1．純菌種的分離 天麻所用蜜環(huán)菌的菌種可以從子實(shí)體經(jīng)孢子分離,、從菌索經(jīng)組織分離以及培育大麻,、豬苓和天麻的舊菌材或野生蜜環(huán)菌獲得。在此僅介紹從菌索分離的方法,。

培養(yǎng)基：①麥芽糖2.5克,，蛋白胨、瓊脂2克,，20％大麥芽煮汁成100毫升,，pH5～6.5；②去皮馬鈴薯200克,，葡萄糖20克,，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，維生素B110毫克,，水100毫升,，pH5～6.5。

任選上述兩種培養(yǎng)基中的一種,。配好后在121℃下滅菌半小時(shí),，擺成斜面。選幼嫩而健壯的野生蜜環(huán)菌菌索切取尖端,，用70％的酒精進(jìn)行表面消毒5分鐘,，在無(wú)菌條件下，去掉皮鞘,，取白色菌髓部分,，切成長(zhǎng)1厘米左右的小段接入試管斜面培養(yǎng)基上，每管取一段即可,，在20～25℃的條件下培養(yǎng),，15天左右，蜜環(huán)菌菌絲就可以長(zhǎng)滿斜面,。如果嚴(yán)格按無(wú)菌要求操作,，就可以得到純蜜環(huán)菌的母種。如果有雜菌污染,，應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)接,。轉(zhuǎn)接時(shí)要注意不要將轉(zhuǎn)接的蜜環(huán)菌菌絲污染上雜菌。經(jīng)幾次轉(zhuǎn)接純化,，就可以得到純的蜜環(huán)菌母種,。

2．蜜環(huán)菌原種的培養(yǎng)（2級(jí)菌種） 培養(yǎng)基：①木屑60％，麥麩35％,，石膏粉1％,，米糖4％，含水量60％,，pH5～6.5,；②麥麩50％，米糖20％,，木屑29％，石膏粉1％,，含水量55％,，pH5～6.5。任選上述兩種培養(yǎng)基配方中的一種,，按量均勻混合后,，裝入廣口瓶或塑料袋中壓實(shí)，中間用木棍插一直徑約2厘米的洞，包扎好后,，常規(guī)滅菌,。接種與培養(yǎng)：滅菌冷卻后的培養(yǎng)基就可以用來(lái)接種，按無(wú)菌要求將試管斜面的蜜環(huán)菌菌絲轉(zhuǎn)接到廣口瓶培養(yǎng)基的洞中間,，用培養(yǎng)基蓋好,，包扎好后20～25℃條件下培養(yǎng)，約2個(gè)月,，菌絲可布滿全瓶,。通常，一試管斜面可轉(zhuǎn)接8～10瓶原種培養(yǎng)基,。如果操作不熟練,，每瓶在原種培養(yǎng)基中可以多轉(zhuǎn)接一些母種菌絲，甚至1瓶母種轉(zhuǎn)接1瓶原種都可,。

3．栽培種的培養(yǎng) 培養(yǎng)基：①雜木屑93％,，玉米粉（或麥麩）5％，過磷酸鈣2％,，含水量70％,。②櫟樹或其他闊葉樹樹葉與雜木屑各50％，含水量65％,；③雜木枝條或段木片（直徑1厘米左右）100％,。用水泡透。任選上述3種培養(yǎng)基中的一種或原種培養(yǎng)基,，混勻拌好,，包扎，常規(guī)滅菌,。按無(wú)菌要求,，接入蜜環(huán)菌原種。20～25℃下培養(yǎng),，菌絲長(zhǎng)滿全瓶即可（約2個(gè)月）,。每瓶原種可轉(zhuǎn)接栽培種40瓶左右。

4．天麻菌材和苗床的培養(yǎng) ①時(shí)間,，春季氣溫12℃以上時(shí)（為4～5月份栽培豬苓準(zhǔn)備）（10-5月份栽培天麻）或6～7月（為8～10月栽培豬苓準(zhǔn)備）（5-7月栽培天麻箭麻培育天麻種子）,。②備料，選木質(zhì)堅(jiān)硬的闊葉樹,，如櫟樹,、楓樹、樺樹,、桑樹,、柳樹、板栗等，直徑10厘米左右,，長(zhǎng)60厘米左右,。在段木的3～4面每隔4厘米左右砍一深達(dá)木質(zhì)部的鮮鱗口備用。③栽培菌材和菌床,，菌材和菌床的培養(yǎng)方法類似天麻栽培中蜜環(huán)菌菌材和菌床的培養(yǎng)方法,，讀者可以參考天麻栽培技術(shù)中相應(yīng)的部分。