|
自miR-3188被發(fā)現(xiàn)以來,，尚未出現(xiàn)它抑制癌癥發(fā)生和發(fā)展過程的分子機(jī)制的相關(guān)報(bào)道,。鼻咽癌是在東亞(尤其是我國南方省份)和非洲高發(fā)的鼻咽粘膜惡性腫瘤。來自南方醫(yī)科大學(xué)的方唯意教授研究團(tuán)隊(duì)近日在Nature Communications上揭示了miR-3188抑制鼻咽癌腫瘤的分子機(jī)制,。 miR-3188有什么功能? 研究者發(fā)現(xiàn)miR-3188能夠抑制HONE1-EBV和SUNE1細(xì)胞的生長,、G1到S細(xì)胞周期的轉(zhuǎn)化過程,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示miR-3188能抑制腫瘤發(fā)生。
這個(gè)功能背后的機(jī)制是... miR-3188的過表達(dá)能下調(diào)c-JUN和CCND1,，p-PI3K和p-AKT的表達(dá)水平，同時(shí)增強(qiáng)p21和p27,；有趣的是敲除miR-3188后,，5-8F細(xì)胞出現(xiàn)了相反的效果，且加入miR-3188 mimic后能恢復(fù)此現(xiàn)象,，表明miR-3188通過抑制PI3K/AKT及下游的c-JUN和G1/S過渡信號(hào)來抑制細(xì)胞生長,。 找miRNA靶基因很重要 TargetScan和RNA雜交演算推測mTOR是miR-3188的靶標(biāo)，并通過了研究者的體外實(shí)驗(yàn),、對(duì)移植瘤的免疫組化實(shí)驗(yàn),、熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)得到驗(yàn)證。 mTOR是靶基因?證明看看 轉(zhuǎn)染mTOR到miR-3188過表達(dá)的NPC細(xì)胞,，進(jìn)行MTT,、EdU檢測，發(fā)現(xiàn)mTOR能增強(qiáng)細(xì)胞增殖,；過表達(dá)mTOR還能挽救miR-3188引起的5-FU增敏作用,，結(jié)合siRNA實(shí)驗(yàn)（下圖）,，可得出mTOR是miR-3188的直接靶點(diǎn),，是造成細(xì)胞生長抑制與誘導(dǎo)NPC對(duì)5-FU敏感的關(guān)鍵。
轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制研究, GO! 相關(guān)基因這么多，從何下手,？研究者使用UCSC,、PROMO和TFSEARCH生物信息分析軟件，分析miR-3188的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游3-kb區(qū)域,，發(fā)現(xiàn)包含了3個(gè)c-JUN結(jié)合位點(diǎn),。于是研究者敲降c-JUN，進(jìn)行qPCR實(shí)驗(yàn),，發(fā)現(xiàn)miR-3188表達(dá)顯著增加,，說明c-JUN是miR-3188的上游調(diào)節(jié)基因；綜合EMSA,、ChIP實(shí)驗(yàn)證明3個(gè)結(jié)合位點(diǎn)都是有效的,。 研究結(jié)束了?別忘了通路 FOXO1被報(bào)道誘導(dǎo)PI3K/AKT信號(hào)通路，于是研究者探究他對(duì)NPC細(xì)胞的影響,，發(fā)現(xiàn)它能調(diào)控NPC細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期,。通過miRNA芯片，分析得包括含miR-3188在內(nèi)的82條miRNA因?yàn)镕OXO1過表達(dá)而顯著下調(diào),。隨后通過實(shí)驗(yàn),，研究者得出FOXO1通過PI3K/AKT/c-JUN信號(hào)通路誘導(dǎo)miR-3188表達(dá)。
本研究所使用的siRNA,、miRNA mimic / inhibitor,、EdU試劑，均為銳博生物提供 原文：Zhao M,et al. miR-3188 regulates nasopharyngeal carcinoma proliferation and chemosensitivity through a FOXO1-modulated positive feedback loop with mTOR-p-PI3K/AKT-c-JUN.Nat Commun. 2016 Apr 20;7:11309. 回復(fù)姓名+單位+郵箱地址+研究方向+20160429 即可獲取文章原文,。  見證革命熱情的時(shí)刻到了,，假前還看文章的都是好同志 |
|
|
