一,、淡紫擬青霉菌的生物學(xué)與生態(tài)學(xué)特性

    淡紫擬青霉對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件要求不高，它不僅能在多種常規(guī)培養(yǎng)基上生長(zhǎng),，而且能在多種自然基質(zhì),，如農(nóng)副產(chǎn)品廢料、廢渣與植物葉片或植物浸提液中生長(zhǎng),。Sosamma,，V.K.利用10種植物葉片浸提物來(lái)培養(yǎng)淡紫擬青霉，結(jié)果表明10種供試植物葉片浸提物均能提供擬青霉正常生長(zhǎng),，其中尤以山香屬植物產(chǎn)孢量最大,；其次是含羞草屬植物Mimosa invisa和chromolaea。Mani-A研究并評(píng)價(jià)了油粕,、植物葉片在大量培養(yǎng)淡紫擬青霉方面的功效,，結(jié)果表明各種油籽粕都是適宜的培養(yǎng)材料。

    盡管淡紫擬青霉能在多種營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上生長(zhǎng),，但不同的培養(yǎng)基質(zhì)與不同的培養(yǎng)條件,，其產(chǎn)菌率與功效也有所不同。Cargro-J研究表明：利用麥芽培養(yǎng)基在靜止?fàn)顟B(tài)下生產(chǎn)的菌劑,，殺線蟲(chóng)活性特別強(qiáng),。Zaki-FA研究了自然培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)淡紫擬青霉產(chǎn)孢及控制線蟲(chóng)效能的影響。選用的自然基質(zhì)有小米,、稻米,、燕麥、小麥,、鷹嘴豆,、綠豆等，在稻米上產(chǎn)孢量最大,，為52.8 x 108/g,，其次是綠豆，為24.5x107/g,，以綠豆為基質(zhì)的淡紫擬青霉菌劑控制效能最好,，能減少根結(jié)線蟲(chóng)數(shù)78.8%,、二齡線蟲(chóng)94.2%；Suebsak -Sontirat認(rèn)為最合適的培養(yǎng)基是大豆汁或馬鈴薯汁浸出液,，培養(yǎng)條件為31℃,、220r/min~270r/min。相關(guān)研究表明：菌體生長(zhǎng)的最適pH值為中性偏酸,，在堿性培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢,；此菌在15℃~35℃都能正常生長(zhǎng)，在24℃~25℃條件下生長(zhǎng)最為迅速,，產(chǎn)孢量最大,；濕度對(duì)孢子萌發(fā)至關(guān)重要，RH達(dá)到85%時(shí),，孢子才開(kāi)始萌發(fā)，98% RH,，25℃時(shí),，孢子萌發(fā)速率最高；含N.S的培養(yǎng)基質(zhì)能刺激菌體細(xì)胞內(nèi)酶的產(chǎn)生并增加酶的活性,，當(dāng)培養(yǎng)基中添加可溶性淀粉時(shí),，能增加此菌對(duì)化學(xué)合成物的溶解作用。

    淡紫擬青霉施用到土壤中能引起土壤菌系的明顯變化,，土壤中多種習(xí)居菌會(huì)抑制淡紫擬青霉孢子萌發(fā),，同時(shí)此菌也會(huì)抑制土壤中其它菌類(lèi)如放線菌。孫漫紅報(bào)道了大豆田施用淡紫擬青霉菌劑對(duì)根圍菌系的影響,。在施菌的第1周內(nèi),，根系微生物的種類(lèi)明顯減少，真菌,、細(xì)菌和放線菌分別減少16%,、27%和37%，4周后菌系趨于平衡,，菌劑對(duì)大豆根部有一定親和能力,，可以在根圍或抑內(nèi)定殖。

    Mg2+與Cu2+對(duì)此菌都有不同程度的抑制作用,，其中0.4mol/L以上的Mg2+和0.1X10-3mol/L以上的Cu2+抑制作用明顯,。紫外線對(duì)菌體有明顯的抑殺作用，但弱侵染菌系比強(qiáng)株系更為敏感,。菌體在紫外線照射下能發(fā)生變異,，因此，紫外線也可用于菌株的誘變育種,，付艷平利用紫外線照射孢子和菌絲原生質(zhì)體,、60Cor射線照射孢子等多種方法,，進(jìn)行誘變育種并篩選強(qiáng)毒力菌株。結(jié)果表明以上幾種方式都能產(chǎn)生明顯誘變效能,。紫外線照射孢子效果最佳,，獲得的誘變株對(duì)絲核菌Rhizoctoniasolani拮抗能力比原有菌株提高100%以上。

    分子生物學(xué)方面,，近幾年有較大的進(jìn)展,。Obornik M利用RAPD技術(shù)來(lái)分析淡紫擬青霉與其它蟲(chóng)生真的菌的關(guān)系，研究基因變異與系統(tǒng)發(fā)育,，反映菌系生活史,；應(yīng)用RAPD技術(shù)與酶分析方法研究淡紫擬青霉表現(xiàn)型與基因型及其對(duì)線蟲(chóng)的控制效能的影響，結(jié)果表明擬青霉的不同菌株有廣泛的地理分布,，菌株的基因型與其侵染能力沒(méi)有明顯關(guān)聯(lián),。

二、淡紫擬青霉菌的控害效能

    1.對(duì)植物病原線蟲(chóng)：淡紫擬青霉對(duì)植物根結(jié)線蟲(chóng)的寄生作用是秘魯國(guó)際馬鈴薯研究中心的P.Jatala首先發(fā)現(xiàn)的,，并在1979年首次報(bào)道,，該菌是南方根結(jié)線蟲(chóng)與白色胞囊線蟲(chóng)卵的有效寄生菌，對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的卵寄生率高達(dá)60%~70%,。此后,，有60多個(gè)國(guó)家的科學(xué)工作者對(duì)此菌進(jìn)行了研究。多年的實(shí)踐證明：淡紫擬青霉對(duì)多種線蟲(chóng)都有防治效能,，其寄主有根結(jié)線蟲(chóng),、胞囊線蟲(chóng)、金色線蟲(chóng),、異皮線蟲(chóng),、甚至人畜腸道蛔蟲(chóng)，是防治根結(jié)線蟲(chóng)最有前途的生防制劑,。菲律賓亞州技術(shù)中心已將此菌商品化,，以BIOCON出售這種真菌制劑。

    科研專(zhuān)家用麥粒培養(yǎng)淡紫擬青霉,，并用此菌防治煙草根結(jié)線蟲(chóng)（Meloldogyne javanica）,，盆栽試驗(yàn)用菌量為50g/每株，2.7周后調(diào)查發(fā)現(xiàn)：土壤中2齡線蟲(chóng)減少76.3%,，根結(jié)指數(shù)下降43.6%,，煙株根生長(zhǎng)量增加153.7%，地上部分鮮重增加44.4%,。Maheswari-Tu先將番茄苗浸泡在淡紫擬青霉的孢子懸浮液和菌絲懸浮液中,，再種到接線蟲(chóng)的土壤中，結(jié)果表明：孢子懸浮液處理使卵囊數(shù)減少63%~80%,，明顯優(yōu)于菌絲懸浮液,。Davide等人用此菌浸薯塊或直接將菌劑施入土中防治馬鈴薯金線蟲(chóng)（Cloboclerarestrochiensis）,，施用菌劑后馬鈴薯增產(chǎn)20.3%~36.5%；防治秋葵根結(jié)線蟲(chóng),，施菌三個(gè)月后,，線蟲(chóng)比對(duì)照減少66%~77%，莢數(shù)增加39%~41%,，重量增加45%~54%,，防治效果與呋喃丹或滅克靈相仿。

    菌劑類(lèi)型有自然基質(zhì)（麥粒,、米粒,、綠豆上長(zhǎng)滿菌絲）、桔存菌絲粉,、發(fā)酵液或?yàn)V液以及孢子懸浮液等,。Cabanillas-E推出5種淡紫擬青霉孢子的制劑類(lèi)型，它們是alginate Pelipets,、diatomaceous earth granules,、麥粒、土壤,、土壤+幾丁質(zhì)，在麥粒和gran ules中,，真菌活力最強(qiáng),，在alginate pelite中活力中等，在土壤及添加幾丁質(zhì)的土壤中孢子活力最低,。菌劑施用方法多與播種結(jié)合,，把種子、塊根或塊莖浸浴在菌劑中,，還可用菌劑做成胞衣種子,。

    多種有機(jī)肥料、植物殘?jiān)鼘?duì)此菌有促長(zhǎng)與增效作用,。如Rao-MS的試驗(yàn)結(jié)果表明楝樹(shù)（neem）葉片懸液對(duì)淡紫擬青霉有明顯增效作用,。許多含N的化肥、幾丁質(zhì)或其他生防菌也能起增效作用,。印度科研人員Maheswari-Tu結(jié)合使用巴斯德氏芽菌屬（Pasteuria Penetruns）和擬青霉防治番茄根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyne Javarila,，并與兩者分別使用相對(duì)照，結(jié)果表明,，真,、細(xì)菌結(jié)合效果更為顯著，線蟲(chóng)擬制率達(dá)到66.2%,，根系干重增加33.34%,。Bhat-M研究了Glomuo Mosseae與淡紫擬青霉在抑制番茄根結(jié)線蟲(chóng)方面的協(xié)同增效作用,，兩種生防菌結(jié)合使蕃茄產(chǎn)量增加4倍，卵囊抑制率增加25%,。

    有關(guān)淡紫擬青霉菌對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的抑制機(jī)理,，國(guó)內(nèi)外也有研究報(bào)道，華靜月認(rèn)為淡紫擬青霉與線蟲(chóng)卵囊接觸后,，在粘性基質(zhì)中,，生防菌菌絲包圍整個(gè)卵，菌絲末端變粗,，由于外源性代謝物和真菌幾丁質(zhì)酶的活動(dòng)使卵殼表層破裂,，隨后真菌侵入并取而代之。淡紫擬青霉也能分泌毒素對(duì)線蟲(chóng)起毒殺作用,，Djian-C從擬青霉的發(fā)酵液中分離出特異性的殺線蟲(chóng)活性代謝物,，利用液相色譜法可純化出醋酸，這種醋酸只有在羧化結(jié)構(gòu)才對(duì)線蟲(chóng)有毒性,，線蟲(chóng)的不同幾丁質(zhì)區(qū)對(duì)醋酸有選擇滲透能力,。孫漫紅研究表明：淡紫擬青霉M-14菌株發(fā)酵濾液對(duì)大豆胞囊線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的抑殺作用，毒性成分是一種蛋白酶,。

    2.對(duì)昆蟲(chóng)：據(jù)文獻(xiàn)資料,，淡紫擬青霉可寄生半翅目的荔枝蝽蟓、稻黑蝽,；同翅目的葉蟬,、褐飛虱；等翅目的白蟻,；鞘翅目的甘薯象鼻蟲(chóng)以及鱗翅目的茶蠶,、燈蛾等。

    據(jù)林伯欣報(bào)道,，在荔枝園中,，淡紫擬青霉對(duì)荔枝蝽能產(chǎn)生較高的自然寄生率，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理7d或更長(zhǎng)時(shí)間可致死荔枝蝽,。Rombach-MC利用淡紫擬青霉枯存菌絲粉防治褐飛虱和稻黑蝽,，防治褐飛虱的用菌量為1.5g/ha~21g/ha，3周后調(diào)查,，褐飛虱（Nilaparrata lugens）死亡率達(dá)63%~98%,。對(duì)稻黑蝽的田間試驗(yàn)是在稻田中進(jìn)行，籠罩住稻黑蝽,，向罩內(nèi)噴菌絲懸浮液或孢子懸浮液,，試驗(yàn)分4個(gè)小區(qū)，結(jié)果表明所有小區(qū)稻黑蝽數(shù)量明顯下降。兩種處理效果無(wú)顯著差異,。

    研究人員比較了幾種蟲(chóng)生真菌對(duì)白蟻（Odontoermes wallonesis）的侵染效果,，認(rèn)為白僵菌侵染效果最好，其次是綠僵菌,、淡紫擬青霉,、玫煙擬青霉。小工蟻?zhàn)钜赘腥鞠x(chóng)生真菌,，其次是大工蟻和兵蟻,。白蟻感染淡紫擬青霉10d，最高死亡率可達(dá)90%,，相關(guān)研究還發(fā)現(xiàn),，擬青霉對(duì)甘薯象鼻蟲(chóng)有侵染作用，但在實(shí)驗(yàn)室適宜條件下致死率仍較低,。

    3.對(duì)植物病原菌：王明組研究了淡紫擬青霉36-1菌株對(duì)植物病原菌的拮抗效能,，它們是玉米小斑病、小麥赤霉病,、黃瓜炭疽病菌,、棉花枯萎病和水稻惡苗病，淡紫擬青霉36-1菌株活菌體液對(duì)其菌絲生長(zhǎng)抑制率分別為80.22%,、80.50%,、77.71%、75.30%和61.36%,；處理柑桔果面,，青、綠霉擴(kuò)展抑制率為65.97%,。批量處理柑桔，好果率為78.44%,，比對(duì)照高54.44%,。肖炎農(nóng)研究證明淡紫擬青霉菌株36-1對(duì)水稻惡苗病和紋枯病具有拮抗活性，Abdul利用淡紫擬青霉,、厚壁輪枝菌及楝樹(shù)提取物60EC控制棉花細(xì)菌性枯萎病與棉花卷葉病毒病,，結(jié)果表明：擬青霉菌能明顯降低棉花（NIAB-18、CIM-240品種）的病毒性病害,，并有效抑制細(xì)菌性枯萎病,。相關(guān)研究還證實(shí)：淡紫擬青霉能顯著降低向日葵和納豆根癌病的發(fā)病率，并且能抑制由鐮孢菌屬引起的蕃茄根腐病,。研究人員還從溫室中篩選出高拮抗力的菌株,，噴灑在小麥葉片上，用以控制小麥葉斑病。相關(guān)研究證實(shí),，此菌對(duì)其它植物病原菌的拮抗活性來(lái)源于肽類(lèi)衍生物leucipstain lilicon,，它能起類(lèi)似抗生素的作用。

三,、淡紫擬青霉次生代謝物的生理功效

    1.促進(jìn)植物生長(zhǎng)：在擬青霉的培養(yǎng)過(guò)程中,，特別是在特殊培養(yǎng)基與深層發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，該菌能產(chǎn)生豐富的衍生物,，其一是類(lèi)似吲哚乙酸產(chǎn)物,，它最顯著的生理功效是低濃度時(shí)促進(jìn)植物根系與植株的生長(zhǎng)，因此在植物根系施菌不僅能明顯抑制線蟲(chóng)侵染,，而且能促進(jìn)植株?duì)I養(yǎng)器官的生長(zhǎng),，同時(shí)對(duì)種子的萌發(fā)與生長(zhǎng)也有促進(jìn)作用。

    2.產(chǎn)生多種功能酶：此菌能產(chǎn)生豐富的幾丁質(zhì)酶,，幾丁質(zhì)酶對(duì)幾丁質(zhì)有降解作用,，它能促進(jìn)線蟲(chóng)卵的孵化，提高擬青霉菌對(duì)線蟲(chóng)的寄生率,，此外還能產(chǎn)生細(xì)胞裂解酶、葡聚糖酶與絲蛋白酶,，Galvez-Mariscal研究表明：在高效菌株中蛋白酶和葡聚糖酶,、淀粉酶活性高出1.2~4.2倍和20~120倍,，這些酶促進(jìn)細(xì)胞分裂。

    3.降解效應(yīng)：Somaseknar研究發(fā)現(xiàn),，淡紫擬青霉能促進(jìn)難溶磷酸鹽的溶解，實(shí)驗(yàn)室研究證實(shí)：擬青霉菌的增溶效果達(dá)到30%,，其它線蟲(chóng)拮抗菌達(dá)到20%~40%,。同類(lèi)研究還表明,，擬青霉還能促進(jìn)許多化學(xué)聚合物（如農(nóng)藥，制革廢水等）的分解,，這證明淡紫擬青霉具有一定的環(huán)保效應(yīng)。

四,、小結(jié)與展望

    綜上所述,，淡紫擬青霉作為一種生防菌確有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：首先與化學(xué)農(nóng)藥相比，它具有安全性,，至今未發(fā)現(xiàn)此菌有三致作用（致畸、致突變,、致癌）,，基本上對(duì)人畜是安全的,，但這是相對(duì)的，已有許多醫(yī)學(xué)臨床報(bào)告,，表明此菌是一種機(jī)會(huì)真菌，在人畜免疫力下降或免疫缺失情況下,，能侵染人體或動(dòng)物皮膚和組織器官,；其二,，此菌有多重控害功效與生理功效，特別是對(duì)植物病原線蟲(chóng)的控害功效最為顯著,；其三，多方面研究表明該菌具有顯著的兼容性,，主要表現(xiàn)在：擬青霉與農(nóng)藥相容性較高,，只有少數(shù)的殺菌劑（如CuSO4）對(duì)此菌有抑制作用,，殺蟲(chóng)劑對(duì)此菌的抑制作用很弱，Raddy-pp利用擬青霉與化學(xué)殺線蟲(chóng)劑蟲(chóng)螨威與甲拌磷結(jié)合防治線蟲(chóng),，取得良好防效，許多化肥特別是含N化肥對(duì)此菌還有促長(zhǎng)作用,，淡紫擬青霉與多種生防菌有相互增效作用；要想大面積推廣應(yīng)用生防制劑,，其經(jīng)濟(jì)性也是不可缺少的,，而淡紫擬青霉在這方面可謂獨(dú)具優(yōu)勢(shì)，許多廉價(jià)的農(nóng)產(chǎn)品下腳料可用于大量生產(chǎn)菌劑,，其生產(chǎn)原料成本低廉,，生產(chǎn)條件也比較容易控制。

    隨著生物技術(shù)的發(fā)展，學(xué)科間協(xié)作及滲透作用增強(qiáng),，人類(lèi)將從真菌次生代謝物中獲得更多的利益,，具有遺傳多態(tài)性和生態(tài)可塑性的淡紫擬青霉也有可能成為天然的生化制劑“車(chē)間”。Cayrol-JC從淡紫擬青霉等蟲(chóng)生真菌的發(fā)酵液中提取殺線蟲(chóng)活性物,；德國(guó)學(xué)者Anke.H已篩選到高毒力的殺線蟲(chóng)真菌,，從中提取多種殺線蟲(chóng)活性次級(jí)代謝物。因此,，淡紫擬青霉的應(yīng)用研究不能只局限在寄生效能,，另一個(gè)重要的研究領(lǐng)域應(yīng)該是真菌衍生物（如毒力代謝物、抑菌素,、促生物等）,，應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，采用誘導(dǎo)與定向培養(yǎng)方式可促使蟲(chóng)生真菌生成特殊的生化產(chǎn)品,，可以預(yù)料：淡紫擬青霉在此研究領(lǐng)域也有誘人前景,。