耳病抗體檢測。結果顯示該場母豬的豬瘟、豬藍耳病抗體水平合格,；產房仔豬豬瘟抗體水平合格,，豬藍耳病抗體水平較低；保育階段豬瘟和豬藍耳病抗體水平均較低,；育肥階段豬瘟抗體水平較低,，豬藍耳病抗體水平偏高，且標準差大,。結合該場免疫程序,，表明仔豬的豬瘟首免日齡應根據(jù)抗體消長情況推遲，同時應考慮對仔豬免疫豬藍耳病疫苗,。 

    疫苗接種是規(guī)?；i場預防和控制重大傳染病的重要途徑，特別是不同的豬場需要制定一套因地制宜,、切實可行的免疫程序以及免疫評價系統(tǒng),。免疫監(jiān)測是為了監(jiān)測接種豬群的免疫效果，并根據(jù)免疫效果合理地調整免疫接種方案,，是指導與制定免疫程序的重要參考依據(jù),。豬瘟、豬藍耳病是當前危害養(yǎng)豬生產的重大傳染病,，嚴重影響著規(guī)?；i場的豬群健康與成績。為了監(jiān)測某規(guī)?；i場豬瘟,、豬藍耳病的抗體水平，掌握豬場流行病學動態(tài)及免疫效果,，每季度抽取該豬場血樣 120 份左右,，進行豬瘟、豬藍耳病的抗體水平檢測,。
1 材料與方法
1.1 樣品來源及主要試劑和儀器
    2014年3,、6、9,、12月對某規(guī)?；i場進行抽樣調查，每頭采取血樣5mL,，每次采集血樣 120 份左右,。豬瘟、豬藍耳病抗體 ELISA 檢測試劑盒均為美國 IDEXX 公司產品,。酶標儀,、移液器,、臺式離心機（凱達 TGL-16）。
1.2 試驗方法
1.2.1 組別分群

    該場為養(yǎng)豬一條龍模式生產線,，按照豬群所在區(qū)域人為劃分為產房階段,、保育階段、育肥階段,；母豬群劃分為后備母豬,、經產母豬。
1.2.2 血樣采集

前腔靜脈采血,，標記后置于30 ～ 37℃孵育 30min,，待血液凝固、血清析出,，帶回實驗室分離血清,。
1.2.3 血清制備

    將帶回的一次性采血注射器室溫靜置 30 min 后，將析出的血清分別放入對應編號的滅菌 EP 管中,，分組編號,，冷凍保存?zhèn)溆谩?br>1.2.4 豬瘟、豬藍耳病抗體檢測方法與結果判定

    按照豬瘟,、豬藍耳病ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行抗體檢測與結果判定,，豬瘟抗體結果為阻斷率 % ＞ 40 判為陽性，豬藍耳病抗體結果為 S/P 值＞ 0.4 判為陽性,。每組設 2個陰性血清對照和 2 個陽性血清對照,。
1.3 豬瘟、豬藍耳病免疫程序調查

    對該規(guī)?；i場的豬瘟,、豬藍耳病免疫程序進行調查，該場 2014 年全年免疫程序一致,，結果見表 1,。

2 試驗結果

2.1 豬瘟抗體檢測結果

    結果顯示，1,、2,、3 季度中，均表現(xiàn)為保育豬抗體水平最低,，4 季度中育肥豬抗體水平最低,。1、2,、3 季度的產房仔豬抗體水平較好,，但是 4 季度的產房仔豬抗體水平偏低。母豬的抗體水平全年均達到 90% 以上的水平,，但是 4 季度的抗體水平較前 3 個季度略低,。
    根據(jù)豬瘟抗體平均值結果，前 3 季度中平均值最低的為保育豬,，分別為66.3,、46.5 和 50.2，4 季度中平均值最低的為育肥豬的 49.4,。標準差結果中,，保育、育肥的標準差普遍最高,，4 個季度中標準差最高的階段均為育肥豬,，分別是 30.4、20.9,、24.9,、24.8。母豬的抗體平均值均處于較高水平,，其中 4 個季度中后備母豬的標準差均明顯高于經產母豬的標準差,。
2.2 豬藍耳病抗體檢測結果

    由表 4 可以看出，4 個季度產房,、保育階段豬藍耳病抗體的陽性率較低,，育肥、后備母豬,、經產母豬的抗體陽性率高,。育肥豬在四個季度中抗體陽性率幾乎全部為 100%，3,、4 季度后備母豬的陽性率由 1,、2 季度的 100% 下降到60%，經產母豬的在前 3 季度的陽性率達 92% 以上,，4 季度下降為 75%,。由表 5 可以看出，第 1 季度中,，豬藍耳病抗體平均值最高的為經產母豬（1.9）,，2、3,、4 季度中抗體平均值最高的均為育肥豬（分別為 2.0,、2.0、1.6）,；1,、2 季度中經產母豬的標準差為同一時期不同階段的最高值，3,、4 季度中保育豬的標準差為最高值,。

3 結果分析
3.1 豬瘟抗體結果分析
    4 個季度的豬瘟抗體水平總體規(guī)律相似,，但是仍有一定差異，前 3 個季度的豬瘟抗體陽性率最低值均在保育,，產房階段以及母豬階段的抗體水平均較高,，表示該場的仔豬首次免疫時間偏早，該場在 20 日齡首免豬瘟疫苗,，此時產房階段的抗體平均值和陽性率都處于較高水平,，免疫豬瘟疫苗之后，部分疫苗毒與體內的部分豬瘟抗體發(fā)生中和反應,，從而使體內的豬瘟抗體水平下降,。4 季度的豬瘟抗體平均值與前 3 個季度相比偏低，經詢問,，該場 9 月份開始使用與之前同一廠家不同批號的豬瘟疫苗,，推測為疫苗批次質量問題（后經送檢證實），9 月份之后使用的疫苗抗原含量偏低,，導致 4 季度母豬,、產房仔豬的抗體水平下降。但是 4 季度保育豬的抗體陽性率有所升高,，同時 4 季度抗體陽性率最低的則為育肥豬,，推測疫苗抗原含量下降導致豬瘟首免時與疫苗毒中和的抗體數(shù)量也大幅度下降，從而使保育豬的抗體陽性率升高,，而豬瘟二免時由于疫苗抗原含量低,，因此免疫效果不理想，育肥豬的抗體陽性率下降,。4 個季度中育肥豬的標準差均為同一時期不同階段豬群的最高值,，表示育肥豬階段為豬瘟抗體最不穩(wěn)定時期，這與該場的實際情況有著密切關系,，該場為種豬場,，因挑選后備、測定后備等程序的影響,，使得育肥周期偏長,，育肥前期豬瘟抗體水平較高，但是育肥后期豬瘟抗體逐漸消減,，使得整個育肥階段的抗體水平變化較大,。
3.2 豬藍耳病抗體結果分析
    1 季度中豬藍耳病抗體陽性率最低值在保育階段，2,、3,、4 季度的陽性率最低值均在產房階段，這與仔豬不免疫豬藍耳病疫苗有密切關系,。產房仔豬由于不免疫豬藍耳病疫苗,，因此產房仔豬的抗體水平與經產母豬的抗體水平密切相關,，4 個季度相互對比，發(fā)現(xiàn)經產母豬抗體陽性率升高時產房仔豬的抗體陽性率也升高,，反之亦然,。產房,、保育,、育肥 3 個階段的豬藍耳病抗體陽性率基本上呈遞增趨勢（1季度產房陽性率比保育略高，應該與同一時期母豬抗體水平也最高相關）,，由于沒有免疫疫苗,，表示保育和育肥豬藍耳病抗體的升高是野毒感染造成的。保育的抗體陽性率升高,，到育肥階段豬藍耳病抗體陽性率均達到或接近 100%,，且育肥豬的抗體平均值在同一時期的不同階段中幾乎全部為最大值，表示保育階段豬群幾乎全部被豬藍耳病野毒感染,。

    1,、2 季度母豬的豬藍耳病抗體平均值和標準差均處于較高程度，表示 1,、2 季度母豬的豬藍耳病抗體也不太穩(wěn)定,，說明母豬群中也存在豬藍耳病野毒的感染。3,、4 季度母豬的抗體平均值有所下降,，標準差也有所降低，表示下半年母豬群的豬藍耳病野毒活躍程度降低,，抗體值與理論情況下疫苗免疫的抗體值較為接近,。
4 討論
4.1 豬瘟防控策略
    近年來豬瘟的發(fā)生和流行特征以慢性、非典性,、溫和性,、隱性等類型為主，公豬,、基礎母豬多表現(xiàn)為隱性感染,，仔豬最容易經過垂直傳播感染，這些感染豬都是能夠持續(xù)排毒的傳染源,，同時,，病豬愈后 24 ～ 57d 仍有帶毒和排毒現(xiàn)象，這點在飼養(yǎng)管理中必須引起足夠的重視,。該場全年豬瘟抗體檢測結果相對穩(wěn)定,，表示疫苗免疫接種水平良好，保育豬的豬瘟抗體水平偏低,，應檢測產房仔豬母源抗體的消減規(guī)律,，根據(jù)母源抗體的消減程度,，在豬瘟抗體阻斷率40% ～ 45% 左右時進行首免，之后,，監(jiān)測首免后抗體消長規(guī)律,，在抗體值下降過程中，選擇抗體阻斷率在 40% ～ 45%時進行二免,。而不能一味的照搬使用傳統(tǒng) 20+60 日齡免疫程序,，應根據(jù)自身豬場的實際抗體檢測情況制定免疫程序。育肥階段由于生產周期較長,，可適當在育肥中后期加強免疫一次,，從而使育肥后期抗體維持較高水平。針對疫苗批次差異產生的影響,，在購進疫苗前一定要對疫苗的抗原含量進行檢測,，推薦使用 TCID50 檢測病毒效價或者使用熒光定量 RT-PCR 檢測疫苗中核酸含量，選擇效價高或抗原含量高的疫苗批次,。
4.2 豬藍耳病防治對策
    對河南大中型,、規(guī)模化豬場豬藍耳病感染情況調查,，絕大多數(shù)豬場屬于豬藍耳病陽性穩(wěn)定場,，生產管理水平直接決定著豬藍耳病的防控效果。豬場中存在豬藍耳病野毒時,，豬群容易造成隱性感染且不表現(xiàn)臨床癥狀,，當感染的藍耳病病毒毒力較強或病毒活躍期以及一旦飼養(yǎng)管理失當、飼養(yǎng)條件變化等不穩(wěn)定因素存在,，極易引起豬藍耳病的暴發(fā),，因此，疫苗免疫以及配套的抗體檢測顯得尤為重要,。通過抗體檢測結果,，發(fā)現(xiàn)該場的保育階段為豬藍耳病最為活躍階段，因此加強保育階段的飼養(yǎng)管理與群防群控為該場防控豬藍耳病的關鍵點,。育肥階段豬藍耳病均已感染,，因此要格外注意育肥階段是否有類似于豬藍耳病臨床癥狀出現(xiàn)，如高熱稽留,、呼吸道疾病等,，若有疑似豬藍耳病例應立刻采樣進行豬藍耳病病原檢測，同時大群投藥治療,，確診為豬藍耳病后應加強病豬隔離,，防止傳染給健康豬只，感染豬藍耳病的豬群不再留作種用。
該場仔豬未免疫豬藍耳病疫苗,，建議檢測產房,、保育仔豬的母源抗體消減規(guī)律，制定合理的豬藍耳病免疫程序,，主動免疫能夠降低感染性野毒在接種動物體內的復制效率,，減少發(fā)病病例，保護豬群健康,。
4.3 豬場綜合防控措施與生物安全體系建設
    規(guī)?；i場穩(wěn)定生產與持續(xù)發(fā)展是以種豬的健康穩(wěn)定為前提，豬場豬瘟和豬藍耳病控制的好壞直接關系到整個種豬群的健康狀況,。種豬群攜帶豬瘟,、豬藍耳病病毒或機體免疫受到抑制，仔豬先天性感染豬瘟或者豬藍耳病,，或者仔豬得不到母源抗體的充分保護，很容易感染各種病原,，成為豬場的隱患,。規(guī)模化豬場應建立完善的衛(wèi)生防疫與生物安全體系,，避免病原自外界傳入與病原在豬場內部傳播是疫病防控的出發(fā)點與著力點,。定期進行血清學監(jiān)測，根據(jù)檢測結果及時調整免疫程序,，對可疑豬隔離治療,，對確診為重大傳染病豬只立刻上報疫情或無害化處理。
    有條件的種豬場,，在做好抗體檢測的同時應做好病原檢測,，尤其是種用后備公母豬引種之前以及引種后的隔離期應該分 2 次逐頭檢測重大動物疫病病原，如豬瘟病毒,、豬藍耳病病毒,、豬偽狂犬病毒、口蹄疫病毒,，對病原陽性的后備種豬應堅決淘汰處理,，以免病毒傳染給豬場其他豬群，對于經產母豬也應定期采樣,，檢測重大動物疫病病原,，建立健全疫病監(jiān)測監(jiān)督機制，對病原陽性的經產母豬也應做淘汰或不做種用處理,。商品豬場也應該定期進行病原檢測,，了解本場疫病感染情況，有助于制定合理的防疫程序與防范措施，若發(fā)生疫情時也有助于采取對應措施,。