給各位前輩問好,，老趙頭又來了,！老趙頭今天要跟大家聊聊移液器。

移液器又稱移液槍,，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具,，被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域,。

我們化工狗的貧窮你們是想不到的,，平時(shí)都是移液管、量筒的干活,，畢竟玻璃儀器耗材相對便宜,，即便如此，我們也可以標(biāo)準(zhǔn)操作,，用的專業(yè)不是,？

但想想人家生物領(lǐng)域向來都是用移液槍、瓶口分液器這些個(gè)高大上的,，默默的比一比,，檔次差太多了,，怪只怪當(dāng)初選錯(cuò)了方向。

首先我們看下移液器的外觀和功能,，以色魔（Thermo）F1手動可變量程移液器為例,，見下圖（請忽略我的渣拍照技術(shù)）。

看完了外觀和各按鈕的功能,，我們再看下移液器的原理,，按工作原理分類：

1、氣體活塞式移液器,；

2,、外置活塞式移液器。

So問題來了,，氣體活塞式移液器的原理是什么呢,？咱們看圖說話：

氣體活塞式

活塞通過彈簧的伸縮運(yùn)動來實(shí)現(xiàn)吸液和排液。加樣體積范圍：1μL-10mL,，缺點(diǎn)：不適宜移取高粘度,、易揮發(fā)的液體、易發(fā)生交叉污染,。

我們再看下外置活塞移液器的圖解：

外置活塞式

外置活塞式移液器,，活塞在吸頭內(nèi)部，直接與液體接觸,，活塞與液體之間沒有空氣段,。

適用于粘度比較大和易揮發(fā)的液體操作。無空氣間隔,，避免了樣品與空氣接觸可能發(fā)生的氣霧交叉污染,，因此非常適合珍貴的試劑和生物樣品的移取。

移液器的使用中的注意事項(xiàng)

首先,，先啰嗦一下,，一個(gè)完整的移液循環(huán)是這樣的：吸頭安裝→_→體積設(shè)定→_→預(yù)洗吸頭→_→吸液排液→_→退卻吸頭。

吸頭安裝：

（1）對于摩擦密封的吸頭,，正確的安裝方法,，旋轉(zhuǎn)安裝，具體操作是把移液器頂端插入吸頭,，在輕輕用力下壓的同時(shí),，左右微微轉(zhuǎn)動，上緊即可,，切記不能用力過猛,，更不能采取剁吸頭的方法進(jìn)行安裝，這樣會導(dǎo)致移液器內(nèi)部配件因撞擊產(chǎn)生瞬時(shí)撞擊力而變得松散，甚至對導(dǎo)致調(diào)節(jié)旋鈕卡住,，嚴(yán)重情況下可能會折斷套筒,。

（2）對于連鎖卡點(diǎn)密封的吸頭，安裝比較簡單,，只需對準(zhǔn)吸頭輕輕按壓下即可完成安裝,。

體積設(shè)定

（1）粗調(diào)：通過旋鈕將體積快速調(diào)至接近預(yù)想值；

（2）細(xì)跳：當(dāng)體積接近自己的預(yù)想值之后,，應(yīng)將移液器橫置,，水平放置，通過調(diào)節(jié)旋鈕慢慢的將數(shù)值調(diào)至所需體積,，避免視覺誤差造成的影響,；

（3）從大體積調(diào)至小體積時(shí)，正常調(diào)節(jié),，調(diào)至所需數(shù)值即可,；

（4）從小體積調(diào)至大體積時(shí)，需要先調(diào)節(jié)超過設(shè)定體積的刻度,，再回調(diào)至設(shè)定體積,，可保證最佳的精確度；

（5）在安裝完吸頭和設(shè)定好體積之后,，應(yīng)按幾次活塞,，空排一下,，為了使彈簧形伸縮更自由并且排出密封組件間的空氣,。

預(yù)洗吸頭

我們安裝了新的吸頭或者增加了移取的體積以后，應(yīng)該用要移取的液體潤洗2-3次,，以便讓吸頭內(nèi)形成同質(zhì)液膜,，確保移液工作的精度和準(zhǔn)度，使整個(gè)移液過程具有更高的重現(xiàn)性,。

吸液和排液

正向吸液：先將移液器排放按鈕按至第一液程,，將吸頭垂直浸入液面，慢慢釋放按鈕（防止液體倒吸進(jìn)入槍身腐蝕內(nèi)部結(jié)構(gòu)）,。浸入深度為液面下2-3mm,。浸入過深的話，液壓會對吸液精度產(chǎn)生一定的影響,。排液時(shí),，吸頭貼壁，先將排液按鈕按至第一液程,，略停頓后,，再按至第二液程，這樣可以保證吸頭內(nèi)無殘留液體。注意：對于10μL以下的移液體積,，應(yīng)快速按下兩個(gè)液程,，以保證液體徹底排出。

反向吸液：吸液時(shí)將按鈕按到第二液程再慢慢釋放,，這樣會多吸入一些液體,，排出液體時(shí)只要按到第一液程即可，多吸入的液體可以補(bǔ)償吸頭內(nèi)部的表面吸附,，移液完成后棄去吸頭內(nèi)多余液體即可,，該方法適用于同體積多次移液。反向吸液一般與潤濕方式結(jié)合使用,，適用于粘稠液體,，和易揮發(fā)液體。

卸吸頭

輕按吸頭推桿,，卸去吸頭,，將量程調(diào)至最大值，使彈簧處于伸展?fàn)顟B(tài),，將移液器懸掛于支架上,。

如何給移液器“體檢”？

將吸取液體后的移液器垂直靜止10秒,，觀察是否有液滴緩慢的流出,。若有則說明密封不嚴(yán)。

原因：（1）,、吸頭不匹配（2）,、吸頭沒上緊（3）移液器內(nèi)部氣密性不好

處理措施（1）、使用原裝吸頭（2）,、重新安裝吸頭（3）,、拆開移液器在活塞和O型圈接觸緊密的地方涂些硅油。彈簧不要擦硅油,，出廠時(shí)已經(jīng)擦過,，一般不需要處理，如擦拭了過多的硅油會影響彈簧的伸縮運(yùn)動,。

友情提示：最好不要拆

另外小弟在這里提醒大家小量程的移液器還是不要拆的好,，內(nèi)部結(jié)構(gòu)太復(fù)雜，密封圈太小丟了不好找,，本來湊合能用的經(jīng)我們處理之后徹底報(bào)廢可不太好,，雖然小弟經(jīng)常干這種事。

更不要拆成下圖這樣,，真的裝不回去了,。

這些不注意,，會后悔哦！

1,、  不可用大量程的移液器移取小體積的液體,；

2、  在設(shè)置量程時(shí),，所設(shè)體積應(yīng)在移液器量程范圍內(nèi)不要將旋鈕旋出量程,，否則會造成機(jī)械裝置卡住，齒輪損傷,，損壞移液器,；

3、  吸液速度應(yīng)緩慢,，速度太快容易造成液體反沖和產(chǎn)生氣泡,，導(dǎo)致移液體積不準(zhǔn)，并造成移液器損壞,；

4,、  定期清潔移液器，用酒精棉擦拭即可,，當(dāng)密封不好或者倒吸時(shí)需要拆開擦拭內(nèi)部,，清潔完活塞和內(nèi)部組件，然后在活塞和O型圈上用棉簽,、毛刷或無塵布輕輕涂一層硅油,。

說說校準(zhǔn)那些事兒！

什么時(shí)候需要校準(zhǔn),？

1,、  常規(guī)使用每半年校準(zhǔn)一次；

2,、  倒吸,、拆裝之后需要校準(zhǔn),；

3,、  維修之后要校準(zhǔn)；

4,、  感覺移液器不準(zhǔn)的時(shí)候,，也需要校準(zhǔn)。

下面看下我手里的這支移液器出廠的校準(zhǔn)報(bào)告都有啥內(nèi)容,，還是看圖說話,。

到這里順便說一下，咱們拿來校準(zhǔn)移液器的天平首先要保證是沒問題的奧,，天平室的操作條件滿足要求,、天平是經(jīng)過計(jì)量檢定并校準(zhǔn)的,。那么我們來看下下面這個(gè)例子

以天平界老大梅特勒新出的XPE204為例，官網(wǎng)列出了最小稱量值（USP）為82.0mg,。也就是說稱量小于82.0mg以下的質(zhì)量都是不能滿足USP要求的,。

我們再降低點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)按照

來算一下，這個(gè)天平的最小稱量值：

Max=220g ,、d=0.0001g這是MT官網(wǎng)給出的數(shù)據(jù),，按照上表我們可以算出此萬分之一的天平最小稱量值為100e=100mg，這個(gè)數(shù)字是比較寬泛的,。為方便計(jì)算我們姑且把水的密度當(dāng)做1mg/uL,。也就是我們至少要量取大于100ul的水，此時(shí)的稱量值才是可信的,。這也是為什么在校準(zhǔn)報(bào)告中校準(zhǔn)20uL使用的天平室十萬分之一的,，而不是萬分之一的。

不得不吐的槽：

這是小弟在百度文庫看到的某疾控中心移液器的校準(zhǔn)SOP,，稱量幾毫克用萬分之一的天平,，移液器是校準(zhǔn)還是校不準(zhǔn)？我不是找茬的,，無意中看到而已,。

言歸正傳：如何校準(zhǔn)移液器？

工欲善其事必先利器,，條件,，工具，都準(zhǔn)備好了,，那么我們就開始吧,。

色魔手動移液器的工具是長這樣子滴：

說明書里有詳細(xì)的校準(zhǔn)操作步驟，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)增大容量,，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)減小容量,。先校準(zhǔn)體積小的那一點(diǎn)，再校準(zhǔn)體積大的那一點(diǎn),。若數(shù)值小的一點(diǎn)校準(zhǔn)通過,，在校準(zhǔn)數(shù)值大的那一點(diǎn)過程中又調(diào)整了螺母還需再次校準(zhǔn)體積小的那一點(diǎn)。手動多道移液器的校準(zhǔn)比手動單道移液器校準(zhǔn)多了兩步,，第一步是吸液后觀察所有通道是否在一水平面,，如果在同一水平面那么開始校準(zhǔn)，如果不在同一水平面,，排除吸頭安裝問題后,，我們就要開拆了。

調(diào)節(jié)完組裝回去后,，再次實(shí)驗(yàn)吸液時(shí)各通道液面是否在同一平面,，假定我們修好了,，就可以校準(zhǔn)了，對于多通道的移液器,，我們可以校準(zhǔn)兩側(cè)的兩個(gè)通道即可,。據(jù)說工廠里有一臺價(jià)值上百萬的天平，一次可以做出多個(gè)通道的數(shù)值,，跟普通天平不一樣,，那臺天平是有多個(gè)傳感器的，好神奇,，真想去看看廬山真面,。

電動移液器的校準(zhǔn)比較方便了，在機(jī)器里面有校準(zhǔn)菜單,，只需輸入真實(shí)稱量值即可,。

小編后語： 

不管是實(shí)驗(yàn)室精密分析儀器也好，小型的常用設(shè)備也好,，實(shí)驗(yàn)室常用耗材也好,，校準(zhǔn)、標(biāo)定,、期間核查,、定期維護(hù)，都是少不了的,，對儀器越了解,，做起來就越得心應(yīng)手、游刃有余,，培訓(xùn)課有上的必要,，那畢竟是經(jīng)驗(yàn)豐富工程師多少年總結(jié)的心血經(jīng)驗(yàn)，可以讓我們少走彎路,，直達(dá)目的地,，但還少不了的是：自己多動手、多思考,，才能發(fā)現(xiàn)問題,、解決問題。曾有人跟小編說過：儀器故障了,，是值得高興的,，因?yàn)槲覀兘K于有機(jī)會拆儀器了,，只有拆儀器,，才能更深刻的了解儀器、解決故障,。好多人都是用了某儀器3,、4年,，卻連儀器構(gòu)造都說不出，更別提拆了,。,。。,。,。一說剎不住了，總之呢,，小編的大意就是要說：當(dāng)你把儀器“玩”的如打游戲般游刃有余的時(shí)候,，你就是專家了。